Болезни и вредители пчел - часть 39

в 1 г меда (в пересчете на сухие вещества), в течение часа при

температуре 40 ± 1

 до веществ, не окрашиваемых йодом в си-

ний цвет.

Для постановки реакции в

 пробирок разливают 10

раствор меда и другие компоненты согласно таблице 8.

8. Постановка реакции на диастазную активность

Пробирки закрывают пробками, тщательно перемешивают

содержимое, помещают в водяную баню на 1 ч при температуре

 1

 Затем вынимают их из водяной бани и охлаждают под

струей воды до комнатной температуры, после чего в каждую

пробирку добавляют по одной капле раствора йода (0,5 г йода,

1 г йодистого калия в 100 мл дистиллированной воды). В тех

пробирках, где крахмал остался неразложенным, появляется

синяя окраска, при отсутствии крахмала — темноватая, с частич-

но разложенным — фиолетовая. Последняя слабоокрашенная

пробирка перед рядом обесцвеченных (с желтоватым оттенком)

соответствует диастазной активности испытуемого меда

(см. табл. 8).

Если нет растворимого крахмала, его можно приготовить

следующим способом: 250 г картофельного крахмала разводят

306

в 1 л дистиллированной воды и затем отстаивают. После отстоя

воду сливают. К осадку добавляют

 4

 раствора НС1,

выдерживают

 ч и смесь фильтруют. Крахмал, собранный

с фильтра, многократно промывают дистиллированной водой до

нейтрализации реакции по лакмусу и высушивают при температу-

ре 90 °С.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНВЕРТИРОВАННОГО САХАРА.

марное содержание в меде глюкозы и фруктозы принято обозна-

чать

 Количество инвер-

тированного сахара в меде менее 70 % свидетельствует о его

фальсификации. Но и нормальное количество инвертированного

сахара не гарантирует натуральность продукта.

Из исследуемого меда готовят 10 %-ный водный раствор.

Затем из него приготавливают 0,25 %-ный раствор. Для этого

в мерную колбу на 200 мл отмеряют 5 мл 10 %-ного раствора

меда, доводят до метки водой и перемешивают.

В колбу вливают 10 мл 1 %-ного раствора красной кровяной

соли

 2,5 мл 10 %-ного раствора едкого натра, 5 мл

0,25 %-ного раствора меда и одну каплю 1 %-ного раствора

метиленовой сини. Смесь нагревают до кипения и при постоянном

слабом кипении титруют испытуемым 0,25 %-ным раствором

меда до исчезновения синей (а к концу реакции слегка фиолето-

вой) окраски.

Восстановление метиленовой сини редуцирующими веще-

ствами меда происходит с некоторым опозданием, поэтому титро-

вать следует со скоростью не более одной капли через две се-

кунды. Возобновление окраски после остывания смеси в расчет не

принимается. Титрование проводят

 раза и выводят среднее

значение. Расхождение между параллельными исследованиями

не должно превышать 1 %.

Содержание инвертированного сахара в меде определяют по

таблице 9.

 Если содержимое колбы обесцвечивается

без титрования, это указывает на содержание в исследуемом меде

инвертированного сахара более 81,2 %.

О п р е д е л е н и е  п р е д е л ь н о г о  с о д е р ж а н и я

и н в е р т и р о в а н н о г о

 В колбу отмеряют

 мл

1 %-ного раствора красной кровяной соли, 2,5 мл 10 %-ного

раствора едкого натра и 5,8 мл 0,25 %-ного раствора исследуемо-

го меда. Содержимое колбы нагревают до кипения, кипятят 1 мин

и прибавляют каплю 1 %-ного раствора метиленовой сини. Если

жидкость не обесцвечивается, в исследуемом меде инвертиро-

ванного сахара меньше 70 %; такой мед фальсифицирован.

О п р е д е л е н и е  п р и м е с и  и с к у с с т в е н н о

в е р т и р о в а н н о г о

 Для определения в меде

примеси искусственно инвертированного сахара пользуются ре-

акцией, основанной на том, что при превращении тростникового

(свекловичного) сахара в инвертированный посредством кислот

И* 307

9. Содержание инвертированного сахара в меде

Количество 0,25 %-

ного раствора
пошедшее на титро-

вание,

5,0
5,1

5,2
5,3
5,35
5,4
5,45
5,5
5,6
5,7
5,75
5,85
5,9
6,0
6,1
6,2

6,3
6,4
6,5
6,6
6,7
6,8
6,9
7,0
7,1

7,2
7,3

Инвертирован-

ный сахар, %

81,2
79,6
78,0
76,6
75,9
75,2
74,5
73,8

72,5
71,3
70,7
69,5
68,9
67,8
66,6
65,6
64,5
63,5

62,6
61,6
60,7
59,8
59,0

58,2
57,3
56,6
55,8

Количество 0,25 %•

ного раствора меда,
пошедшее на титро-

вание,

7,4
7,5
7,6
7,7

7,8

8,0
8,1

8,2
8,3
8,4

8,5
8,6
8,7
8,8

8,9
9,0
9,1

9,2
9,3
9,4
9,5
9,6

9,7
9,8
9,9

10,0

Инвертирован- |

ный сахар, %

55,1
54,3
53,6
53,0

52,3
51,6

51,0
50,4

49,8
49,2
48,6

48,0
47,5
46,9
46,4

45,9
45,4
44,9

44,4
43,9
43,5
43,0
42,6
42,2
41,7
41,3

40,9

часть левулезы (плодового сахара) разрушается, при этом обра-

зуется оксиметилфурфурол, растворимый в воде, который в при-

сутствии концентрированной соляной кислоты и резорцина дает

вишнево-красное окрашивание.

В фарфоровую ступку вносят

 г меда, добавляют

 мл эфира и тщательно растирают пестиком; раствор слива-

ют в фарфоровую чашку (часовое стекло) и добавляют

 кристалликов резорцина (его можно вносить в ступку в про-

цессе приготовления раствора). Ждут, пока испарится эфир.

Затем на сухой остаток наносят

 капли концентрированной

Учет реакции: а) зеленовато-грязная или желтая окраска —

отрицательная; б) оранжевая или слабо-розовая — слабополо-

жительная (наблюдается при прогревании меда); в) красная,

вишнево-красная, оранжевая, быстро переходящая в красную,—

положительная (мед содержит примесь искусственно инвертиро-

ванного сахара).

308

ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРОЗЫ (ТРОСТНИКОВОГО САХА-

РА). При фальсификации меда сахарозой ухудшается органо-

лептика, понижаются диастазная активность, содержание мине-

ральных веществ и инвертированного сахара, а количество

тростникового сахара повышается.

В колбу на 200 мл вносят 5 мл 10 %-ного раствора меда

и 45 мл воды. Вставив в колбу термометр, помещают ее в водяную

баню с температурой 80 °С. Доводят температуру содержимого

колбы до

 (на что обычно уходит 2—3 мин), быстро

прибавляют 5 мл соляной кислоты в разведении 1:5, перемешива-

ют взбалтыванием, выдерживают при этой температуре 5 мин

и сразу же охлаждают

 °С. Перед удалением термо-

метра из колбы его предварительно ополаскивают дистиллиро-

ванной водой. Раствор нейтрализуют 10 %-ным раствором едкого

натра при индикаторе метилоранже (1—2 капли) до оранжево-

желтой окраски.

Объем инверта доводят до 200 мл и трехкратным переворачи-

ванием колбы перемешивают полученный 0,25%-ный раствор

меда; определяют наличие инвертированного сахара.

Содержание сахарозы в меде вычисляют по формуле:

С =

 • 0,95,

где С — содержание сахарозы в меде, %; х — содержание инвертиро-
ванного сахара после инверсии, %; у — содержание инвертированного
сахара до инверсии, %.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРНОГО «МЕДА». Сахарный

кормочный, экспрессный) «мед» получается в результате кормле-

ния пчел сахарным сиропом. Такой «мед» является фальсифика-

том.

Свежеоткачанный сахарный «мед» имеет жидкую конси-

стенцию, светлую окраску, слабовыраженный аромат, отсутству-

ет свойственная натуральному меду терпкость.

Химические показатели для сахарного «меда» следующие:

общая кислотность не более одного нормального градуса, золь-

ность ниже 0 1 %, содержание тростникового сахара выше 5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОГРЕВАНИЯ МЕДА. Мед нагревают

для декристаллизации, прекращения брожения и при фальсифи-

кациях. При этом ухудшаются органолептические показатели

(мед темнеет, ослабевает аромат, появляется привкус карамели),

снижаются ферментативная активность и бактерицидность, уве-

личивается содержание оксиметилфурфурола.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БРОЖЕНИЯ МЕДА. Данный вид порчи

является следствием хранения меда с содержанием воды выше

21 %. Мед обладает выраженной гигроскопичностью, поэтому

хранение его в негерметичной таре при высокой влажности окру-

жающего воздуха ведет к повышению содержания воды в меде.

Осмофильные дрожжи активизируются, мед начинает бродить.

В начале брожения отмечают усиление аромата, затем

309

появляется кисловатый запах, усиливающийся при нагревании

меда. Мед вспучивается, на поверхности появляется пена, а в нем

самом пузырьки газа. При микроскопировании такого меда обна-

руживают дрожжи.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСИ СВЕКЛОВИЧНОЙ (САХАР-

НОЙ) ПАТОКИ. Добавление свекловичной патоки в мед ухуд-

шает его органолептику, снижает содержание инвертированного

сахара и диастазную активность.

 к 5 мл водного раствора

меда, приготовленного в соотношении 1:2, прибавляют 5—10 ка-

пель 5

 азотнокислого серебра. Помутнение смеси и по-

явление белого осадка свидетельствуют о присутствии в меде

свекловичной патоки.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСИ КРАХМАЛЬНОЙ ПАТОКИ.

Изменения в меде при добавлении в него крахмальной патоки

такие же, как при внесении свекловичной патоки.

К а ч е с т в е н н а я

 профильтрованного

водного раствора меда, приготовленного в соотношении 1:2,

прибавляют по каплям 10 %-ный раствор хлористого бария.'

Помутнение и выпадение белого осадка после прибавления пер-

вых капель реактива свидетельствуют о присутствии в меде

крахмальной патоки.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСИ КРАХМАЛА И МУКИ. Изме-

нения в меде при добавлении крахмала и муки аналогичны

изменениям, наблюдаемым при внесении примесей свекловичной

патоки.

К а ч е с т в е н н а я

 5 мл водного раствора

меда в соотношении 1:2 нагревают в пробирке до кипения, ох-

лаждают до комнатной температуры и прибавляют

 капель

йода. Появление синей окраски свидетельствует о присутствии

в меде крахмала или муки.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСИ ЖЕЛАТИНА. Желатин

бавляют в мед для повышения вязкости. При этом ухудшаются

вкус и аромат, снижаются ферментативная активность и содер-

жание инвертированного сахара, количество белка повыша-

ется.

К а ч е с т в е н н а я

 к 5 мл водного раствора

меда в соотношении 1:2 добавляют 5—10 капель 5 %-ного

раствора танина. Образование белых хлопьев свидетельствует

о присутствии в меде желатина. Появление слабого помутнения

оценивается как отрицательная реакция на желатин

ОПРЕДЕЛ ЕНИ Е ПАДЕВОГО МЕДА. Падевый мед

ляют по органолептическим показателям (см. табл. 5) и с по-

мощью химических реакций. Главное отличие химического соста-

ва падевого меда от цветочного — большое количество в нем

минеральных веществ (табл. 10).

При постановке качественных проб падевые вещества (в ос-

новном декстрины) выпадают в осадок в результате действия

соответствующих реагентов.
310

10. Химический состав пади, падевых и цветочных медов

И з в е с т к о в а я

 В пробирке одну объемную

часть водного раствора меда в соотношении

 смешивают с дву-

мя объемными частями известковой воды и нагревают до кипе-

ния. При наличии падевого меда образуются хлопья бурого

цвета, выпадающие в осадок.

Для приготовления известковой воды берут одну часть

негашеной извести и одну часть воды; раствор выдерживают

12 ч (в течение этого времени

 раза перемешивают). Верхний

прозрачный слой жидкости сливают и используют для реакции.

Р е а к ц и я с

 В про-

бирку наливают 2 мл водного раствора меда в соотношении 1:1,

затем добавляют 2 мл воды и 5 капель 25 %-ного раствора уксус-

нокислого свинца, тщательно перемешивают и ставят в водяную

баню при температуре

 на 3 мин. Образование рыхлых

хлопьев, выпадающих в осадок, свидетельствует о положитель-

ной реакции на падь. Помутнение жидкости любой степени без

хлопьев и осадка считается отрицательной реакцией.

С п и р т о в а я

 В пробирку наливают 1 мл

раствора меда на дистиллированной воде (1:2), добавляют туда

10 мл 96 %-ного этилового спирта и взбалтывают. Цветочный мед

слабо мутнеет, мед с примесью пади сильно мутнеет и окрашива-

ется в молочно-белый цвет. Чисто падевый мед мутнеет и дает

хлопьевидный осадок. Для постановки реакции нельзя брать

меньший объем спирта или другую его концентрацию.

Количественное содержание пади в меде можно определить

тремя методами: постановкой известковой реакции; капельным

методом (по Темнову); электрометрическим способом.

И з в е с т к о в а я  р е а к ц и я наиболее точная. В химиче-

ский стакан отвешивают

 меда и добавляют 3 мл дистиллиро-

ванной воды. Полученный раствор нагревают до кипения, затем

добавляют

 мл известковой воды и снова нагревают до кипения.

После охлаждения содержимое перемешивают стеклянной па-

311

 разливают в две градуированные конические пробирки

и центрифугируют 3 мин при

 тыс. об/мин или в течение

5 мин. Осветленную жидкость из обеих пробирок сливают, осадок

в одной пробирке перемешивают палочкой и переносят в другую

пробирку. Чтобы весь осадок был перенесен в другую пробирку,

стенки стаканчика и первой пробирки смывают просветленной

жидкостью. После этого общий раствор центрифугируют еще

3 мин и измеряют объем осадка по делениям центрифужной

пробирки.

Количество пади вычисляют по формуле:

где х — содержание пади, %; у — объем осадка в центрифужной про-

бирке,

О п р е д е л е н и е  т о к с и ч н о с т и  п а д е в о г о  м е д а

 Берут примерно 100 внутриульевых молодых пчел

(желательно одновозрастных). Для этого из пчелиной семьи

извлекают соторамку с печатным расплодом на выходе молодых

пчел. Взрослых пчел (разновозрастных) стряхивают в улей,

а соторамку вставляют в застекленную или сетчатую кассету,

которую помещают в термостат (температура

 и относи-

тельная влажность

  % ) . Затем одновозрастных пчел,

вышедших из печатного расплода, берут эксгаустером и помеща-

ют в энтомологические садки. В верхнее отверстие садка ставят

опрокинутую вверх дном, обвязанную марлей, стеклянную ба-

ночку, наполненную испытуемым медом, в контроле — цветочным

доброкачественным медом или сахарным сиропом (1:1). Пчелы

питаются медом через марлевую повязку. Ежедневно со дна

садков извлекают погибших пчел и подсчитывают их. Максималь-

ная продолжительность жизни опытных пчел в 2 раза меньше,

чем контрольных.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЯДОВИТОСТИ МЕДА. Известны случаи

отравления людей ядовитым или пьяным медом. Данный вид меда

пчелы собирают в период цветения азалии, рододендрона, горно-

го лавра, багульника, дурмана, белены, аконита и других ядови-

тых растений. Ядовитым началом считают глюкозид андромедо-

Для определения токсичности белым мышам подкожно вво-

дят по 1 мл 50

 раствора меда на дистиллированной воде.

Если мед токсичен, то уже в первые часы после введения погибает

до 75 % подопытных животных. Остальные гибнут в течение

суток.

В качестве дополнительного метода, подтверждающего ток-

сичность меда, следует проводить анализ пыльцы. Для этого

необходимо знать морфологию пыльцевых зерен основных расте-

ний, из нектара которых получается ядовитый мед.

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕДА НА НАЛИЧИЕ АНТИБИОТИ-

КОВ. В основе определения антибиотиков (стрептомицина, хлор-

312

тетрациклина, неомицина и эритромицина) лежит принцип диф-

фузии в агар. Отличие в их определении состоит в использовании

различных тест-культур, сред и буфера.

Для определения  с т р е п т о м и ц и н а необходимы:

споры культуры Вас. subtilis, штамм 6633;

среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар

Хоттингера), содержащий аминный азот, двузамещенный фосфат

 агар-агар (рН

буферный раствор:

 фосфатный буфер с рН 7,8—

8,0 (состоящий из

 г

 и 9,073 г

 Для

приготовления буферного раствора можно использовать соли

калия. Каждую навеску соли отдельно растворяют в 1 л дистил-

лированной воды в мерной колбе, а затем смешивают в соотноше-

нии: 9,5 части двузамещенного фосфата натрия и 0,5 части

 фосфата натрия.

Для определения  х л о р т е т р а ц и к л и н а требуются:

споры культуры Вас. subtilis, штамм

среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар

Хоттингера), содержащий аминный азот; агар-агар; рН среды

буферный раствор цитратно-солянокислый с рН

Для приготовления буфера навеску лимоннокислого трехзаме-

щенного натрия 8,6 г растворяют в 400—500 мл дистиллиро-

ванной воды. В этот же раствор добавляют 5,6 мл соляной

кислоты (плотность 1,18—1,19) и доливают дистиллированной

воды до 1 л. Все перемешивают и проверяют рН.

Для определения  н е о м и ц и н а берут:

споры культуры Вас. mycoides, штамм 537;

среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содер-

жащий 33 мг % аминного азота (рН

фосфатный буфер (рН

Для определения  э р и т р о м и ц и н а необходимы:

споры культуры Вас. mycoides, штамм НВ;

среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содер-

жащий 33 мг % аминного азота (рН

фосфатный буфер (рН

Т е х н и к а

 Стерильные чашки Пет-

ри диаметром

 мм с ровным плоским дном ставят на стол,

отрегулированный по уровню. В расплавленную и затем охлаж-

денную до

 среду вносят взвесь спор той культуры, на

какой антибиотик исследуют мед, из расчета

 млн. микроб-

ных тел на 1 мл среды. Среду со взвесью спор разливают по 10 мл

в каждую чашку. После застывания засеянного агара вырезают

на его поверхности на расстоянии около 28 мм от центра чашки

6 луночек тонкослойной стерильной трубкой с внешним диамет-

ром 10 мм. Затем от исследуемой пробы в 3 пробирки берут по

1 г меда. В зависимости от того, какой антибиотик определяют,

испытуемую пробу разводят соответствующим буфером в соотно-

шении 1:5 и прогревают на водяной

 при

 в течение

313