Болезни и вредители пчел - часть 12

Рис. 25. Споры

А

 вид; Б — продольный срез споры ноземы (стрелкой указана по-

лярная трубка).

Заглоченные споры через 30 мин попадают в среднюю кишку,

где под действием пищеварительных соков выбрасывают по-

лярную трубку длиной

 мкм (по данным некоторых

авторов, до 400 мкм), из нее выходит двуядерная спороплазма,

амебула которой проникает в протоплазму или ядро клетки эпите-

лия средней кишки пчел, где проходит сложный цикл развития

(рис. 26). Полный цикл развития паразита заканчивается через

48—72 ч.

Культивирование возбудителя возможно только в культурах

клеток или тканей.

Данные о длительности сохранения спор во внешней среде

противоречивы. В трупах пчел в лабораторных условиях они

сохраняются от 4 мес до 6 лет, на почве перед ульем — от 44 дней

до 25 мес, на сотах — от 3 мес до 2 лет; в запечатанном меде —

462 дня; в центрифужном меде при комнатной температуре — от

30 дней до

 лет, в водопровод-

ной воде при 20 °С —

дней. При минусовых темпера-

турах споры сохраняются от

24 дней до 7 лет.

Споры погибают при нагре-

вании до

 °С в течение

 мин; в водяных парах —

при 55 °С через 40 мин, в текучем

паре

 °С—

 5 мин; в

4 %-ном формалине при 25 °С —

в течение часа; в 2 %-ном раст-

воре едкого натра при 37

 —

15 мин; 80 %-ной уксусной кис-

лоте (200 мл на улей) при

Рис. 26. Цикл развития ноземы.

 дней; в парах

88

хлоруксусной кислоты (1 мл/м  при

 °С

 2 ч; 10 %-ной

хлорной извести —

 ч. Ультрафиолетовые лучи в зависимо-

сти от интенсивности инактивируют сухие споры через

 ч,

споры в воде —

 ч.

Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е

 Болезнь может

возникать во всех зонах разведения пчел (медоносных и средне-

индийских) обычно весной и реже осенью. При содержании пчел

в теплицах первый пик нозематоза регистрируют в конце мар-

та — начале апреля, а второй — после их выставки — в мае.

Вспышки массового поражения пчел на пасеке повторяются

с интервалом

 лет или более.

Возникновению нозематоза способствуют: повышение и рез-

кие колебания температуры, беспокойство пчел в зимовнике,

позднее наступление весны, длительная дождливая или ветреная

холодная погода, высокая влажность в ульях, слабое развитие

семей, плохая обеспеченность их белковым кормом в период,

предшествующий зимовке, несвоевременное и в большом количе-

стве скармливание сахара осенью перед формированием семьи на

зимовку, недоброкачественные кормовые запасы (наличие пади

в кормах и пестицидов в субтоксических дозах), снижение рези-

стентности организма пчел (отравление, наличие других бо-

лезней) и т. д.

Породы пчел обладают различной устойчивостью к нозема-

тозу. Более устойчивы местные северные породы. Осенняя попу-

ляция пчел, идущая в зимовку, наиболее устойчива к заражению,

чем весенняя. Пчелы одной породы, линии, происходящие от

маток-сестер, обладают различной устойчивостью к паразиту;

отношение восприимчивых и устойчивых к заражению маток

равно 3:1. Фактор устойчивости наследуется трутнями. Возмож-

на селекция пчел, обладающих резистентностью к ноземе. Гибри-

ды первого поколения, полученные от скрещивания устойчивых

и восприимчивых к заражению пчел, более резистентны к зараже-

нию. Устойчивость снижается во

 поколениях пчел этих

помесных семей.

Заражение насекомых происходит при заглатывании спор

ноземы. N. apis поражает взрослых рабочих пчел, трутней и ма-

ток. Величина инвазирующей дозы зависит от сезона года,

породы пчел и возраста насекомых. Сравнительно большей устой-

чивостью обладают трутни, а затем матки.

Источником возбудителя болезни являются больные пчелы.

Из организма пчел ноземы выделяются с фекалиями. Внутри

семьи споры распространяются в основном рабочими пчелами,

которые собирают фекалии у анального отверстия матки, рабочих

пчел и трутней, очищают соты, кормят матку, трутней и обменива-

ются между собой кормом. В сильно инвазированной семье на

язычке рабочей пчелы находят

 споры,

первой паре ног —

 второй и третьей парах —

 на

 споры ноземы (Свобода, 1961). Спорами

ноземы контаминированы также все внутренние стенки улья; на

89

 27. Гистологический срез участка средней кишки пчелы, поражен-

 их находят до 2,6 млн., в 1 г меда до 10 млн. (Штехе 1961

1977); они содержатся и в перге (Вовк, 1972). Споры ноземы

 в воде, почве и на растительности (Борхерт, 1928,

Распространению возбудителя болезни на пасеке способ-

ствуют перелеты рабочих пчел, трутней, подсадка больных маток

перестановка сотов из одного улья в другой, объединение слабых

 размещение на пасеке семей неизвестного происхождения

различные членистоногие, проникающие в ульи. Большое значе-

ние в передаче возбудителя имеет плотность размещения семей

пчел на местности.

Экономический ущерб от нозематоза пчел большой Напри-

мер, в Северной Америке, по сообщению К. М. Дулла (1972)

убытки от заболевания достигали до 24 кг меда с семьи, в Южной

Австралии в отдельные годы погибали от этой болезни до 20—

25  пчел. Согласно данным В. И. Полтева (1948), продукция

меда при нозематозе снижается на 35—50 %, прирост семей — на

58—75 %; смертность возрастает в 2—3 раза. При поражении

 60  пчел семья не дает никакой продукции (Захаров,

 Обычно вначале поражаются клетки задней

части средней кишки, где отслаивается перитрофическая мембра-

на (рис. 27) (Жданов, 1967). Прежде всего повреждаются клетки

90

секреторные, затем регенерационного эпителия. Они увеличива-

ются в объеме, у них возрастает секреторная деятельность,

исчезают цитоплазматические гранулы фосфата кальция, снижа-

ется или подавляется синтез РНК, уменьшаются количество

мукополисахаридов и активность ферментов, ответственных за

энергетический и углеводный обмены.

В зависимости от состояния организма патологический про-

цесс из отдельных участков средней кишки постепенно распро-

страняется на весь отдел, перитрофическая мембрана становится

фрагментарной и исчезает, увеличивается десквамация эпителия

на отдельных участках вплоть до базальной мембраны. Послед-

няя утолщается, приобретает складчатость (Гробов и др., 1967;

Кавачев, Шабанов, 1972). Заполненные спорами оболочки клеток

выступают в просвет кишечника и разрываются, происходит

инфицирование здоровых участков эпителия, часть спор выбра-

сывается с фекалиями. Поражаются также клетки пилорической

части тонкой кишки и мальпигиевых сосудов в местах их впаде-

ния в кишечник. В результате изменений в средней кишке нару-

шаются процессы переваривания и всасывания питательных

веществ.

В течении болезни различают два периода. Первый характе-

ризуется увеличением активности каталазы в средней кишке

и тканях тела, количества общего белка и фракции А в гемолимфе

пчел. С усилением нозематозного процесса снижается активность

каталазы, протеиназы, амилазы, диастазы и фермента, створажи-

вающего казеин молока в средней кишке, уменьшается содержа-

ние общего белка за счет фракций А и Б гемолимфы, повышается

уровень остаточного азота и свободных аминокислот. В последу-

ющем отмечается падение уровня свободных аминокислот в гемо-

лимфе и средней кишке, снижение уровня липидов в гемолимфе.

Уменьшается общее количество жира в теле и стеролов в средней

кишке, увеличивается содержание бора и марганца в мышцах

пораженных пчел, возрастает содержание воды в организме при

снижении ее потребления на 33 % и кислорода на 22 % (Моф-

фетт, Лаусон, 1975). Количество гемоцитов в начале процесса не

изменяется, но затем резко падает, возрастает число более зре-

лых форм гемоцитов. Гипофаренгиальные железы, ответственные

за выработку личиночного корма и инвертирование сахара, у по-

раженных насекомых быстро атрофируются, межклеточные ка-

нальцы спадаются; резко снижается активность инвертазы и ами-

лазы, уровень био- и неоптеринов (ростовых факторов, выделяе-

мых с маточным молочком).

Отмечаются изменения в ректальных железах (Бэрманн,

1963), резко уменьшается размер жирового тела и содержание

азота в нем. Общая масса пораженных пчел вначале возрастает,

затем падает, масса средней кишки увеличивается пропорцио-

нально числу скапливающихся в ней спор ноземы. Атрофируются

мышцы. Сухая масса инфицированных пчел снижается.

У пораженных маток яичник подвергается различной степе-

91

ни дегенерации в зависимости от степени поражения средней

кишки. Больные матки, вероятно, снижают выделение маточного

феромона (Фургала, 1962). Поражение трутней, очевидно, также

сопровождается нарушением спермиогенеза и наступлением им-

потенции. Кроме изменения метаболизма, у пчел отмечается

токсикоз, наступающий в результате усиления бродильных про-

цессов и всасывания продуктов распада микрофлоры. Выделяет

ли нозема при своем развитии какие-либо токсины, неясно. Токси-

ческих субстанций в спорах паразита пока не установлено.

У больных рабочих пчел увеличивается количество бактериаль-

ных клеток в средней кишке в

 раз, возрастает разнообра-

зие видов микроорганизмов.

Разрушение перитрофической мембраны и десквамация эпи-

телия в средней кишке приводит к проникновению микрофлоры

в гемолимфу пчелы, развитию септицемии (Бухарев и др., 1971).

У отдельных пораженных нозематозом пчел бывают опухоле-

подобные образования и разрастание отдельных кольцевых

П р и з н а к и

 В первый период заболевания

пораженные насекомые в большом количестве поедают пергу.

Возрастает потребление сахарного сиропа, однако пчелы лучше

берут мед, содержащий пыльцу. Во второй период болезни расход

корма снижается до нормы. Установлено, что повышенное со-

держание белка в рационе в период развития болезни вызывает

переполнение кишечника и непроизвольную дефекацию у пчел

в улье, сокращает продолжительность жизни насекомых.

Больные пчелы начинают раньше выполнять работы, несвой-

ственные их возрасту. В активный период они находятся на

периферии гнезда, скапливаются у летка и в верхней части улья.

В свите матки и на расплоде преобладают здоровые особи. Зимой

и весной пораженные пчелы сосредотачиваются в месте наи-

высшей температуры клуба (над расплодом, если он имеется).

При зимовке пчелы беспокоятся, издают непрерывный шум,

вылетают из улья и погибают. Первый весенний облет недруж-

ный, пчелы нередко ползают около улья. Передняя стенка улья,

предлетковая доска, а также соты покрыты многочисленными

пятнами фекалий. Пчелы становятся вялыми, мало реагируют на

внешние раздражения. Летняя деятельность пораженных семей

снижается на

 (Риндерер, Катслин, 1977), медосбор

и опылительная активность насекомых сокращаются на

 %

(Франклин, 1953; Михайленко, 1975; Пехакер, 1980).

Пчелы плохо развиваются, площадь расплода сокращается

в

 раз, из яиц, отложенных маткой, погибает

 % (про-

тив 1 % в норме) до образования зрелых личинок. У больных

личинок сокращается число гемоцитов в гемолимфе, изменяется

количество микроэлементов в теле. Выращенные в семьях матки

неполноценны. Они медленно передвигаются по сотам, часто

падают на дно улья; их плохо принимают в новых семьях. Отмеча-

ется смена маток в семьях. Замена их происходит через

 нед

92

и не зависит от степени поражения их кишечника; молодые зара-

женные матки живут в среднем 25,3 дня (Ласкотова и др., 1980).

Продолжительность жизни больных рабочих пчел почти

вдвое меньше, чем здоровых. Пчелы чаще погибают внутри улья

в период зимовки, однако прямая зависимость величины подмора

от степени его поражения бывает не всегда. Весной и в первой

половине лета насекомые погибают в поле. Интенсивное ослабле-

ние семей пчел весной часто приводит к понижению температуры

в гнезде, снижению

 у личинок. При нозематозе

возможна гибель всех пчел отдельных семей и пасек, иногда

болезнь приобретает характер эпизоотии с гибелью семей ряда

других пасек на местности.

Различают две формы проявления нозематоза: типичную

и скрытую (латентную). Первая наблюдается относительно ред-

ко, обычно в зонах с умеренным и холодным климатом, летом

переходит в скрытую форму. Вторая регистрируется довольно

часто, отмечается во всех зонах земногв шара, но особенно в зо-

нах субтропиков и тропиков.

Нозематоз очень часто протекает совместно с другими

болезнями, он способствует развитию вируса хронического пара-

лича у пчел. Нитевидный вирус, у-вирус и вирус черных маточни-

ков установлены только у пчел, пораженных ноземой. Вирус

мешотчатого расплода и х-вирус не проявляют такой зависимо-

сти. Нозематоз ускоряет заражение и гибель пчел при скармлива-

нии им возбудителей бактериальной природы (Hafnia alvei, Вас.

 Вас.

 viscosis,

Часто отмечается смешанное течение нозематоза с европейским

или американским гнильцами. Поражение микроспоридией

взрослых пчел снижает их устойчивость к некоторым грибам

(Aspergillus

 A.

 T. stelata).

Большой отход пчел вызывает совместное течение нозематоза

и амебиаза. Зарегистрированы случаи смешанного течения нозе-

матоза с критидиозом и грегаринозом. Часто отмечается пораже-

ние пчел ноземой и клещом Acarapis woodi.

 болезни зависит от многих факторов: жизнеспо-

собности зимующих пчел (качества подготовленности пчел, иду-

щих в зимовку); количества зараженных пчел, степени их

поражения и загрязнения внутренней среды улья спорами нозе-

мы; длительности зимовки и неблагоприятной погоды для лёта

насекомых весной; активности яйцекладки у матки; обеспеченно-

сти семьи пчел полноценными кормами. При слабом поражении

или своевременном лечении семьи пчел могут восстановить к се-

редине или концу лета свою силу и дать продукцию, однако

жизнеспособность пчел осенней генерации, идущих в зимовку,

будет значительно ниже, чем у здоровых пчел.

 Поскольку признаки поражения нозематозом не

специфичны, важное значение приобретают лабораторные иссле-

дования. В лабораторию посылают не менее 30 трупов или живых

пчел. Трупы собирают из среднего слоя подмора, образовавшего-

93

ся на дне улья. Живых пчел в период зимовки или ранней весной

берут с верхней планки рамок, а в летний — у летка или с крайних

рамок гнезда. Поступивший в лабораторию материал исследуют

групповым методом или каждую пчелу отдельно. У пчелы берут

брюшко, помещают в 1 мл воды и тщательно готовят суспензию.

Каплю суспензии микроскопируют

 в слегка зате-

ненном поле. Исследуют не менее 20 полей зрения микроскопа.

При положительных результатах находят овальные споры нозе-

мы. Степень поражения оценивают по 3 или 4-балльной системе:

-f- единичные споры ноземы (менее 10),

+ +

 (в каждом поле видны не соприкасаю-

щиеся споры),

, , ,

 (очень много соприкасающихся спор),

 свыше 1000.

Для определения количества спор используют также метод

подсчета их в  г е м о ц и т о м е т р е (камера Горяева).

При индивидуальном исследовании пчел для получения

суспензии используют многокамерные гомогенизаторы и мно-

гоштыревые пружинные капельницы. Оценку поражения прово-

дят так же, как указано выше. Определение количества спор

в каждой пробе позволяет более точно судить о состоянии пора-

жения пчел в семье и прогнозировать исход болезни.

При слабом поражении пчел полученные гомогенаты центри-

фугируют при 1500 об/мин в течение 15 мин и исследуют средний

(белого цвета) слой осадка. Для выявления носительства спор

ноземы следует выдержать

 дней группу пчел в садках,

а затем исследовать их кишечник.

Прижизненную диагностику нозематоза у маток и рабочих

пчел осуществляют методом

 Матку осторожно помещают под стеклянный кол-

пак, дном для которого служит стеклянная пластина. После

дефекации матки пятна кала осторожно снимают, добавляют

каплю воды и исследуют. При невозможности сразу же провести

исследование материал берут на целлофан и сушат. Для сбора

каловых масс рабочих пчел весной перед массовым облетом

укрепляют на передней стенке улья листы бумаги. Можно со-

скоблить фекалии со стенок улья и рамок.

Для выявления спор ноземы в меде к 2,1 г (1,5 мл) этого

продукта добавляют 5 мл воды и 10 мл этилового спирта, тща-

тельно размешивают и центрифугируют

 мин при

3000 об/мин. Микроскопируют осадок.

Пергу или пыльцевую обножку (250 мг) исследуют на

предметном стекле, добавив к ним

 капель раствора Люголя.

В тканях тела пчелы споры ноземы и их стадии развития

удается обнаружить при просмотре под световым микроскопом

окрашенных гистологических препаратов или при электронной

микроскопии ультратонких срезов.

Наличие спор не всегда свидетельствует о развитии болезни,

важно установить их жизнеспособность. С этой целью споры
94

окрашивают акридином оранжевым

 000 в течение

 мин, и мазки исследуют под люминесцентным микроско-

пом. У живых спор оболочка светится желто-зеленым цветом

(Бубнов, Смирнов, 1970, 1971).

Для определения жизнеспособности спор можно применить

биопробу.

Установить видовую принадлежность спор удается с по-

мощью специфичных сывороток в реакциях иммунофлуоресцен-

 В некоторых странах при возникнове-

нии нозематоза накладывают карантин, в других, в том числе

и в СССР, при этой болезни вводят ограничения.

С целью предупреждения заноса возбудителя нельзя разме-

щать на пасеках нозематозные семьи; использовать маток и рас-

плод семей, не проверенных на наличие возбудителей, а также

соты, ульи и другой инвентарь без предварительной их дезинфек-

ции; размещать рои неизвестного происхождения; ставить ульи

на перелете пчел с других пасек; перемещать пораженные семьи.

В случае приобретения пакетов пчел из них помещают в чистые

ульи на продезинфицированные соты. Свободные от расплода

соты в пакетах выбраковывают или дезинфицируют. Ульи с вновь

сформированными семьями тщательно утепляют и ставят в

30 м от основной пасеки. При подсадке маток тщательно их

осматривают, сопровождающих пчел уничтожают.

Пчел содержат в теплых ульях, которые устанавливают на

подставки, в местах, хорошо освещенных солнцем и защищенных

от ветра. Слабые семьи помещают в один улей, разделенный

глухой перегородкой, или объединяют. Нельзя часто беспокоить

пчел в позднеосенний, зимний и ранневесенний периоды. В зи-

мовнике поддерживают температуру ±2

 и относительную

влажность

 %. При зимовке на воле и при выставке ранней

весной ульи обвязывают толем.

Важной профилактической мерой при нозематозе является

ранний облет пчел, поэтому ульи как можно раньше выставляют

из зимовника. После облета при благоприятной погоде семьи пчел

пересаживают в чистые продезинфицированные ульи. Гнездо

сокращают и утепляют, иногда применяют дополнительный обог-

рев улья. Старые непросвечивающиеся соты (более 3 лет эксплуа-

тации) выбраковывают, удаляют также соты с забродившим или

закристаллизовавшимся медом, заплесневевшей пергой, пустые

соты с пятнами испражнений пчел. С деревянных частей рамок,

остающихся в улье, удаляют пятна. Годные для употребления

соты после механической очистки рамок дезинфицируют.

Весной пчелам скармливают полноценную пергу или дают

белковые подкормки (4 части

 6 частей сахарной

 6 частей меда, смешанные до однородной массы; са-

харный сироп 1:1 и

 % свежего цельного коровьего молока

в количестве

 г (Мельник, Попов и др., 1982). Очень

важно, чтобы семьи пчел в течение всего сезона развития были

95

щиеся спорь

+ + + -

Для опр

подсчета их