РУКОВОДСТВО по оказанию фитосанитарных диагностических услуг (ФАО, Версия 1.1)

122

7.2.4 Другие методы фиксации

изображений и обмена ими при

прямой передаче

Системы создания изображений на

основе веб-приложений, такие как си-

стемы, описанные выше, – относительно

дорогостоящие, и несмотря на то, что

они создают изображения наилучшего

качества и предоставляют пакет допол-

нительных возможностей для работы с

ними, существуют более простые и де-

шевые способы обмена изображениями

при прямой передаче. При условии, что

изображения прямой передачи (поток

видеоданных) можно зафиксировать на

ПК, любая программа, позволяющая осу-

ществлять совместный доступ к рабоче-

му столу, может использоваться для об-

мена изображениями через интернет с

другими ПК, расположенными в разных

местах. К этим программам относятся

Windows Remote Desktop, Skype, Ustream,

Google Hangouts, Web-conferencing

другие программы, которые доступны

бесплатно. Один из недостатков этого

метода заключается в том, что качество

изображений может быть снижено до

такой степени, что ключевые для иден-

тификации детали теряются. Это проис-

ходит по той причине, что такие типы

программ применяют свои собственные

условия обработки изображений, кото-

рые могут значительно снизить каче-

ство. И наоборот, системы, позволяющие

осуществлять прямой доступ к изобра-

жению образца, теряют незначительно

или почти не теряют качества.

Во многих случаях потеря качества

может и не стать слишком большой по-

мехой для идентификации. Все это за-

висит от природы образца и уровня

необходимой детализации. При ограни-

ченных ресурсах этот подход может счи-

таться одним из вариантов. Недорогое

оборудование для фиксации изображе-

ния, такое как USB-микроскопы, может,

без сомнения, использоваться в этой си-

туации (рис. 29).

Однако заметьте, что организации

могут ввести ограничения, связанные с
обеспечением безопасности, на исполь-
зование механизмов коллективного
пользования на основе веб-приложений,
аналогичных описанным выше.

7.3 Процессы дистанционной

диагностики для образования и
обучения

Возможность делиться изображени-

ями с микроскопа при прямой передаче
данных с интернет-пользователями, на-
ходящимися во множестве разных мест,
представляет собой идеальную возмож-
ность для дистанционного обучения
людей. Обмениваясь изображениями с
микроскопа через интернет, специали-
сты по диагностике и систематике могут
продемонстрировать, как идентифици-
ровать виды вредных организмов или
различать симптомы или свойства, ха-
рактерные для определенного вредно-
го организма. Дополнительные устрой-
ства связи могут использоваться для
создания среды видео-конференции, в
которой могут проходить обсуждения,
использоваться электронные доски,
проходить общение, документирование,
а также создание фото-, видеоизображе-
ний и аудиозаписей. Это создает долго-
временную запись процесса обучения,
которой участник может воспользовать-
ся в будущем в справочных целях. Ре-
зультат – это интерактивное обучение,
являющееся недорогим и эффективным,
в ходе которого участники совершен-
ствуют свои навыки, получая доступ к
общению со специалистом, не выходя за
пределы своего комфортного офиса.

7.3.1 Дистанционная диагностика в

полевых условиях

Во многих случаях вредные орга-

низмы или проблемы, вызываемые ими,
можно идентифицировать по изобра-
жениям. Создание карманных компью-

7. Дистанционная диагностика вредных для растений организмов

123

Рисунок 29. Слева:

В пункте досмотра на границе с USB-микроскопа на ПК передаются изображения, которые могут просматривать удаленные специ-

алисты посредством инструментов взаимодействия через интернет, таких как Skype.

Центр:

USB-микроскоп с 20–200-кратным увеличением.

Справа:

Пограничный инспектор изучает вредные организмы и создает изображения, используя USB-микроскоп

теров, USB-микроскопов, телефонов с
камерами, беспроводного интернета и
широкомасштабных мобильных сетей в
настоящее время делает возможным соз-
давать изображения с большим увеличе-
нием, высоким разрешением практиче-
ски в любом месте и делиться ими через
интернет или телефонные сети. Эти тех-
нологии позволяют упростить процесс
фитосанитарной диагностики таким об-
разом, чтобы изображениями вредного
организма или симптомов можно было
обмениваться со специалистами прямо
с поля, используя мобильные устрой-
ства. Идентификация до уровня вида не
всегда требуется для того, чтобы принять
решение по контролю вредных организ-
мов. Наоборот, своевременное приня-
тие стратегий борьбы с вредными орга-
низмами может быть более важным, чем
промедление из-за идентификации ори-
гинального образца. Не все виды диагно-
стики можно проводить таким способом,
но значительная часть фитосанитарных
проблем могла бы решаться быстро и
эффективно, если бы сотрудники, рабо-
тающие в поле, могли бы обмениваться

информацией и общаться со специали-
стами, используя мобильные устройства.

7.3.1.1 Оборудование для мобильных

устройств

В настоящее время существует ряд

макросъемочных линз и беспроводных
микроскопов для мобильных устройств,
обеспечивающих увеличение от 4-х до
200-кратного для использования в по-
левых условиях (смотрите, например,
http://www.photojojo.com и http://www.
chinavasion.com). Эти устройства – не-
дорогие и могут применяться широкой
группой пользователей в полевых усло-
виях, при этом можно получать высоко-
качественные изображения вредных
организмов и делиться ими с сообще-
ствами людей, которые могут давать кол-
лективные комментарии или предлагать
идентификацию. Эти устройства наряду
с привлечением через интернет боль-
ших групп людей и социальными сетями
могут значительно расширить возмож-
ности отдельных лиц и групп по иденти-
фикации вредных организмов способом,

124

являющимся быстрым и эффективным
(рис. 30). На уровне полевого исследова-
ния это означает, что решения по защите
растений от вредных организмов могут
быть приняты быстрее, а в случаях, когда
в процессе участвуют большие сетевые
коллективы, широко распространяет-
ся информация о вредных организмах.
Кроме того, этот коллективный подход
к решению проблем означает, что более
опытные члены сетевой группы делят-
ся своими знаниями с менее опытными
членами, тем самым повышая уровень
навыков у всех участников группы.

7.3.2 Виртуальные сети для

дистанционной диагностики

Привлечение через интернет боль-

ших групп людей стало мощным явлени-
ем обмена знаниями и их формирования
в цифровом пространстве. Многочислен-
ные сайты, предназначеные для объеди-
нения людей разными способами, могут
предоставить пользователям широкий
выбор возможностей участия в группо-
вой деятельности. Социальные сети и

совместное пользование сайтами может
обеспечить людей средствам глобально-
го обмена информацией со знакомыми и
незнакомыми людьми или возможностью
связываться с определенными людьми
или частными группами.

Sermo – это онлайн сообщество вра-

чей с более чем 200 тыс. членов, кото-
рые могут обмениваться клинической
информацией для оказания содействия
в постановке диагнозов и формирова-
ния комплекса медицинских знаний. По-
добные социальные сети могли бы ис-
пользоваться для обмена информацией
о вредных организмах с целью иденти-
фикации вредных организмов и предо-
ставления рекомендаций по стратегиям
борьбы с ними (рис. 31). Существующие
сайты и программные продукты могут
обеспечить основу для таких сетей, в
которых фермеры, консультанты, агро-
номы, работающие дистанционно, и
специалисты могут обмениваться диа-
гностической информацией и прини-
мать коллективные решения по борьбе
с вредными организмами. Виртуальные

Рисунок 30. В центре:

Разнообразные простые аксессуары позволяют мобильным телефонам создавать изображения вредных организмов с большим

увеличением. Эти изображения могут быть представлены сообществам через облачные сети для обсуждения. Эти сообщества могут включать в

себя местные или региональные НОКЗР. Изображения, размещенные по краям, были получены при помощи беспроводного микроскопа компании

«Hot Electronics» и мобильного телефона.

Слева

расположены фотографии бурой пятнистости папайи.

Справа

показан целый ряд снимков с разным

увеличением, полученных при помощи беспроводного микроскопа

7. Дистанционная диагностика вредных для растений организмов

125

Рисунок 31.

Предлагаемая сеть производителей, консультантов, информаторов из службы распространения

сельскохозяйственных знаний и специалистов

сети могут быть локальными, начиная с
существующих профессиональных свя-
зей и расширяясь до районных, нацио-
нальных и даже международных сетей
и опираясь на увеличивающийся общий
фонд знаний и навыков.

7.3.2.1 Программное обеспечение для

мобильных устройств

Стремительный рост количества мо-

бильных телефонов, которыми владеют
граждане, и более широкий сервисный
охват проложили дорогу к массовой
коммуникации и обмену информацией.
Эффективность мобильных телефонов,
используемых при дистанционной диа-
гностике, может быть улучшена посред-
ством использования программного
приложения, которое не только упро-
щает процесс коммуникации, но и запо-
минает и хранит данные. Электронная
почта используется для обмена инфор-
мацией о вредных организмах, однако
простой обмен изображениями через
службы электронной почты ограничива-
ет взаимодействие рамками выбранной

группы и не позволяет запоминать, хра-
нить и делиться информацией с более
широкой группой. Более того, поскольку
взаимодействие через электронную поч-
ту рассредоточено и лишено прямого
контакта, с трудом можно обобщить дан-
ные для дальнейшего использования в
справочных целях. Поэтому желательно
использовать сайты или программное
обеспечение, которые обеспечивают
обмен информацией о вредных орга-
низмах и ее хранение в сетевой среде
(рис. 32). Информация о случаях обна-
ружения вредных организмов, которая
хранится и обобщается, может предоста-
вить ценные сведения о пространствен-
ных и временных аспектах обнаружений,
а также о распространении вредных ор-
ганизмов. Затем эту информацию можно
использовать при принятии решений о
борьбе с вредными организмами, для
сигнализации о вредных организмах, за-
явлений о свободе зоны, формирования
стратегий по научным исследованиям и
разработкам (НИР), а также для составле-
ния перечней вредных организмов.

Производители

Консультанты

Информаторы

126

Несмотря на наличие многочислен-

ных мобильных приложений для обеспе-
чения участия в социальных сетях, су-
ществует мало таких сайтов, созданных
специально для биологов, и способных
сохранять и систематизировать данные.
Программное обеспечение, как правило,
ориентировано на социальные сети или
на управление информацией, а не на то
и другое одновременно. Следователь-
но, необходимо было бы использовать
несколько приложений, чтобы обеспе-
чить групповой обмен и хранение дан-
ных. Однако программное обеспечение
«Pestpoint» (http://www.Pestpoint.org.
au) позволяет пользователям создавать
частные виртуальные сети для обмена
информацией, а также оно сохраняет и
хранит информацию о вредных организ-
мах. Это приложение работает как на се-
тевых, так и на мобильных платформах.

7.4 Выводы

Не все вредные организмы можно

идентифицировать дистанционно. Не-

которые случаи просто слишком слож-

ны, чтобы их можно было определить
дистанционно, и они потребуют иссле-
дования образца. Безусловно, иденти-
фикацию насекомых по изображениям
будет легче провести, чем идентифика-
цию болезней растений. Тем не менее,
нам, по меньшей мере, следует попы-
таться решать каждую проблему, свя-
занную с вредными организмами, этим
способом, если это означает, что борь-
бу с некоторыми из них можно осуще-
ствить быстрее. Создание системы дис-
танционной диагностики, включающей
в себя сети и сохранение данных, дает
всей системе здоровья растений множе-
ственные выгоды в части, касающейся
формирования знаний посредством за-
писи и хранения информации о вредных
организмах в пространстве и времени,
повышая функциональные возможности
по мере того, как менее опытные люди
через сети учатся посредством взаимо-
действия с более опытными людьми, и
формируется лучшее понимание вред-
ных организмов благодаря наблюдению
за их распространением и случаями их
обнаружений.

Рисунок 32.

Дистанционная диагностика в поле, при которой фото- или видеоизображения вредных организмов записываются на мобильном устройстве

и через интернет предоставляются группе людей, которые, вероятно, смогут предложить идентификацию, рекомендацию по борьбе или и то, и другое

7. Дистанционная диагностика вредных для растений организмов

Удаленный

пользователь

4G/беспроводная/

спутниковая

Фиксация

изображения

Борьба с

вредными

организмам

Запрос о

вредном

организме

Рекомендация

Приложения

для телефона

Текст / изображение

/ видео / аудио

Облачные

сети

127

8. Референтные коллекции

Введение

Референтная коллекция, используе-

мая в фитосанитарных целях, может со-
стоять из следующих типов образцов:

грибов;

членистоногих;

брюхоногих;

нематод;

инвазивных растений;

паразитических растений;

частей растений, пораженных патоге-
нами и вредными организмами.
Референтная коллекция необходима

для реализации фитосанитарных целей,
так как она:

является основой для принятия ре-
шений, связанных с вопросами ка-
рантина и ответными мерами;

позволяет проверять информацию о
патогенах и вредителях из какой-ли-
бо страны для разрешения торговых
споров;

позволяет повторно изучить информа-
цию о патогенах и вредителях, так как
методы диагностики постоянно совер-
шенствуются, а таксономия организ-
мов меняется; в процессе таксономи-
ческого пересмотра положение одного
организма может быть пересмотрено и
разделено на несколько различных ви-
дов или объединено с другим видом.

Хорошая референтная коллекция

должна:

состоять из хорошо сохраненных об-
разов с четкими диагностическими
характеристиками, пригодными для
проведения анализа (например, мо-
лекулярного анализа) в будущем;

храниться в условиях, обеспечива-
ющих предотвращение заражения
вредными организмами и поврежде-
ния от влаги;

иметь этикетки, на которых дана ин-

формация о коллекции;

должна сопровождаться базой дан-

ных, позволяющей быстро проводить

поиск информации.

8.1 Общие требования

8.1.1 Здание

Конструктивные требования к зда-

нию для содержания референтной кол-

лекции:

наличие специально отведенного по-

мещения с минимальной вибрацией:

могут быть рассмотрены сейсмостой-

кие здания, расположенные вдали от

оживленных улиц и недоступные для

посетителей без сопровождения;

в помещении должно быть достаточно

места для хранения референтных об-

разцов и рабочая зона для куратора;

цельный пол и стены без щелей в ме-

стах соединений во избежание зара-

жения вредными организмами;

большие рабочие столы для обработ-

ки образцов, исследований под ми-

кроскопом и поддержания культур;

система хранения в виде коробок,

ящиков, шкафов, боксов или стенных

шкафов (обратите внимание: некото-

рые передвижные системы хранения

документов являются более дороги-

ми, но могут сэкономить много места);

удобно расположенные телефон и

точки доступа к сети;

отсутствие водопроводного крана в

месте хранения коллекции во избе-

жание повреждения от влаги.

Работа с живыми образцами не долж-

на проводиться в том же помещении, что

и работа со референтными коллекциями

для минимизации отрицательного воз-

действия на коллекцию и во избежание

заражения такими вредителями, как кле-

щи, книгоеды и жуки.

128

8.1.2 Контролируемые условия

окружающей среды

Референтные образцы легко повреж-

даются и уязвимы к вредителям, плесени
и грибам. Следующие пункты помогут
предотвратить повреждение коллекции:

Кондиционеры и влагопоглотители
имеют важное значение в регионах с
теплым и влажным климатом. Затра-
ты на эксплуатацию этих устройств
могут быть значительными; таким об-
разом, рекомендуется включать эти
затраты в финансовый план.

Рекомендуется поддерживать тем-
пературу на уровне 18-19°С и отно-
сительную влажность воздуха ниже
50% для предотвращения поврежде-
ния от влаги, роста грибов и размно-
жения книгоедов и жуков, которые
могут повредить образцы.

В темноте образцы хранятся дольше.
В помещении не должно быть ника-
ких окон или световых люков; когда
помещение не используется, свет
должен быть выключен.

Для борьбы с вредными организма-
ми рекомендуется использовать гер-
метичные контейнеры для образцов,
средства отпугивания вредных орга-
низмов (например, камфорные бру-
ски, липкие нафталиновые ловушки,
запутывающие ловушки-барьеры),
при необходимости проводить фуми-
гацию или применять инсектициды,
герметизировать щели в местах со-
единения деталей; замораживать все
поступающие или возвращающиеся
сухие гербарные образцы при -20°С в
течение 48 часов и на регулярной ос-
нове (каждые 1-2 года).

Референтная коллекция должна быть
отделена от рабочей зоны, которая
используется для работы с живым
растительным материалом.

8.1.3 Меры защиты и обеспечения

безопасности

Референтные коллекции содержат

ценные ресурсы, которые являются важ-
ными для принятия решений, связанных
с вопросами карантина и ответными ме-
рами, и могут содействовать развитию
торговли. Поэтому коллекции должны
храниться на приемлемом уровне безо-
пасности. Более того, для защиты персо-
нала, работающего в коллекциях, долж-
ны быть приняты меры безопасности.

К некоторым требуемым мерам защи-

ты и обеспечения безопасности относят-
ся следующие:

специальное помещение, отделяю-
щее коллекции от офисных помеще-
ний и других зон;

запираемое помещение или помеще-
ние в запираемом здании, доступ в
которое ограничен;

система сигнализации для защиты в
нерабочие часы;

телефон для экстренных вызовов;

пожарная безопасность:

противопожарное одеяло, огнету-
шитель, инертный газ;

не пользуйтесь источником от-
крытого огня;

не оставляйте электроприборы,
особенно обогреватели, без при-
смотра;

поддерживайте электрическую
проводку в исправном состоянии;

принятие во внимание стихийных
бедствий, например, землетрясений,
цунами, наводнений, ураганов и лес-
ных пожаров;

не употреблять пищу в помещении
хранения референтной коллекции;

не принимать посетителей без сопро-
вождения;

носить обувь с закрытыми носками;

не носить длинные волосы распу-
щенными;

доступ должен иметь только обучен-
ный персонал;

8. Референтные коллекции

129

работа с химическими веществами и

оборудованием должна проводиться

квалифицированным персоналом.

Некоторые химические вещества

и реактивы, используемые при подго-

товке референтных образцов, – ядови-

ты. Должны быть рассмотрены следу-

ющие меры.

Инструкции по безопасному обраще-

нию с материалами (ИБОМ) и любая

товаросопроводительная литература

должны быть изучены для того, чтобы

иметь четкое представление об опас-

ности, связанной с химическими ве-

ществами, реактивами или содержи-

мым наборов (например, требования

к хранению и обращению). Бумажные

копии ИБОМ для каждого химическо-

го вещества, хранящегося в лаборато-

рии, должны быть легкодоступны.

Количество опасных веществ в лабо-

ратории должно быть сведено к ми-

нимуму в соответствии с потребностя-

ми и сроком годности. При хранении

этих веществ на видном месте должны

быть размещены соответствующие

информационные указатели.

Персонал должен удостовериться в

безопасности рабочей зоны путем

проверки наличия огнетушителей,

аптечки первой помощи и любого

другого оборудования для обеспече-

ния безопасности, которое может по-

надобиться.

Соответствующие средства индиви-

дуальной защиты и оборудование

должны использоваться в соответ-

ствии с рекомендациями в ИБОМ,

например, лабораторный халат, пер-

чатки, защитные очки, предохрани-

тельные очки, лицевые щитки, маски.

Законодательные требования страны

по работе с химическими веществами

и реактивами должны быть изучены.

Химические вещества и реактивы

следует утилизировать надлежащим

образом; проконсультируйтесь с

местными властями.

8.1.4 Требования по изоляции

Некоторые страны требуют хранить

в помещении для изоляции гербарные
образцы выявленного материала, пред-
ставляющего высокую степень биоло-
гической опасности. Проконсультируй-
тесь с местными властями для уточнения
того, какая степень изоляции требуется.

Растительный материал, заражен-

ный экзотическими вредителями или
болезнями и какие-либо засоренные
расходные материалы (например, ве-
тошь, полиэтиленовые пакеты, перчат-
ки) должны утилизироваться надлежа-
щим образом. Проконсультируйтесь с
местными властями.

8.1.5 Система хранения

Образцы должны храниться в алфа-

витном порядке по названию патогена
или растения-хозяина или по инвентар-
ному номеру.

Для обеспечения эффективного вво-

да новых данных и информации, а так-
же для извлечения данных с возможно-
стью поиска и фильтрации результатов
должна быть создана база данных. База
данных может быть как в виде простой
электронной таблицы в формате Excel,
так и в виде программы, специально раз-
работанной для гербариев. Не рекомен-
дуется ограничиваться только ведением
регистрационного журнала, так как жур-
нал сложно обновлять, и поиск данных в
нем проводить непросто.

8.1.6 Повседневный уход

Важно иметь специально назначен-

ный персонал, занимающийся уходом за
референтными коллекциями и осущест-
вляющий контроль за их содержанием.

Уход за референтной коллекцией

должен проводиться на повседневной
основе путем:

130

регулярного контроля температуры,
влажности, емкостей влагопоглотите-
лей, безопасности и пожарной сигна-
лизации, мер по борьбе с вредными
организмами, которые могут приме-
няться;

постоянной проверки того, что об-
разцы длительного хранения не вы-
сыхают, а этикетки не выцветают;

обновления базы данных с учетом из-
менений названий и внесения новой
информации.

Если запечатанный контейнер c вы-

сушенным гербарным образцом был от-
крыт, необходимо повторить процесс
сушки перед запечатыванием контейне-
ра и возвращением образца в коллекцию.

Если сохраненные зараженные рас-

тительные ткани были отданы или об-
менены, необходимо заново ввести
инокулят в травянистые или древесные
растения (во всех возможных случаях)
и сохранить определенную часть новой
зараженной растительной ткани для по-
полнения запасов.

Некоторые патогены с течением

времени могут потерять свои инфици-
рующие свойства; может возникнуть
необходимость проведения анализа
инокулированных травянистых или дре-
весных растений серологическими или
молекулярными методами для провер-
ки успешности переноса заражения (на-
пример, в случае скрытого переноса).

8.1.7 Улучшение

Ценность референтных коллекций

может быть повышена путем:

обмена образцами с другими рефе-
рентными коллекциями для получе-
ния референтных образцов;

приглашения экспертов для повтор-
ного изучения образцов;

получения ДНК-штрихкодов из об-
разцов;

хранения выделенных нуклеиновых
кислот в условиях глубокой замороз-
ки (рекомендуется при -80°C);

создания виртуальной референтной
коллекции.

Примечание:

цифровые данные о кол-

лекции, данные о последовательностях
ДНК и изображения образцов в системе
управления данными обеспечивают эф-
фективный поиск информации, анализ и
отчетность, что, в свою очередь, может
способствовать оперативному приня-
тию решений по обеспечению биологи-
ческой безопасности.

8.2 Энтомологическая референтная

коллекция

8.2.1 Референтные образцы

(контрольные и физические)

Энтомологические референтные кол-

лекции включают в себя всех наземных
беспозвоночных, а также нематод, чер-
вей, улиток и слизней.

8.2.1.1 Критерии выбора образцов для

сохранения (что сохранять)

Ограниченность пространства – ос-

новной ограничивающий фактор, опре-
деляющий, какое количество образцов
возможно хранить; не все образцы могут
быть сохранены для включения в кол-
лекцию. В качестве руководства – рас-
считывайте место для хранения при-
мерно десяти образцов одного вида,
хотя это количество может изменяться
в зависимости от размера образца и его
значимости. Критерии сохранения энто-
мологического образца:

местная фауна, аборигенные или энде-
мичные виды, распространенные вред-
ные организмы, поражающие местные
сельскохозяйственные культуры, выяв-
ленные вредные организмы и недавно
акклиматизировавшиеся виды;

образцы самцов и самок каждого
вида, если это возможно;

8. Референтные коллекции

131

распространение: образцы каждого
вида из разных стран;

местонахождение: образцы каждого
вида из разных местностей или рай-
онов в пределах страны происхож-
дения;

вариации: внутривидовые вариации
по цвету, рисунку, отличительным
признакам, размеру и т.д.

новый вид для коллекции;

образец находится в лучшем состоя-
нии, чем образцы, которые уже вклю-
чены в коллекцию;

собран с нового хозяина (новый хо-
зяин – это хозяин, из которого или на
котором было выращено насекомое,
а не просто тот, на котором оно нахо-
дилось);

сохраняется для проведения обсле-
дований.

8.2.2 Оборудование и расходные

материалы

8.2.2.1 Оборудование для обработки

образца

микроскоп;

сушильная камера;

нагревательная плитка или микро-
волновая печь;

сушильная камера для ярлыков;

морозильная камера;

холодильник;

увеличительное стекло или увеличи-
тельная лампа.

8.2.2.2 Расходные материалы и другие

предметы

пинцеты, тонкие и ультратонкие, из
нержавеющей стали;

булавки для закрепления насекомых
(только из нержавеющей стали) от
поставщика энтомологического обо-
рудования (размеры 0, 3, 5);

минуции для двойного закрепления;

блок для накалывания (рис. 33);

изогнутые минуции и минуции для
подъема клещей и мелких насекомых
(рис. 33);

покровные стекла (круглое, диаме-
тром16 мм; круглое, 13 мм);

предметные стекла для микроскопа
(25 мм × 75 мм × 1 мм);

плашки для накалывания насекомых
(рис. 33);

расправилки (различных размеров);

доски из пенополиуретана с закрыты-
ми порами;

пробирки для гениталий (микропро-
бирки);

этикеточная бумага, ручки или каран-
даши (для нанесения надписей, не-
смываемых этиловым спиртом);

этикетки для образцов;

клей для закрепления насекомых
(кардный);

ножницы;

пробирки из натриевого стекла раз-
личных размеров (Рис. 33):

например, 50 × 12 мм,

75 × 25 мм;

Рисунок 33.

Малое оборудование для

стандартного закрепления насекомых

132

планшеты для окрашивания (часовые
стекла) со стеклянными крышками
(рис. 33).

8.2.2.3 Химические вещества и растворы

Список лабораторных химических ве-

ществ, необходимых для приготовления
питательных сред и подготовки образцов:

канадский бальзам (так как он раз-
бавляется ксиленом, эупарал может
быть предпочтительнее);

камфора;

хлоральгидрат;

гвоздичное масло;

дистиллированная вода

энтомологический кардный клей;

этиловый спирт (96%-ный) также раз-
бавляется до 70% (

примечание:

так

как чистый этиловый спирт часто
трудно получить, некоторые держа-
тели коллекций используют изопро-
панол (изопропиловый спирт));

этилацетат;

эупарал;

фуксинсернистая кислота в порошке;

безводная уксусная кислота;

глицерол, глицерин;

аравийская камедь;

препарат «Histoclear» (оранжевое ве-
щество для разжижения эупарала);

бытовой отбеливатель (5%-ный рас-
твор гипохлорита натрия);

хлористоводородная кислота (10%-
ная);

молочная кислота (85%-ная);

фенол;

KOH (10%-ный).

Некоторые химические вещества,

используемые при подготовке насеко-
мых для идентификации – чрезвычайно
токсичны или легко воспламеняются.
Необходимо соблюдать максимальную
осторожность при их использовании –
использовать, предпочтительно, в вы-

тяжном шкафу, в месте с нижней тягой
или, как минимум, в очень хорошо про-
ветриваемом помещении. Важно также
носить средства индивидуальной защи-
ты, такие как перчатки и лабораторный
халат. Некоторые химические вещества,
согласно технике безопасности, не долж-
ны храниться вместе, и по технике без-
опасности требуется наличие специаль-
ных боксов (см. табл. 2).

8.2.2.4 Питательные среды

В этом разделе приводится список

сред и рецепты их приготовления для
разных отрядов насекомых.

Раствор Эссига/Уилки

85%-ная молочная кислота – 100 мл;

Фенол

(насыщенный водный рас-

твор) – 10 мл;

Безводная уксусная кислота – 20 мл;

Дистиллированная вода – 5 мл.

Среда Хойера для закрепления образцов

Дистиллированная вода –50 мл;

Хлоральгидрат – 200 г;

Аравийская камедь (бесцветные кри-
сталлы) – 30 г;

Глицерин – 20 г.

Растворите аравийскую камедь в дис-

тиллированной воде при комнатной тем-
пературе.

Добавьте хлоральгидрат и оставьте

на день или два, пока оба вещества не
растворятся.

Добавьте глицерин и пропустите через

стеклянную вату, чтобы отфильтровать.

Красящий раствор

Фуксинсернистая кислота – 0,5 г 10%;

Хлористоводородная кислота – 25 мл;

Дистиллированная вода – 300 мл.

Предостережение: Летучие вещества, выделяемые фенолом, являются канцерогенными, поэтому работа с ним должна прово-

диться в вытяжном шкафу.

8. Референтные коллекции

133

8.2.3 Обработка образцов

для сохранения

В этом разделе приводится описание

лучших методов хранения для каждого
типа организма (например, этиловый
спирт, подготовка микропрепарата су-
хим методом или сочетанием методов).
Для получения более подробной ин-
формации о сохранении насекомых
смотрите ОСНПИ. Простые методы со-
хранения насекомых и родственных
видов. Объединение Содружества по
научным и прикладным исследованиям.
Документ доступен по ссылке: http://

www.ento.csiro.au/education/preserving.
html (последний доступ осуществлен
17 сентября 2015 года).

8.2.3.1 Умерщвление

После отлова и расположения образ-

ца он может быть умерщвлен следующи-
ми методами.

Мягкотелые и незрелые особи,

ко-

торые теряют цвет, должны быть умерщ-
влены в только что вскипевшей воде и
оставлены на 1-5 минут перед тем, как
поместить их в 70-80%-ный этиловый

Таблица 2.

Химические вещества и их категории опасности

Химическое вещество

Категория опасности

Канадский бальзам

Огнеопасен, вызывает сильное раздражение глаз,

кожи, токсичен для водной флоры и фауны

Хлоральгидрат

Вызывает раздражение глаз и кожи

Гвоздичное масло

Токсично, вызывает раздражение кожи

Этилацетат

Легко воспламеняется, вызывает серьезное раздражение глаз,

повреждение органов через контакт с кожей

Эупарал

Вызывает раздражение кожи, может вызвать симптомы аллергии

или астмы и затруднение дыхания, может вызвать аллергическую

реакцию кожи, может вызвать раздражение дыхательных путей,

вызывает серьезное повреждение глаз

Фуксинсернистая кислота

в порошке

Категория опасности: оценивается как раздражитель кожи и глаз.

Не вдыхать и не глотать

Безводная уксусная кислота

Воспламеняющаяся жидкость, токсична, имеет общую токсич-

ность, вызывает коррозию металла, повреждение кожи, глаз, на-

носит вред водной флоре и фауне, позвоночным

Глицерол

Может вызвать раздражение кожи, глаз и раздражение дыхатель-

ных путей. Может повлиять на почки

Аравийская камедь

Респираторный и контактный аллерген

Бытовой отбеливатель (5%-ный

раствор гипохлорита натрия)

Смотрите инструкцию производителя

Хлористоводородная кислота

Смертельно опасна при проглатывании, вызывает коррозию

металлов, тяжелые ожоги кожи и глаз, экзотоксична для водной

флоры и фауны и позвоночных

Фенол

Высокотоксичен, вызывает коррозию металлов, тяжелые ожоги

кожи и глаз, экзотоксичен для водной флоры и фауны, и позво-

ночных

Молочная кислота

Токсична, вызывает повреждения глаз и кожи, экотоксична для

позвоночных

Гидроксид калия (KOH)

Высокотоксичен, вызывает коррозию металлов, повреждение

кожи, глаз, наносит вред водной флоре и фауне, позвоночным

134

спирт. Это помогает предотвратить их
потемнение; личинок жесткокрылых,
чешуекрылых и перепончатокрылых
закрепляют таким образом. Умерщвле-
ние более крупных насекомых занимает
больше времени, и может понадобиться
несколько раз сменить кипящую воду.

Склеротизированные

(с жестким

тельцем) насекомые могут быть умерщ-
влены непосредственно в 70-90% эти-
ловом спирте. Чешуйчатые насекомые,
такие как чешуекрылые

(Lepidoptera)

волосистокрылые

(Trichoptera)

и на-

стоящие комары

(Culicidae)

не должны

умерщвляться с использованием жидких
агентов, необходимо использовать замо-
раживание или сухие морилки.

Паразитических перепончатокры-

лых

лучше всего умерщвлять и сохранять

в 96%-ном этиловом спирте. Такая высо-
кая концентрация не допускает закру-
чивания и складывания перепончатых
крыльев, матирования волосков, смор-
щивания мягких частей тела.

Большинство образцов

умерщвля-

ются посредством их помещения в моро-
зильную камеру на 30 минут; умерщвле-
ние более крупных насекомых занимает
больше времени. Этот метод использу-
ется для лишения активных насекомых
подвижности перед умерщвлением дру-
гими методами.

Маленькие насекомые

для фикса-

ции на предметном стекле умерщвля-
ются непосредственно в жидкостях для
очищения и красящих жидкостях.

Образцы насекомых

также умерщ-

вляют парами этилацетата (легковоспла-
меняющегося и раздражающего химиче-
ского вещества) в морилке.

Улиток и слизней

умерщвляют по-

гружением в воду с уменьшенным со-
держанием кислорода (кипяченную) в
морилке с плотно закрывающейся крыш-

кой, удаляют как можно больше воздуха
и оставляют на 24 часа. Используйте нар-
котизированную воду (пропитанную та-
баком) и не кипятите образец, так как это
вызывает его затвердевание.

Дождевых червей

(Annelida:

Oligo-

chaeta

) можно умертвить в 70%-ном эти-

ловом спирте.

8.2.3.2 Закрепление сухого образца

Следующие справочные материалы

могут быть полезны:

Уокер, А.К., Кросби, Т.К.

, 1988 г. «Под-

готовка препаратов насекомых и их кури-
рование», новое пересмотренное изда-
ние. Новая Зеландия – Информационная
серия УНПИ (Управление научных и про-
мышленных исследований) 163. Веллинг-
тон, Издательство научной информа-
ции УНПИ. С. 92 /

Walker, A.K. & Crosby,

T.K.

1988. The preparation and curation

of insects, new revised edn. New Zealand
DSIR Information Series 163. Wellington,
DSIR Science Information Publishing
Centre. 92 pp. Доступно по ссылке: http://
www.landcareresearch.co.nz/resources/
collections/nzac/specimen-preparation-
and-curation (последний доступ осущест-
влен 17 сентября 2015 года).

Шауф, М.Е.,

под. ред., 2001 г. «Сбор

и сохранение насекомых и клещей: ме-
тоды и инструменты». Вашингтон, округ
Колумбия, Лаборатория систематической
энтомологии /

Schauff, M.E.

, ed . 2001.

Collecting and preserving insects and mites:
techniques and tools. Washington, DC,
Systematic Entomology Laboratory. Доступ-
но по ссылке: http://www.ars.usda.gov/
News/docs.htm?docid= 10141 (последний
доступ осуществлен 17 сентября 2015 г.).

Хантер, Г.

2006 г. «Курирование об-

разцов насекомых». Серия «Conserve
O Gram». 11/8. Вашингтон, округ Ко-
лумбия, Управление национальных
парков /

Hunter, G.

2006. Curation of

8. Референтные коллекции

135

insect specimens. Conserve O Gram
No. 11/8. Washington, DC, National Park
Service. Доступно по ссылке: http://
www.nps. gov/museum/publications/
conserveogram/11-08. pdf (последний до-
ступ осуществлен 17 сентября 2015 г.).

8.2.3.3 Накалывание

Пчел, ос, мух, крылатых термитов,
молей и бабочек следует накалывать
через грудную клетку. Пчел, ос и мух
следует накалывать чуть правее от
центра, чтобы избежать повреждения
хрупких диагностических признаков.

Полужесткокрылых

(Hemiptera)

сле-

дует накалывать через щиток.

Кузнечиков

(Orthoptera)

следует нака-

лывать через переднеспинку.

Жуков

(Coleoptera)

следует накалывать

через правое надкрылье (рис. 34).

Булавки должны быть из нержавею-

щей стали, в противном случае они бу-
дут подвержены коррозии и разрушат
образец. Тела насекомых следует про-
калывать булавками соответствующего
размера. Булавки номер 3, пригодные
для прямого закрепления крупных на-
секомых, следует использовать каждый
раз, когда это возможно. Булавки номер
5 используются для очень больших на-
секомых и номер 0 – для узкотелых насе-
комых. Все образцы меньшего размера
следует накалывать на минуции (тонкие
булавки) (смотрите раздел 8.2.3.4 «Двой-
ное закрепление»).

Примечание:

Булавки номер 00 и 000

слишком пружинисты, и существует риск
повреждения образца при работе с ним.

8.2.3.4 Двойное закрепление

Маленькие насекомые, накалывае-

мые на минуции, требуют двойного за-
крепления на специальные 3-миллими-
тровые квадратики при помощи полосок
из пористого материала («Nu Poly») дли-
ной 10-12 мм или пластозотовых полосок
при помощи булавки номер 3 (рис. 35).

8.2.3.5 Накалывание на картон

Всех небольших (<5 мм) насекомых с

твердым телом следует приклеевать на
треугольный кусочек картона (рис. 36).

Жуки

(Coleoptera)

должны быть закре-

плены так, чтобы брюшная сторона тела
была видна.

Мухи, осы и другие насекомые, у ко-

торых крылья вытянуты над телом, долж-
ны быть закреплены на правом боку, же-
лательно с крыльями, расположенными
вертикально.

Образцы должны быть расположе-

ны головой на правой стороне картона.
Следует использовать только минималь-
ное количество клея.

Кусочки картона накалываются на бу-

лавку номер 3.

8.2.3.6 Картонные прямоугольники

Очень маленьких насекомых, особен-

но удлиненных мягкотелых жуков, мел-
ких перепончатокрылых

(Hymenoptera)

Рисунок 34.

Верхний и боковой вид наколотого жука

136

и жесткокрылых

(Coleoptera)

, можно

приклеить к прямоугольным карточкам

(рис. 37). Этот метод лучше всего исполь-
зовать, когда имеется более одного об-

разца из той же серии, так как каждый

образец может быть приклеен под дру-

гим углом, чтобы облегчить последую-

щую идентификацию.

Ложные коконы и коконы от выращи-

ваемых особей также можно закрепить

таким образом. Карточки накалываются

на булавку номер 3.

Примечание: Закрепление на картон-

ный прямоугольник не является предпо-

чтительным методом.

8.2.3.7 Расправление и расположение

Бабочек и молей следует расправ-

лять таким образом, чтобы был виден
цветовой рисунок (рис. 38). Задние края
передних крыльев укладываются под
прямым углом к телу. Задние крылья
должны быть сильно вытянуты вперед,
чтобы между передними и задними кры-
льями не было большого расстояния. На
задних крыльях не должно быть складок.
Крылья полностью покрываются нево-
щенной бумагой, легкой бумагой для
авиапочты или калькой.

В режиме онлайн доступно посо-

бие: Научное обучение. 2009 г. «Закре-
пление молей». / Science Learning. 2009.
Mounting moths. Документ доступен
по ссылке: http:// www.sciencelearn.org.
nz/Context s/Hidden- Taonga/Sci-Media/
Video/Mounting-moths (последний до-
ступ осуществлен 17 сентября 2015 г.).

8.2.3.8 Сохранение в этиловом спирте

Следующие мягкотелые наземные и

водные беспозвоночные после умерщ-
вления или фиксирования должны хра-
ниться в 70-75%-ном этиловом спирте:

личиночные формы большинства от-
рядов насекомых;

термиты

(Isoptera)

– все стадии;

Рисунок 35.

Вид сбоку дважды закрепленного насекомого

Рисунок 36.

Вид насекомого, закрепленного на картон, сверху и сбоку

Рисунок 37.

Насекомое на картонном треугольнике

8. Референтные коллекции

137

чешуйница

(Thysanura)

;

улитки и слизни (за исключением пу-
стых раковин улиток);

черви, сороконожки, многоножки,
бокоплавы.

Образцы для молекулярной работы

должны незамедлительно помещать-
ся в 96%-ный этиловый спирт, который
необходимо заменить через несколько
дней для высушивания образцов для
хранения.

8.2.3. Фиксация на предметном стекле

Насекомых нижеприведенных групп

следует закреплять на предметном сте-
кле. Методы подготовки фиксации на
предметном стекле различаются для
различных групп. Также смотрите ме-
тоды фиксации на предметном стекле,
описанные в работе

Дули Дж.

, 2002 г.

«Подготовка препаратов образцов».
Сан-Франциско, Калифорния. Защита
и карантин растений /

Dooley, J.

2002.

Specimen preparation. San Francisco,
CA, PPQ. Документ доступен по ссыл-
ке: http://keys.lucidcentral.org/keys/v3/
Dones_Lourdes/other files/slide prep
training.pdf (последний доступ осущест-
влен 17 сентября 2015 г.).

Клещи

(Acari)

(могут быть закреплены

напрямую в жидкости Хойера и ос-
ветлены на нагревательной плитке);

Нематоды;

Трипсы

(Thysanoptera)

;

Мучнистые червецы

(Pseudococcidae)

;

Щитовки

(Coccoidea)

;

Тли

(Aphidoidea)

;

Другие порядки, шкурки личинок,
если требуется;

Белокрылки

(Homoptera: Aleyrodidae)

;

Препарированные части насекомых:
для этого метода требуются специ-
альные микроинструменты (рис. 39).
Эти микроинструменты легко изго-
товить из микробулавок путем их на-
грева над пламенем и осторожного
сгибания в желаемую форму при по-
мощи очень тонкого пинцета, а затем
помещения на небольшую бамбуко-
вую палочку или деревянную зубо-
чистку и приклеивания к ним.

Примечание:

закрепление на пред-

метных стеклах – превосходный способ
сохранения и изучения небольших мяг-
котелых насекомых и гениталий.

Рисунок 38.

Вид сверху и сбоку моли с расправленными крыльями

РУКОВОДСТВО по оказанию фитосанитарных диагностических услуг (ФАО, Версия 1.1) - часть 9