Билет 1

 

1. Предмет и задачи микробиологии.

Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами.

Медицинская микробиология и еѐ место в современной медицине.

Медицинская микробиология тесно связана со всеми медицинскими дисциплинами (инфектологией, терапией, педиатрией, хирургией, фтизиатрией, гигиеной, фармакологией и др.). Значительно возросла роль микробиологии, вирусологии и иммунологии в решении многих проблем здравоохранения. Цель медицинской микробиологии – глубокое изучение структуры и важнейших биологических свойств патогенных микробов, взаимоотношения их с организмом человека в определенных условиях природной и социальной среды, совершенствование методов микробиологической диагностики, разработка новых, более эффективных лечебных и профилактических препаратов, решение такой важной проблемы, как ликвидация и предупреждение инфекционных болезней.

 

2.

 Инфекция – сумма реакций, которыми восприимчивый макроорганизм отвечает на внедрение микроорганизма.

Из определения инфекции становятся очевидными и факторы необходимые для ее возникновения и развития. Это микроб-возбудитель, восприимчивый макроорганизм, внешняя среда, в которой они взаимодействуют. Для развития инфекции весьма значима инфицирующая доза- минимальное кол-во микробных клеток, способных вызывать инфекцию.

Внешняя среда является обязательным участником в инфекционном процессе, его третьей движущей силой. Факторы внешней среды (физические, химические, биологические и социальные) могут существенно влиять на развитие, течение и исход инфекционного процесса.

Важным физическим фактором является температура. повышение температуры тела организма приводит к активации факторов естественной резистентности, в частности усилению продукции интерферона. При высокой температуре усиливаются механизмы противовирусной защиты.. С другой стороны, снижение в холодное время года температуры тела человека (простудный фактор) приводит к ослаблению естественной резистентности. В связи с действием разных температур существует сезонность ряда инфекционных заболеваний. Повышение заболеваемости воздушнокапельными инфекциями (острой респираторной вирусной инфекции - ОРВИ, грипп) имеет место в холодное время года (зимой) под действием простудного фактора, кишечными инфекциями - в летне-осенний период, когда в условиях высокой температуры возбудители кишечных инфекций (дизентерия, холера, гепатит А, брюшной тиф) интенсивно размножаются во внешней среде, а также распространяются с пищевыми продуктами и водой.

Особенности питания, наличие витаминов в пище могут существенно влиять на естественную резистентность. В весенний период в связи с авитаминозом обостряются хронические инфекционные заболевания (туберкулез, ревматизм и др.). Витамин В12 и другие производные бензимидазола (дибазол), являясь стимуляторами синтеза белка в организме, повышают его естественную резистентность. Поэтому эти препараты используют для профилактики инфекционных болезней.

Социальный фактор является мощным фактором внешней среды, влияющим на устойчивость организма к инфекции

 

3.

 

Гнойно-воспалительные заболевания (ГВЗ) - большая группа этиологически полиморфных заболеваний, возбудители которых принадлежат к различным систематическим группам бактерий. Они могут иметь внебольничное или внутрибольничное происхождение. Клинические проявления ГВЗ очень разнообразны: от локальных (типа абсцессов, флегмон) до генерализованных форм (сепсис). Возбудители ГВЗ в основном принадлежат к условно-патогенным бактериям, что определяет некоторые особенности этих заболеваний. Так, один и тот же возбудитель может быть причиной различных клинических форм инфекций. С другой стороны, одни и те же нозологические формы могут вызываться различными микроорганизмами. Очень часто ГВЗ является результатом инфекции, вызванной ассоциацией различных условно-патогенных микроорганизмов. При экзогенном инфицировании бактерии чаще всего вызывают ГВЗ при попадании в места с нарушенными нормальными механизмами защиты (раневая, ожоговая поверхность) или присг

эоединяются к имеющимся ГВЗ, участвуя, таким образом, в смешанных инфекциях (суперинфекциях). Среди наиболее часто встречающихся возбудителей ГВЗ можно выделить 3 большие группы: I.Пиогенные кокки - представители семейств Micrococcaceae, Streptococcaceae, Neisseriaceae; II. Грамотрицательные условно-патогенные факультативно-анаэробные и аэробные бактерии - представители семейств Enterobacteriaceae, Pseudomonadacae, Pasteurellaceae; III. Облигатно-анаэробные неклостридиальные бактерии, представители семейств Bacteroidaceae, Veillonellaceae, Lactobacillaceae, Peptococcaceae.

Основной метод диагностики- бактериологическое исследование. Исследуются методы иммуноиндикации. Этиотропная терапия проводится антибиотиками.

 

4.

 

Вир.гепатит — это системное инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением печени. В результате поражения клеток печени и развивающегося острого воспаления нарушается функция этого жизненно важного органа. Гепатит А ранее называли эпидемический гепатит, болезнь Боткина. Это РНК-содержащий вирус. Его РНК представлена “плюс-нитью”. Диаметр нуклеокапсида 27-28 нм, тип симметрии кубический. Вирус гепатита А имеет один вирусспецифический антиген белковой природы, связанный с 4 капсидными белками. Суперкапсидной оболочки вирус не имеет. Он обладает высокой термостабильностью (до 60оС), гепатотропизмом, медленным и нецитолитическим циклом репродукции. HAV не размножается в куриных эмбрионах и организме лабораторных животных.  Микробиологическая диагностика гепатита А.  Поскольку вирус гепатита А в искусственных условиях практически не культивируется, то для микробиологической диагностики используют иммунологические методы. Иммуноиндикация - ранний, экспресс-метод диагностики. Материалом для исследования являются фекалии больных, в которых можно обнаружить вирусные частицы с помощью иммуноэлектронной микроскопии (ИЭМ) и вирусный антиген с помощью ИФА и РИА. При ИЭМ в качестве иммунной используют сыворотку реконвалесцентов, меченную коллоидным золотом. Вирус и его антиген можно обнаружить в конце инкубационного, в продромальный и в начале желтушного периода.

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                        «Саратовский государственный медицинский университет им.В.И. Разумовского                                              Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101                      Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 2             1.Рекомбинации и их особенности у бактерий. Виды рекомбинаций: трансформация, трансдукция, конъюгация.                      2. Патогенность и вирулентность. Единицы измерения. Патогенные,                   условно- патогенные и непатогенные микроорганизмы.              3. Иерсиниозы. Особенности биологии возбудителя. Лабораторная   диагностика.          4.Химиотерапия вирусных инфекций.            Зав. кафедрой       Профессор    _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 2

1.

 

Особенности рекомбинаций у бактерий:

1. однонаправленность переноса генетической информации (от донора к реципиенту);

2. неодинаковое долевое участие генома донора и реципиента в образовании рекомбинанта (реципиентный геном полностью переходит к рекомбинанту, а от донора только отдельные гены, плазмиды);

3. в результате рекомбинации образуется мерозигота (частичная эмгота);

4. наличие нескольких механизмов рекомбинаций: конъюгация, транс формация, трансдукция, слияние протопластов.

Механизмы рекомбинаций. 1. Конъюгация – перенос генетической информации при непосредственном контакте донора и реципиента. Это аналог полового процесса у бактерий. Поло у бактерий определяет F-плазмида: в “мужских” клетках (F+) она есть, в “женских” (F-) – отсутствует

Трансдукция – перенос генетической информации от донора к реципиенту с помощью трансдуцирующего фага.

Трансдуцирующий  фаг – это умеренный фаг, который при индукции дизогенной культуры захватывает соседние бактериальные гены и при инфицировании новых клеток вносит в них эти гены. При строгой специфичности локуса интеграция умеренного фага с хромосомой лизогенной клетки (например, для фага λ – рядом с lnc-опероном, для фага Р – рядом с trp-опероном и т.д.) при индукции захватываются и переносятся всегда строго определенные гены – это специфическая трансдукция. Перенос случайных бактериальных генов умеренным фагом – общая трансдукция. Захват случайных бактериальных генов может происходить при сборке фагов или в том случае, когда профаг не имеет строго определенного локуса в геноме бактерий. Изменение свойств бактерий, инфицированных умеренным фагом, может происходить и под действием генов самого фага – явление фаговой или лизогенной конверсии.

 

2.

.

Для развития инфекционной болезни микробы должны обладать 2 свойствами - патогенностью и вирулентностью. Патогенность потенциальная, генетически обусловленная способность проникать в макроорганизм и размножаться в нем.(качественный, стойкий признак). Вирулентность способность не только проникать,размножаться в микроорганизме,но и подавлять его защитные механизмы.(инф. Болезнь).  Измеряется дозой микроорганизмов, вызывающихопределенный биологический эффект(DCL, DLM, LD50…..реализуется через 4 последовательно сменяющих друг друга процесса: Адгезия-колонизация-инвазия-образования.

Весь огромный мир микроорганизмов по способности вызывать инфекцию можно разделить на 3 группы: 1. способные вызывать инфекцию - ответную реакцию организма это патогенные; 2. не могут вызывать ответную реакцию, не могут вызывать инфекцию – это сапрофиты или непатогенные;  3. условно-патогенные, способные вызывать инфекцию лишь при определенных условиях.

 

3.

Особенностями иерсиний является их психрофильность (t оптимум < 25 0С).  Иерсиниозы – сапронозы. Заболевания часто возникают при употреблении овощей из  хранилищ с низкой температурой.  Патогенез. Иерсинии, минуя желудок, попадают в тонкий кишечник и  прикрепляются к мембранам энтероцитов (фаза внедрения). Если иерсинии вирулентны,  то на их наружной мембране имеется белок интин, за счет которого они проникают в  лимфатический аппарат тонкого кишечника (фаза первичной локализации), где  размножаются и выделяют эндотоксин в кровь (фаза токсинемии). Если на этом этапе заболевание заканчивается, то клинические проявления характеризуются гастроэнтеритом  с мезентериальным лимфаденитом (клиника аппендицита). В 80 % случаев катаральных  аппендицитов выделяются иерсинии.  Если на этой стадии заболевание не заканчивается, то начинается фаза бактериемии  – генерализация инфекции, заболевание протекает как сепсис и скарлатиноподобная  лихорадка.  IV фаза – фаза вторично-очаговых и аллергических проявлений (постиерсиниозные  иммунопатологические заболевания – артриты, гепатиты, узловая эритема).  МБД 1. Серодиагностика – РПГА с эритроцитарными диагностикумами.  2. Иммуноиндикация.  3. Молекулярно-генетические методы.  4. Бактериологическое исследование:  1) посев материала проводится на специальные среды;  2) посевы подлежат холодовому обогащению (высевы через 7-14 дней);  1) необходимо определить принадлежность к роду и виду; 2) заболевания вызывают не все, а определенные серогруппы внутри каждого  вида; 3) внутри серогруппы необходимо определить вирулентная эта иерсиния или  нет (существуют определенные тесты). Специфическая профилактика иерсиниозов не разработана. Этиотропная терапия: антибиотики.

 

4.

По направленности действия химиопрепараты делятся на: противопротозойные - метронидазол (флагил, трихопол); противовирусные - азидотимидин, фоскарнет (фоскавир), ганцикловир, амантадин. противогрибковые - амфотерицин В, нистатин, леворин, натамицин (полиены), клотримазол (канестен); антибактериальные. В клинической практике среди антибактериальных препаратов всегда отдельно выделяются противотуберкулезные (антимикобактериальные) и противосифилитические средства, что связано как со специфичностью самих возбудителей данных заболеваний, так и с важностью этих заболеваний как отдельных нозологических форм. По химическому строению выделяют несколько групп химиотерапевтических препаратов. Сульфаниламиды. К этой группе относятся многочисленные производные сульфаниловой кислоты. Нитрофурановые препараты. Это производные пятичленного - фурана. К ним относятся - фурацилин, фурагин, фуразолидон, нитрофурантоин (он же фурадонин), нитрофуразон, солафур и др. Механизм их действия состоит в одновременной блокаде нескольких

энзимных систем микробной клетки.  Хинолоны. (более известна как неграм, невиграмон), циноксацин (цинобак) и производными хинолонов. К ним относятсяоксолиниевая кислота (4-аминохинолон), нитроксолин (5-НОК) (8- аминохинолон) и фторхинолоны: Механизм действия всех хинолонов состоит в нарушении различных отдельных этапов (репликации, дупликации, транскрипции, репарации) синтеза ДНК микробной клетки. Производные мышьяка, сурьмы и висмута. Эта группа химиотерапевтических веществ, полученных на основе соответствующих соединений. Они были первыми препаратами этиотропной терапии и применялись для лечения паразитарных инфекций (сонная болезнь) и сифилиса.

.

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101                       Форма обучения       очная                                                                                                          ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 3             1.Бактерии. Определение. Принципы классификации бактерий: филогенетическая, геносистематика.                      2.Токсины бактерий. Анатоксины и их применение.      3.Острые кишечные заболевания, возбудители. Общая характеристика семейства кишечных бактерий. Факторы вирулентности энтеробактерий.      4.Вирус гепатита В. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 3

1.

Бактерии — домен прокариотных микроорганизмов, чаще всего одноклеточных Изучением бактерий занимается раздел микробиологии — бактериология. Классификация. Наибольшую известность получила фенотипическая классификация бактерий, основанная на строении их клеточной стенки 4отдела: Gracilicutes (грамотрицательные), Firmicutes (грамположительные), Tenericutes(микоплазмы; отдел с единственным классом Mollicutes) и Mendosicutes (археи). В последнее время всё большее развитие получает филогенетическая классификация бактерий, основанная на данных молекулярной биологии. Одним из первых методов оценки родства по сходству генома был предложенный ещё в 1960-х годах метод сравнения содержания гуанина и цитозина в ДНК. Хотя одинаковые значения их содержания и не могут дать никакой информации об эволюционной близости организмов, их различия на 10 % означают, что бактерии не принадлежат к одному роду. Другим методом, произведшим в 1970-е настоящую революцию в микробиологии, стал анализ последовательности генов в 16s рРНК, который позволил выделить несколько филогенетических ветвей эубактерий и оценить связи между ними. Для классификации на уровне вида применяется метод ДНК-ДНК гибридизации. Анализ выборки хорошо изученных видов позволяет считать что 70 % уровень гибридизации характеризует один вид, 10—60 % — один род, менее 10 % — разные рода.  Геносистематика позволяет определять микроорга­низмы не по сходству, а по родству.

2.

Токсины бактериальные, входящие в состав структур микробной клетки или продуцируемые ею в окружающую среду вещества, оказывающие повреждающее действие на организм человека и животных. Вызывают характерные синдромы и в большей или меньшей мере определяют течение и исход болезни. Токсины условно разделяют на: эндотоксины и экзотоксины. Исходя из структурно-функциональных свойств токсинов дифференцируют на простые и сложные. Простые токсины являются белками, одна полипептидная цепь которых несет токсическую (активатор), др. - транспортную (рецептор) функцию. Все они относятся к группе экзотоксинов. Сложные токсины состоят из нескольких компонентов белковой и небелковой (полисахаридной, липидной) природы, также имеют рецептор и активатор. Сложное строение свойственно всем эндотоксинам и некоторым экзотоксинам. Все токсины обладают выраженными антигенными и протективными свойствами, причем по специфичности антигены эндотоксинов близки к бактериям-продуцентам, антигены экзотоксинов отличаются от них. В связи с этим антисыворотки против эндотоксинов нейтрализуют и эндотоксин, и бактерия - продуцент, против экзотоксинов - только экзотоксин. Эффект, вызываемый токсинами, как правило, является следствием целого ряда поступательно протекающих реакций, начиная с адсорбции транспортной части токсина на рецепторах клеток-мишеней. Рецепторы для экзотоксинов расположены на ограниченной группе клеток, поэтому их действие проявляется в специфическом симптомокомплексе; эндотоксины способны адсорбироваться и повреждать клетки различных органов, в связи, с чем клин, проявления действия разных эндотоксинов близки. 

3.

ОКИ – большая группа этиологически полиморфных заболеваний, возбудители которой принадлежат к различным группам микроорганизмов (простейшие, грибы, бактерии, вирусы). Все заболевания объединены в одну группу на основании эпидемиологического признака – пути распространения и входных ворот. Сем. Enterobacteriaceae - это семейство включает многочисленных представителей. Биологические свойства. Все энтеробактерии - палочки средней величины с закругленными концами, расположенные беспорядочно, аспорогенны, капсулообразование непостоянно. Одни энтеробактерии подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, другие неподвижны. По типу получения энергии являются факультативными анаэробами. Грамотрицательны. Культуральные свойства. Все энтеробактерии не требовательны к питательным средам. На МПА образуют однотипные колонии средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, бесцветные. На МПБ – равномерное помутнение. Для выделения энтеробактерий использую дифференциально-диагностические среды. Биохимические свойства общие для всего семейства:- расщепляют глюкозу до кислоты или до кислоты и газа; - редуцируют нитраты в нитриты; - каталаза +, оксидаза -, OF-тест +/+ (окисление и ферментация).

Антигенное строение. Все энтеробактерии имеют О-антиген и К-антиген, Подвижные представители  имеют Н-антиген.  Факторы патогенности энтеробактерий делят на 4 группы: 1. Факторы, определяющие взаимодействие бактерий с эпителием  соответствующих экологических ниш и колонизацию зоны первичного инфицирования.  В настоящее время полагают, что сигналы, генерируемые при  адгезивных взаимодействиях, могут напрямую вызывать диарею.  2. Факторы, обеспечивающие устойчивость бактерий к факторам защиты  макроорганизма и способность размножаться in vivo 3. Факторы, индуцирующие синтез цитокинов и медиаторов воспаления, ассоциирующихся с иммунопатологией - бактериальные модулины. 4. Токсины и токсические продукты, вызывающие патологические  изменения в органах и тканях макроорганизма. Различают четыре типа токсинов: - энтеротоксины;- токсины, нарушающие цитоскелет клетки; - токсины, вызывающие гибель клетки – токсин Шига и шигоподобные токсины, а также энтерогемолизины; - токсины, влияющие на нервную систему кишечника посредством  освобождения нейромедиаторов-трансмиттеров, влияющих на гладкую мускулатуру кишечника.

4.

. Гепатит В ранее называли сывороточный гепатит. Это ДНК- содержащий вирус. Нуклеиновая кислота вируса гепатита В представлена кольцевой двунитевой молекулой ДНК, причем одна нить разомкнута, дефектна. Длина ее непостоянна и может составлять от 15 до 60% длинной цепи. Кольцевая молекула может принимать линейную форму. Геном связан с  ферментами: протеинкиназой, ДНК-зависимой ДНК-полимеразой, которая достраивает короткую цепь ДНК до полной длины при попадании вируса в клетку, и обратной транскриптазой, которая обнаруживается в инфицированных HBV клетках печени при раковом перерождении. Вирион HBV имеет диаметр 42-52 нм, а его нуклеокапсид - 27 нм. Тип симметрии нуклеокапсида - кубический. Вирус гепатита В имеет суперкапсидную оболочку, представленную липидами и полипептидами. Белки суперкапсидной оболочки могут отличаться по антигенной специфичности, а полипептид, содержащийся в этой оболочке, обладает группоспецифичностью. Вирус гепатита В не размножается в культурах тканей, в куриных эмбрионах, в организме лабораторных животных. Он патогенен для человекообразных обезьян. Микробиологическая диагностика вирусного гепатита В основана на выявлении специфических антигенов и антител в крови обследуемого методом иммуноферментного анализа.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело  060101.65             Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 4          1.Прокариоты и их особенности. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Виды микроскопии      2.Морфологические,  биохимические и генетические аспекты вирулентности(«островки» и «острова» вирулентности), вирулоны      3.Диареегенные E.coli, патогруппы, их характеристика, факторы вирулентности. Энтеральные эшерихиозы, методы микробиологической диагностики      4. Возбудитель лейшманиоза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 4

1.

Прокариоты не имеют - морфологически оформленного ядра  – его эквивалентом является нуклеоид,  который представляет собой замкнутую двунетевую кольцевую молекулу ДНК,  прикрепленную в одной точке к цитоплазматической мембране – по аналогии с  эукариотами эту молекулу называют хромосомой бактерий;  - сетчатого аппарата Гольджи;  - эндоплазматического ретикулама (сети)  - митохондрий. - их рибосомы имеют константу седиментации 70 S.  Имеется также ряд: - многочисленные инвагинации ЦПМ, которые называют мезосомами, они  связаны с нуклеоидом и участвуют в делении клетки, спорообразовании, и  дыхании бактериальной клетки;  - специфический компонент клеточной стенки – муреин, по химической  структуре – это пептидогликан (диаминопиеминовая кислота). - плазмиды - автономно реплицирующиеся кольцевые молекулы  двунитевой ДНК. Они находятся наряду с нуклеоидом в цитоплазме, хотя могут  быть, и интегрированы в него и несут наследственную информацию,  неявляющуюся жизненно необходимой для микробной клетки, но  обеспечивающие ей те или иные селективные преимущества.  Бактерии – это одноклеточные микроорганизмы, относящиеся к царству  прокариотов, лишенные оформленного ядра и хлорофилла, способные образовывать  ассоциации сходных клеток. Выделяют три основные формы бактерий: Шаровидные бактерии, или кокки Форма шаровидная или овальная. По характеру расположения клеток в мазках выделяют: Микрококки – отдельно расположенные клетки. Диплококки – располагаются парами.  Стрептококки – клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку. Сарцины – располагаются в виде «пакетов» из 8 и более кокков.Стафилококки – кокки, расположенные в виде грозди винограда в результате деления в разных плоскостях. Палочковидные  бактерии. Форма палочковидная, концы клетки могут быть заостренными, закругленными, обрубленными, расщепленными, расширенными. Палочки могут быть правильной и неправильной формы, в том числе ветвящиеся, например у актиномицетов. По характеру расположения клеток в мазках выделяют:   Монобактерии – расположены отдельными клетками. Диплобактерии – расположены по две клетки. Стрептобактериии – после деления образуют цепочки клеток.  Палочковидные бактерии могут образовывать споры: бациллы и клостридии. Извитые  бактерии. Форма   - изогнутое тело в один или несколько оборотов. Вибрионы – изогнутость тела не превышает одного оборота. Спирохеты – изгибы тела в один или несколько оборотов. Для изучения их морфологии пользуются микроскопией.  1. Световая иммерсионная микроскопия – микроскопия в проходящем свете с использованием иммерсионного объектива и иммерсионного масла. Слой масла, введенный между объектом и фронтальной линзой объектива повышает разрешающую способность микроскопа 2. Темнопольная микроскопия: основана на явлениях рассеяния света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости частиц (например, взвеси бактерий). 3. Фазовоконтрастная микроскопия: основана на изменении фазы колебания световой волны при прохождении через объект, повышает контрастность объекта. 4. Люминисцентная микроскопия: основана на спонтанной или наведенной специальными красителями фотолюминисценции (свечение в УФ-лучах). 5. Электронная микроскопия: основана на использовании для контрастирование объекта не светового потока, а потока электронов. Электронные микроскопы имеют большую РСМ, чем оптические, т.к. λ волны пробега электронов намного короче λ волны светового потока . Электронная микроскопия позволяет изучать ультраструктуру бактериальной клетки и мельчайшие микроорганизмы-вирусы.

 

2.

Гены вирулентности чаще всего обнаруживаются в больших сложных блоках, обозначенных как хромосомные вставки или патогенные острова. Эти острова и островки связаны между собой общими последовательностями, что указывает на приобретение ДНК-сегмента с помощью таких событий, как «незаконные» рекомбинации, имеющие сходство с транспозицией или вставкой фага. Эти ДНК-блоки наиболее часто встраиваются в горячие точки хромосомы - наиболее восприимчивые участки к вторжению чужеродных ДНК или места встраивания фага. Например, большие сегменты ДНК, кодирующие различные вирулентные факторы, встроены в одно и то же место хромосомы как у уропатогенной, так и у энтеропатогенной E. coli - возбудителей двух различных заболеваний, причем последовательности, расположенные внутри патогенного островка, не обнаруживают гомологии с теми, что имеют место у непатогенных клонов, подобных E. coli K-12, но последовательности, непосредственно прилегающие к патогенному островку, демонстрируют общность у патогенных и непатогенных штаммов.

 

3. E.coli - палочки средней величины с закругленными концами, располагаются беспорядочно; не образуют спор; некоторые штаммы имеют микрокапсулу; подвижны, но встречаются и неподвижные варианты. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. E.coli не требовательны к питательным средам. На мясопептонном агаре образуют круглые, выпуклые, средней величины, полупрозрачные, бесцветные колонии. В жидкой среде вызывают диффузное помутнение. E.coli обладают высокой ферментативной активностью. Расщепляют углеводы с образованием кислоты и газа (имеются безгазовые варианты). E.coli ферментируют лактозу (встречаются лактозонегативные варианты эшерихий). На диффференциально- диагностических средах для энтеробактерий лактозопозитивные E.coli формируют окрашенные колонии. E.coli обладают О-, К- и Н-антигенами. Строение О-антигена определяет принадлежность к серогруппе; К- и Н-антигенов - к серовару. У условно-патогенных кишечных палочек основным фактором вирулентности является образование эндотоксина. Диареегенные кишечные палочки в зависимости от своих биологических свойств делятся на 4 группы: энтеротоксигенные (ЕТЕС), энтероинвазивные (ЕIЕС), энтеропатогенные (ЕРЕС), энтерогеморрагические (ЕНЕС). Основным фактором вирулентности ЕТЕС является экзоэнтеротоксин, сходный по своим свойствам с холерогеном; ЕIЕС - способность к инвазии и внутриэпителиальному размножению; ЕРЕС - способность к ограниченной инвазии и ЕНЕС - продукция двух типов шигаподобных токсинов. Заболевания, вызываемые E.coli, делят на 2 группы: энтеральные (кишечные, эпидемические) эшерихиозы и парэнтеральные. Парэнтеральные эшерихиозы вызывают условно-патогенные E.coli - представители нормальной микрофлоры. При снижении иммунологической реактивности кишечная палочка может покидать место своего постоянного обитания (кишечник) и гематогенно либо лимфогенно распространяется, вызывая гнойно - воспалительные процессы самой различной локализации. Энтеральные эшерихиозы - это типичные антропонозные кишечные инфекции. Они регистрируются в виде спорадических случаев заболевания, либо вспышек, дифференцируются по патогенезу, микробиологическим, клиническим и эпидемиологическим параметрам. Вызываются только диареегенными кишечными палочками, которые относятся к 47 определенным серогруппам. После перенесенного заболевания развивается непрочный и непродолжительный иммунитет. Основным методом микробиологической диагностики эшерихиозов является бактериологическое исследование. Материалом для посева при энтеральных эшерихиозах являются фекалии, при парэнтеральных – гнойное отделяемое, при септических формах - кровь. Для диагностики эшерихиозов возможно использование методов иммуноиндикации и генной диагностики. Для этиотропной терапии используют антибиотики. Специфическая профилактика не разработана.

 

4.

Лейшманиоз представляет собой протозойную инфекцию с трансмиссивным механизмом распространения, характеризующуюся поражением кожных покровов или внутренних органов внутриклеточными паразитами – лейшманиями.

Лейшманиоз вызываются семнадцатью из более чем двадцати видов простейших паразитов рода Leishmania. Лейшмании развиваются внутри клеток хозяина (преимущественно в макрофагах и элементах ретикулоэндотелиальной системы). В течение своего жизненного цикла им необходимо сменить двух хозяев. В организме позвоночных животных лейшмании находятся в безжгутиковой форме, развиваясь в жгутиковую форму в теле членистоногого. Лейшмании отличаются резистентностью к антибиотикам, и чувствительны к препаратам пятивалентной сурьмы.

 

 Подавляющее большинство лейшманиозов – зоонозы (резервуаром и источником инфекции являются животные), только два вида – антропонозы. Виды животных, участвующих в распространении лейшманиоза, довольно ограничены, поэтому инфекция является природно-очаговой, распространяется в пределах обитания соответствующей фауны: грызунов песчаниковых видов, псовых (лисы, собаки, шакалы), а также переносчиков – москитов. Человек является источником инфекции в случае поражения кожной формой лейшмании, при этом москиты получают возбудителя с отделяемым кожных язв. Висцеральная лейшмания в подавляющем большинстве случаев является зоонозной, москиты заражаются от больных животных.

 Заразность москитов отсчитывается с пятого дня попадания лейшманий в желудок насекомого и сохраняется пожизненно. Человек и животные контагиозны в течение всего срока пребывания возбудителя в организме.

Лейшманиоз передается исключительно с помощью трансмиссивного механизма, переносчики – москиты, получают инфекцию, питаясь кровью больных животных, и переносят здоровым особям и людям. Человек обладает высокой восприимчивостью к инфекции, после перенесения кожного лейшманиоза сохраняется продолжительный стойкий иммунитет, висцеральная форма такового не формирует.

Возбудитель проникает в толщу кожи человека при укусе москита, формируя в области входных ворот лейшманиозную гранулему. Впоследствии, при висцеральной форме инфекции гранулема рассасывается, а при кожной - прогрессирует в язву.

 

 Лейшмании разносятся по организму с током лимфы, поражая регионарные лимфатические узлы. Вдоль лимфатического сосуда паразиты могут формировать лейшманиомы – ряд последовательно располагающихся специфических язв.

 

Висцеральная форма лейшманиоза развивается в результате рассеивания возбудителя по организму и попадания в печень, селезенку, костный мозг. Реже – в кишечную стенку, легкие, почки и надпочечники.

 

 Возникающий иммунный ответ подавляет инфекцию, при этом заболевание протекает латентно, либо с маловыраженной симптоматикой. При иммунодефиците, сниженных защитных свойствах лейшманиоз прогрессирует, протекает с выраженной клиникой интоксикационного синдрома, лихорадкой. Размножение паразитов в печени способствуют замещению гепатоцитов фиброзной тканью, в селезенке отмечают атрофию пульпы с участками инфарктов и некротизации.  Вследствие поражения костного мозга развивается анемия. В целом висцеральный лейшманиоз, прогрессируя, вызывает общую кахексию.

В качестве специфической диагностики осуществляют микроскопическое исследование, бакпосев на питательной среде NNN, биопробы на лабораторных животных.

 

 Серологическая диагностика лейшманиоза проводится с применением РСК, ИФА, РНИФ, РЛА.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология          Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 5            1.Клеточная стенка, её функции. Строение клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Капсулы у бактерий: строение, значение, методы выявления                      2.Иммуноферментный анализ (ИФА) для серодиагностики.      3.Бактериальная дизентерия. Возбудители. Классификация дизентерийных бактерий. Факторы вирулентности. Лабораторная диагностика дизентерии.      4.Арбовирусы. Возбудители. Особенности эпидемиологии. Работы Зильбера, Павловского, Чумакова, Смородинцева, Соловьева по изучению клещевого энцефалита. Лабораторная диагностика клещевых энцефалитов.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 5

1.

Клеточная стенка. Функция клеточной стенки состоит в том, что она является  осмотическим барьером; определяет форму бактериальной клетки; защищает клетку  от воздействия окружающей среды; несет разнообразные рецепторы, способствующие  прикреплению фагов, колицинов, а также различных химических соединений через  клеточную стенку в клетку поступают питательные вещества и выделяются продукты  обмена; в клеточной стенке локализован О – антиген бактерий и с ним связан  эндотоксин бактерий.  Существуют два типа строения клеточной стенки у бактерий. В обоих случаях  ее основу составляет пептидогликан муреин (у некоторых, например ГР.+ бактерий он  связан с тейхоевыми кислотами). У одних бактерий – 1 тип, он составляет до 90%  массы клеточной стенки и образует многослойный до 10 слоев каркас. Такие бактерии  при окраске по методу Грама прочно удерживают комплекс генцианового фиолетового  красителя - они окрашиваются в сине – фиолетовый цвет и называются Гр (+). У  бактерий со вторым типом строения клеточной стенки поверх 2- 3 слоев  пептидогликана – муреина располагается слой липополисахаридов. Эти бактерии при  окраске по Граму не способны прочно связывать комплекс красителей, и  соответственно, обесцвечиваются спиртом. Поэтому их дополнительно прокрашивают  фуксином в розово – красный цвет. Это Гр (-) бактерии. 

 

Капсула бактерий – это утолщенный наружный слой клеточной  стенки. Капсулы могут быть построены из полисахаридов (пневмококк) или белков (возбудитель сибирской язвы).  Большинство бактерий, особенно патогенных, образуют капсулу только в организме человека или животных. Однако, существует  род истинно капсульных бактерий (Klebsiella), представители которого образуют  капсулу и при культивировании на искусственно питательных средах. Некоторые  бактерии могут иметь микрокапсулу, например, эшерихии, или неявно выраженную  способность к капсулообразованию – так называемую « нежную « капсулу, например, золотистые стафилококки, менингококки. Основное предназначение капсулы – защита  бактерий от фагоцитоза. Слизистая консистенция колоний встречается у капсульных бактерий. Заподозрить наличие капсулы можно при микроскопии мазка по Граму. В мазке по Граму капсульные бактерии располагаются на расстоянии друг от друга, т.к. капсула не дает соприкоснуться телам бактерий. Но капсула не видна при позитивных способах окраски. Для выявления капсул бактерий требуются специальные методы окраски, при которых сочетают позитивные и негативные способы окраски мазка. В этом случае можно увидеть бесцветные (неокрашенные) капсулы вокруг окрашенных бактерий на окрашенном фоне. Методика окраски по Бурри-Гинсу для выявления капсул.

 

2.

Принцип иммуноферментного анализа базируется на иммунной реакции антигена с антителами, когда, присоединяя к антителам ферментную метку, исследователь определяет результаты реакции антитело-антиген, фиксируя появление, либо изменение уровня ферментативной активности. Первая реакция наблюдается между очищенным антигеном возбудителей (Ag) и устанавливаемым Ig (Ab) путем фиксирования к плоскости лунок планшета иммунолога.

 

 Вторая иммунологическая реакция проводится с целью выявления появившихся иммунных комплексов. В роли антигена здесь используют специфический связавшийся Ig, антителами же к нему применяют коньюгат – Ig (Ab) к определенному Ig человека, который метят ферментом К (пероксидазой). Происходящую за этим ферментативную реакцию катализирует ферментная часть молекулы коньюгата. В качестве субстрата реакции применяют не имеющее цвета вещество под названием хромоген, в процессе реакции хромоген приобретает окраску. По интенсивности окрашивания лунки определяют количество находящегося в пробе иммуноглобулина.

 

 По завершению реакции проводится фотометрирование лунки, учет результатов ведут при помощи специального прибора. Математическая обработка результатов исследования показывает наличие и количество характерных антител в пробе.

Для серодиагностики используют 96-луночный полистирольный планшет, на боковых поверхностях ячеек которого заблаговременно адсорбируют антиген. При внесении исследуемой сыворотки в ячейки планшета к антигену прикрепляются гомологичные ему антитела. Затем в ячейки помещают меченные ферментом антитела против антител (иммуноглобулинов) человека. В случае, если исследуемая сыворотка содержит определяемые антитела - они проявятся как антигены, в реакцию с которыми вступят меченые антитела. Добавленный после промывки хромоген (краситель) позволит зафиксировать реакцию по характерному окрашиванию ячеек. Интенсивность такой окраски будет пропорциональна доле фермента, и, соответственно – количеству антител.

 

 Измеряя оптическую плотность (ОП) находящейся в ячейке жидкости и сравнивая ее с шаблонным образцом, подсчитывают концентрацию антител на единицу объема. Чаще всего результат подсчитывают в единицах ОП. Характерно, что каждая тест-система снабжена собственными показателями патологии и нормы, а также показателями учета результатов, которые и следует принимать во внимание, интерпретируя результаты.

 

3.

Род Shigella. Представители этого рода являются возбудителями бактериальной дизентерии. Морфологические свойства шигелл в основном соответствуют характеристике семейства, однако они капсулу не образует, неподвижны. Биохимические свойства. Первые сутки все шигеллы лактозоотрицательные, углеводы ферментируют только до кислоты. Международная классификация шигелл основана на биохимических свойствах и антигенном строении. В антигенном отношении однородны. Факторы вирулентности: 1) Шигеллы обладают тропизмом к эпителиальным клеткам толстой кишки; 2) а) основной фактор вирулентности – способность к инвазии и внутриэпителиальному паразитированию. Способность к инвазии определяется наличием у них БНМ, синтез которых кодируется плазмидой. Попав в толстую кишку, шигеллы преодолевают слизистый барьер и, лизировав гликокаликс, прикрепляются к рецепторам мембраны колоноцитов. Если они вирулентные, то у них имеются БНМ, которые побуждают мембрану колоноцитов к интернализации (захвату) возбудителя, в результате чего шигеллы оказываются внутри клеток в составе вакуоли, стенки которой образованы мембраной клетки. Затем шигеллы начинают размножаться и вырабатывают вещество – контактный гемолизин, под действием которого разрушается мембрана вакуоли и клетки. Шигеллы попадают в межклеточное пространство и начинаются последующие циклы их репродукции (поражаются другие клетки). При дизентерии процесс идет горизонтально, и, как правило, шигеллы за приделы слизистой не проникают. Размножение шигелл сопровождается гибелью клеток. Это приводит к образованию язв, окруженных перифокальным воспалением. Эти язвы являются характерным паталого-анатомическим субстратом при дизентерии и хорошо видны при ректороманоскопии. Формирование язв приводит к появлению в фекалиях крови и слизи. б) Все шигеллы продуцируют эндотоксин, который оказывает на организм общетоксическое действие. в) Доказано, что все виды шигелл могут продуцировать экзотоксин, но постоянно экзотоксин продуцирует шигелла Григорьева-Шига – токсин Шига. Этот токсин оказывает на организм нейротоксическое, цитотоксическое и энтеротоксическое действие. Дизентерия, вызванная шигеллами Григорьева-Шига, протекает тяжело, летальность составляет 10 %. У всех других шигелл синтез экзотоксина обычно репрессирован, а у шигелл Григорьева-Шига дерепрессирован. г) Все шигеллы продуцируют бактриоцины, поэтому после перенесенной дизентерии всегда развивается дисбактериоз. Эпидемиология, патогенез и клиника. Дизентерия – антропоноз, источником является больной человек, путь распространения – фекально-оральный. Все шигеллы патогенные, но заболевания вызывают только вирулентные штаммы (имеющие БНМ). Попав в организм, они минуют желудок, тонкую кишку и поражают колоноциты. Дизентерия – общее инфекционное заболевание, когда на фоне общей интоксикации появляются поражения кишечника: частый жидкий стул (до 40 раз в сутки), тенезмы, в фекалиях примеси крови и слизи. МБД. 1) бактериологическое исследование 2) иммуноиндикация 3) ПЦР Специфическая профилактика – не разработана. Этиотропная терапия. В тяжелых и средней тяжести случаях назначают антибиотики, нитрофураны (фурозолидон), фторхинолоны. Для лечения кишечных инфекций применяют левомицетин, тетрациклин, ампициллин.

 

4.

Группа вирусов, переносчиками которых являются членистоногие. Арбовирусы имеют одноцепочечную геномную РНК, двуцепочечную РНК (реовирусы) или двуцепочечную ДНК (в случае Asfarvirus) и могут передаваться от животных человеку через насекомых и вызывать развитие таких заболеваний, как энцефалит, лихорадка Денге, лихорадка паппатачи и жёлтая лихорадка. Вирусы,  Тогавирусы, буньявирусы. Диагностика, ИФА, РОПГА. Идентификация, РГА,РТГА,РПГА,ИФ,РСК,РН. СЕРОДИАГНОСТИКА, РТГА,РН,РСК,РРГ,ИФ,ИФА,РПГА,РИА.

Первое клиническое описание дал отечественный исследователь А. Панов в 1935 г. В 1937—1938 гг. комплексными экспедициями Л. Зильбера, Е. Павловского, А. Смородинцева и других ученых были подробно изучены эпидемиология, клиническая картина и профилактика данного заболевания. Вирус клещевого энцефалита впервые выделен в 1937 г. Л. Зильбером с сотрудниками из мозга умерших, крови и ликвора больных, а также от иксодовых клещей и диких позвоночных животных Дальнего Востока.

Серологический метод. Материалом являются парные сыворотки больного. Определение диагностического нарастания титра антител в реакциях РТГА (реакция торможения гемагглютинации) и ИФА (иммуноферментный анализ).

 

Молекулярно-биологический метод. Материалом является клещ. Клеща исследуют на наличие антигена вируса клещевого энцефалита, реже с помощью ПЦР (полимеразно-цепная реакция) выявляют вирусную РНК (клеща). Для исследований на наличие антигена используют живой материал, ПЦР диагностика возможна по фрагментам клеща.

 

Вирусологический метод. Выделение вируса из крови и спино-мозговой жидкости путем введения материала в мозг новорожденным белым мышам.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 6              1. Механизмы устойчивости бактерий к антибиотикам: биохимические, генетические.                      2.Инфекционные болезни, их особенности и периоды течения. Классификация                инфекционных болезней                     3.Брюшной тиф и паратифы. Возбудители. Патогенез. Лабораторная диагностика тифо-паратифозных заболеваний в различные периоды болезни. Специфическая профилактика. Тифо-паратифозное носительство, его значение, методы выявления.          4.ВИЧ-инфекция. Возбудитель. Лабораторная диагностика. Профилактика и терапия.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 6

1.

Биохимическую основу резистентности обеспечивают разные механизмы: • энзиматическая инактивация антибиотиков — осуществляется с помощью синтезируемых бактериями ферментов, разрушаю­щих активную часть антибиотиков. Одним из таких широко известных ферментов является бета-лактамаза, обеспечиваю­щая устойчивость микроорганизмов к бета-лактамным анти­биотикам за счет прямого расщепления бета-лактамного кольца этих препаратов. Другие ферменты способны не расщеплять, а модифицировать активную часть молекулы антибиотиков, как это имеет место при энзиматической инактивации аминогли-козидов и левомицетина; •  изменение проницаемости клеточной стенки для антибиотика или подавление его транспорта в бактериальные клетки. Этот механизм лежит в основе устойчивости к тетрациклину, •  изменение структуры компонентов микробной клетки, например изменение структуры бактериальных рибосом, сопровождается повышением устойчивости к аминогликозидам и макролидам, а изменение структуры РНК-синтетаз - к рифампицину. У бактерий одного и того же вида могут реализовываться не­сколько механизмов резистентности. В то же время развитие того или другого типа резистентности определяется не только свойствами бактерий, но и химической структурой антибиотика. Для борьбы с лекарственной устойчивостью, т. е. для преодоле­ния резистентности микроорганизмов к химиопрепаратам, cyществует несколько путей: •  в первую очередь — соблюдение принципов рациональной химио­терапии;  •  создание новых химиотерапевтических средств,  отличающихся механизмом антимикробного действия (например созданная в последнее время группа химиопрепаратов — фторхинолоны) и мишенями; •  постоянная ротация (замена) используемых в данном лечебном учреждении или на определенной территории химиопрепара­тов (антибиотиков);  •  комбинированное применение бета-лактамных антибиотиков со­вместно с ингибиторами бета-лактамаз (клавулановая кислота, сульбактам, тазобактам).

 

2.

Инфекционная болезнь – клиническое проявление инфекции. Особенности инфекционных болезней: 1) имеют своего возбудителя - это микробные агенты; 2) передается от больного к здоровому;  3) оставляют после себя более или менее выраженную невосприимчивость к повторному заболеванию; 4) имеют общие клинические симптомы;  5) имеют строгое циклическое течение.  Различают следующие периоды: 1.Инкубационный период 2. Продромальный 3. Период разгара 4. Период исходов. Для возникновения инфекции необходимо сочетание во времени и пространстве трех факторов: 1) Микроб-возбудитель. 2) Восприимчивый организм 3) Внешняя среда.

 

По локализации и механизму передачи

кишечные инфекции           

инфекции дыхательных путей       

кровяные инфекции инфекции

 наружных покр

 

По источникам инфекции

Антропонозы           

Зоонозы

 

3.

Брюшной тиф, паратиф А и паратиф В вызывают серовары сальмонелл, строго адаптированные к паразитизму в организме человека - S.typhi, S.paratyphi A и S.paratyphi B. Существенные патогенетические особенности инфекционного процесса, вызванного этими сальмонеллами, служат основанием для выделения самостоятельной нозологической формы - тифо-паратифозное заболевание (брюшной тиф, паратифы А и В). По признаку патогенности все сальмонеллы делят на две группы: 1) сальмонеллы патогенные только для человека (S. typhi, S.paratyphi А и В). Они вызывают самостоятельные тифопаратифозные заболевания (ТПЗ). Диагноз ставится по результатам иммуноидентификации. ТПЗ – антропоноз, источником инфекции является больной или носитель. 2) сальмонеллы, патогенные для человека и животных – они вызывают сальмонеллезы. В патогенезе ТПЗ различают ряд последовательных фаз, каждой из которых соответствует свой клинический период: 1. Фаза внедрения – сальмонеллы, попав в организм, минуя желудок, попадают в тонкий кишечник и прикрепляются к рецепторам мембран энтероцитов, затем проникают внутрь клеток, но в них не размножаются, а проходят через них транзитом и попадают в собственный слой слизистой оболочки кишки, а затем в лимфотический аппарат тонкого кишечника (пееровы бляшки, солитарные фолликулы). 2. Фаза первичной локализации сальмонелл – основным фактором вирулентности сальмонелл является их способность размножаться в макрофагах. Поэтому они размножаются в лимфатическом аппарате тонкого кишечника, частично гибнут, в результате чего выделяется эндотоксин, который выделяется в кровь, что приводит к эндотоксинемии. В этот период происходит сенсибилизация лимфатического аппарата тонкого кишечника. На этой фазе процесс может закончиться, и заболевание не возникает. Дальнейшая судьба зависит от вирулентности сальмонелл и состояния макроорганизма. Если сальмонеллы вирулентны, то они прорывают лимфатический барьер и поступают в кровь. 3. Фаза бактеремии – с током крови сальмонеллы разносятся ко всем органам. 4. Фаза вторичной локализации (паренхиматозной диффузии)5. Выделительно-аллергическая фаза – сальмонеллы выделяются с мочой, желчью и т.д. С желчью они вновь попадают в тонкий кишечник, где происходит повторный контакт сальмонелл с сенсибилизированными лимфатическим аппаратом тонкого кишечника. Это приводит к развитию аллергических реакций, что проявляется в возникновении многочисленных язв на стенке кишечника, их прободении и кровотечении.  Клинически брюшной тиф и паратифы не различимы. Заболевание развивается остро, протекает тяжело с выраженными симптомами общей интоксикации. Опасными осложнениями брюшного тифа, связанными с развитием язвенных поражений, являются прободения язв и кишечные кровотечения. После перенесенного заболевания вырабатывается прочный и продолжительный иммунитет. Кроме перечисленных методов возможно использование иммуноиндикации и ПЦР. Основным методом диагностики носительства является бактериологическое исследование фекалий и желчи. Применяется также РПГА с эритроцитарным брюшнотифозным Vi-диагностикумом. Для этиотропного лечения используют антибиотики или другие химиотерапевтические препараты. Специфическая профилактика осуществляется убитой или химической вакциной. Для экстренной профилактики в очагах может быть применен бактериофаг.

 

4.

Вирус ВИЧ-инфекции (вирус иммунодефицита человека) относят к семейству Rеtrоviridae, роду лентивирусов. Вирионы ВИЧ-вируса имеют сферическую форму. В сердцевине вириона содержится 2 копии однонитевой РНК, соединенные на одном из концов водородными связями.  Капсидная оболочка состоит из простых белков р18 и р24. Тип симметрии нуклеокапсида кубический. Суперкапсидная оболочка вируса образована двойным липидным слоем с расположенными на нем белковыми шипами из 2-х субъединиц (gp41 и gp120) и как конверт покрывает нуклеокапсид.  Для вируса характерна антигенная изменчивость, что сдерживает создание вакцины против ВИЧ-инфекции. Методы микробиологической диагностики ВИЧ - инфекции. Основным методом диагностики ВИЧ-инфекции является выявление антигенных маркеров ВИЧ - белков gp41, gp120, p18, p24, p7, p9. С этой целью используют различные тест-системы ИФА для иммуноиндикации. Высокой специфичностью обладают методы генетического анализа с использованием вирусных нуклеиновых зондов и ПЦР. Возможно выделение вирусов в культуре тканей из лимфоцитов с последующей идентификацией вируса по ЦПД и в реакции вирусонейтрализации, но из-за сложности вирусологическое исследование широко не применяется и используется лишь в отдельных специализированных лабораториях. Методы оценки иммунного статуса выявляют резкое угнетение клеток Т4 и уменьшение показателя Т4/Т8 и также используются в лабораторной диагностике данного заболевания. Для лечения ВИЧ-инфекции в настоящее время используют противовирусный препарат азидотимидин (ретровир), а также иммуностимуляторы и симптоматическую терапию, так как больные умирают от вторичных гнойных инфекций, вызываемых условно-патогенными бактериями и грибами, и от развития опухолей на фоне выраженного иммунодефицита.

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                      ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 7              1.Цитоплазматическая мембрана: строение, функции.                      2.Определение понятия «иммунитет». Общебиологическое значение                 иммунитета. Виды инфекционного иммунитета.      3.Сальмонеллезы. Классификация сальмонелл. Лабораторная диагностика.      4.Парамиксовирусы: вирусы кори, паротита, парагриппа, РС-вирусы. Их роль в патологии человека. Лабораторная диагностика и специфическая профилактика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 7

1.\

Цитоплазматическая мембрана является жизненно необходимым структурным компонентом бактериальной клетки. Она  ограничивает протопласт, располагаясь непосредственно под клеточной стенкой. ЦПМ  – это липопротеин. Является сложно организованной структурой, состоящей из  нескольких слоев. Двойной фосфолипидный слой пронизан белковыми глобулинами, которые обеспечивают транспорт веществ в бактериальную клетку. ЦПМ выполняет  жизненно важные функции, нарушение которых приводит бактериальную клетку к  гибели. Это, прежде всего регуляция поступления в клетку метаболитов и ионов,  участие в метаболизме, репликации ДНК, а у ряда бактерий в процессах  спорообразования.

 

2.

Иммунитет - это способ защиты генетического постоянства внутренней среды организма от веществ или тел, несущих на себе отпечаток чужеродной генетической информации в нем самом или попадающих в него извне. 

 

Общебиологическое значение иммунитета состоит :

в надзоре за генетическим постоянством внутренней среды организма,

распознавании "своего и чужого",

охране генетической чистоты вида на протяжении жизни индивидуума.

 

Для реализации этой важной функции в ходе эволюционного развития сформировалась специализированная система (комплекс) органов и тканей - иммунная система, которая представлена центральными и периферическими органами. Это такая же функционально значимая система организма человека, как пищеварительная, сердечно-сосудистая, дыхательная и другие.

Виды инфекционного иммунитета:

1) антибактериальный;

2) антитоксический;

3) противовирусный;

4) противогрибковый;

5) антипротозойный.

 

3.

р. Salmonella. Все представители этого рода относятся к патогенным энтеробактериям, которые вызывают у человека сальмонеллезную инфекцию. Внутри рода насчитывается более 2500 различных сероваров. Морфологические свойства: соответствуют признакам семейства, капсула отсутствует, подвижны. Биохимические свойства: lac‾, углеводы расщепляют до кислоты и газа, кроме S. typhi (только до кислоты). Классификация сальмонелл. Существует 2 подхода к классификации сальмонелл: 1) в основе лежат биохимические свойства: род подразделяется на 5 подродов; 2) основан на антигенном строении (классификация Кауфмана-Уайта): • по О-антигену все сальмонеллы делятся на серогруппы, которые обозначаются большими латинскими буквами (А, В, С …), их более 60; • внутри серогруппы сальмонеллы подразделяются на серовары по специфической фазе Н-антигена (особенностью Н-антигена сальмонелл является то, что он у них находится в двух фазах). Таким образом, у сальмонелл основной таксономической единицей является серовар. Основным методом микробиологической диагностики сальмонеллезов является бактериологическое исследование. Материалом для него служат фекалии, рвотные массы, промывные воды желудка, остатки пищевых продуктов. При генерализованной форме исследуют кровь. Для ретроспективного анализа вспышек заболевания можно использовать методы серодиагностики. Этиотропная терапия с использованием антибиотиков рекомендуется при тяжелых формах инфекции. Специфическая профилактика не разработана.

 

4.

Парамиксовирусы - это семейство РНК-овых вирусов. РНК однонитчатая (“минус-нить”), линейная, нефрагментированная. Тип симметрии нуклеокапсида спиральный. Нуклеокапсид покрыт суперкапсидной оболочкой, содержащей липиды. Чувствительны к эфиру. Размеры вириона 120-300 нм.   Вирус парагриппа имеет сферическую форму вириона с размерами 150- 200 нм. Геном вируса представлен минус-нитью РНК. Капсидная оболочка содержит матриксный М-белок, а суперкапсидная - N-, H- и F- белки и липиды клеточного происхождения.  Для его репродукции используют первичные и перевиваемые культуры тканей человека и обезьян. Вирус парагриппа высоко чувствителен к детергентам и дезинфектантам, разрушается при температуре 500 С, под действием эфира. Методы микробиологической диагностики парагриппа. В микробиологической диагностике парагриппа могут быть использованы вирусологическое, серологическое исследования, метод иммунноиндикации. Материалом для вирусологического исследования и иммуноиндикации являются носоглоточный и бронхиальный смывы, а при серологическом исследовании материалом от больного служат парные сыворотки. При вирусологическом исследовании производят заражение исследуемым материалом первичных и перевиваемых культур тканей человека с идентификацией вируса по ЦПД, гемадсорбции эритроцитов морских свинок (для разных серотипов гемагглютинирующая активность и ЦПД варьирует, но все обладает гемолитической активностью и способностью образовывать симпласты) и в РТГА. Для иммуноиндикации используют постановку реакций вирусонейтрализации, РТГА, РСК, РИФ, ИФА для обнаружения антигенов вирусов в носоглоточном смыве и соскобе эпителия слизистой дыхательного тракта. Вирус эпидемического паротита - типичный представитель парамиксовирусов по строению вириона и свойствам. Его однонитевая нефрагментированная “минус” РНК  Он может размножаться в курином эмбрионе, но при этом теряет свою  инфекционность, что используют для приготовления живых вакцин. Иммунитет стойкий, пожизненный. Дети первых трех месяцев жизни не восприимчивы к инфекции из-за циркуляции в крови материнских иммуноглобулинов класса G, передающихся плоду через плаценту в период

внутриутробного развития и обеспечивающих врожденный пассивный иммунитет. Он может сохраняться в течении 6 месяцев. Для микробиологической диагностики используют вирусологический, серологический (РТГА, РСК и др.) методы и иммуноиндикацию.__ Респираторно-синцитиальный вирус отличаются полиморфизмом вирионов с размерами 120-200 нм. Геном представлен “минус-нитью” нефрагментированной РНК, связанной с геномными белками-ферментами. Вирус не размножается в курином эмбрионе. Его культивируют в культурах тканей почек обезьян, где проявляется ЦПД в виде образования симпластов и синтиций.  РС-вирус разрушается под действием детергентов и эфира, при нагревании (550 С), при замораживании и последующем оттаивании. Иммунитет сохраняется в течение года, часты повторные заболевания. В микробиологической диагностике РС-вирусной инфекции используют различные методы, а материалом чаще служат носоглоточный, бронхиальный смывы, мокрота. При вирусоскопическом исследовании обнаруживают симпласты и синтиции в соскобах слизи, взятой при бронхоскопии. Вирус кори. Размеры вириона - 150-250 нм. Геном представлен “минус-нитью” однонитевой, нефрагментированной РНК, связанной с геномными белками P и L

(полимеразный комплекс, содержащий РНК-зависимую РНК -полимеразу).

иммунитет может быть создан как активный, так и пассивный.  Микробиологическая диагностика кори обычно не проводится, т.к. клиническая картина болезни столь очевидна, что не требует лабораторного подтверждения. Однако, при необходимости могут быть использованы вирусологическое, серологическое исследования и методы иммуноиндикации. При вирусологическом исследовании возможно заражение культур тканей кровью больного или носоглоточными смывами. При серологическом исследовании выявляют инфекционные антитела у больного в РСК, РТГА и других реакциях.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                            «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 8              1.IS-последовательности, транспозоны, интегроны, их роль в изменчивости бактерий.                      2.Трансплантационный иммунитет. Антигены гистосовместимости, их                  значение и методы определения. Методы подавления трансплантационного                 иммунитета.                       3.Пищевые токсикоинфекции. Возбудители. Лабораторная диагностика.      4.Ортомиксовирусы. Грипп. Возбудитель. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 8

1.

Транспозоны – участки ДНК, способные к перемещению внутри молекул и от одной к другой, могут быть переданы из клетки в клетку. IS-последовательности – фуклетидные последовательности, не кодирующие вырезку белка, а ответственные за выделение транспозонов в молекулу ДНК. Интегроны — генетические элементы, которые содержат в себе ген интегразы, специфический сайт и рядом с ним промотор, что придает им способность интегрировать в себя мобильные генные кассеты и экспрессировать присутствующие в них беспромоторные гены.

 

2.

 

Трансплантационный иммунитет — состояние повышенной иммунной реактивности организма, возникающее в ответ на пересадку органа или ткани, взятых от другой, генетически отличающейся особи. Реакции трансплантационною иммунитета тем сильнее, чем больше выражены генетические различия между донором и реципиентом.

При пересадках органов возникает проблема совместимости тканей, связанная со степенью их генетического родства, реакциями отторжения чужеродных аллогенных и ксеногенных трансплантатов, т.е. проблемами трансплантационного иммунитета. Существует ряд тканевых антигенов. Трансплантационные антигены во многом определяют индивидуальную антигенную специфичность организма. Сопокупность генов, определяющих синтез трансплантационных антигенов, получила название главной системы гистосовместимости. У людей она часто называется системой HLA (Human leucocyte antigens), в связи с четким представительством на лейкоцитах трансплантационных антигенов. Гены этой системы расположены на коротком плече хромосомы С6. Система HLA- это система сильных антигенов. Спектр молекул МНС уникален для организма, что определяет его биологическую индивидуальность и позволяет различать “чужое- несовместимое”.

Для подавления реакции отторжения трансплантата осуществляют подбор донора по антигенам МНС, а у реципиента подавляют иммунологическую реактивность иммунодепрессантами.

 

3.

Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются различные условно-патогенные бактерии: представители семейств Enterobacteriaceae (рода: Escherichia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter и др.), Vibrionaceae (рода: Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas), Bacillaceae (рода: Bacillus, Clostridium), Streptococcaceae (род Enterococcus). Патогенез пищевых токсикоинфекций обусловлен одновременным попаданием в организм и микробов, и их токсинов, накопившихся в пищевом продукте. Клинически они характеризуются симптомами гастроэнтерита и нарушением водно-солевого обмена. Пищевые токсикозы вызываются экзотоксином бактерий, который образовался и накопился при размножении возбудителя в пищевых продуктах, при этом самих бактерий в них может и не быть. Однако, следует признать, что это деление весьма условно. Микробиологическая диагностика основана на обнаружении экзотоксина в исследуемом материале методами иммуноиндикации и постановке биологической пробы на белых мышах (реакция токсиннейтрализации).

Для лечения используют антитоксическую противоботулинистическую  сыворотку.

 

4.

Семейство ортомиксовирусов - это РНК-овые вирусы со спиральным типом симметрии нуклеокапсида, имеющие суперкапсидную оболочку, содержащую липиды, в связи с чем они чувствительны к эфиру. Белки суперкапсидной оболочки имеют сродство к муцину. К этому семейству относится вирус гриппа. У него одноцепочечная фрагментированная РНК, состоящая из 8 фрагментов, что обуславливает дрейф генов и большую антигенную вариабельность вируса. РНК представлена “минус-нитью”, поэтому у вируса есть особый геномный белок - РНК- зависимая РНК полимераза, которая нужна для построения реплекативной формой РНК “плюс-нити”, выполняющей функцию и-РНК.  Форма вириона вариабельна, чаще сферическая (могут быть нитевые формы), размеры 80-120 нм. Капсидная оболочка построена из простых белков, способных к самосборке.  Вирус гриппа хорошо размножается в культурах тканей и курином эмбрионе (амниотической и аллонтоисной оболочках). Из культур тканей оптимальной для репродукции вируса является культура клеток почек эмбриона человека. Цитопатическое действие выражено слабо и не во всех культурах тканей.  Грипп - это острая респираторная вирусная инфекция, имеющая тенденции к распространению в человеческой популяции в виде эпидемий с характерной сезонностью и даже пандемий. Инкубационный период короткий - 1-2 суток. Возможны очень тяжелые формы гриппа (“токсические”) с развитием отека легкого при нарушении проницаемости сосудов под действием нейраминидазы.  Иммунитет переболевших вариантспецифический. Материалом для исследования чаще всего служит носоглоточный и бронхиальный смывы, иногда кровь, и могут быть использованы следующие методы: вирусологический - из исследуемого материала вирус выделяют при заражении куриного эмбриона и культуры ткани почек эмбрионов человека с последующей идентификацией в РТГА сероваров и в РСК типов вируса гриппа; иммуноиндикация - антигены вируса обнаруживают в исследуемом материале - носоглоточном, бронхиальном смывах - с помощью РТГА и ИФА или РИФ в мазках-отпечатках из эпителиальных клеток слизистой оболочки носоглотки; серологический - методом РТГА, РСК, ИФА определяют наличие инфекционных антител в парных сыворотках больного по нарастанию их титра. Иммунопрофилактика. Разработаны средства активной и пассивной иммунопрофилактики гриппа. Активная иммунопрофилактика проводится живыми, убитыми и химическими гриппозными вакцинами. Предпочтение отдают живым вакцинам, т.к. они активируют не только гуморальный, но и клеточный иммунный ответ,

синтез интерферона, а также обеспечивают развитие механизма вирусной интерференции.

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 9             1.Жгутики. Определение подвижности. Ворсинки и их типы.                      2. Противомикробная резистентность и  иммунитет. Механизмы                противомикробной резистентности.                    3.Листериоз; возбудитель, патогенез, клинические формы, микробиологическая  диагностика.          4.Аденовирусы. Их характеристика и роль в патологии человека.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 9

1.

Жгутики. На поверхности ряда бактерий располагаются жгутики. В их состав  входит белок флагеллин, который по своей структуре относится к сократимым белкам  типа миозина. Поэтому жгутики обеспечивают подвижность бактерий. Количество и  расположение жгутиков у разных бактерий неодинаково Монотрихи – имеют на  одном из полюсов клетки только один жгутик, лофотрихи – пучок жгутиков ,у  амфитрихихов жгутики расположены на обеих полюсах клетки, а у перетрихов – про  всей поверхности. Жгутики можно увидеть при специальных методах окраски при иммерсионной микроскопии или при электронной микроскопии. Чаще изучают не наличие самих жгутиков, а их функцию – подвижность. Подвижность можно наблюдать при фазово-контрастной микроскопии живых бактерий в препаратах “висячей” или раздавленной капли. Чаще подвижность оценивают косвенно по характеру роста в среде Пешкова (0,3% полужидком агаре с индикатором ТТХ). Посев производится уколом и через 24 часа инкубации в термостате подвижные культуры дают диффузный рост, а неподвижные – рост по уколу. Для оценки выраженной подвижности бактерий рода протел можно использовать посев по Шукевичу: посеянные в одной точке питательной среды эти бактерии покрывают всю поверхность питательной среды в чашке сплошным, роящимся налетом, а при посеве в каплю влаги на скошенном агаре “всползают” (ползучий рост) по поверхности скошенного агара.

 

2

 

 Противомикробная резистентность – сумма защитных приспособительных реакций организма для преодоления агрессивных свойств м/о.

Противомикробная резистентность (ПМР) – это одно из проявлений общей физиологической реактивности – способность макроорганизма отвечать на микробный агент. Наименьший уровень ПМР у новорожденных и пожилых людей. ПМР слагается из многочисленных тканевых и гуморальных механизмов..

 

 Все механизмы ПМР делятся на 2 группы:

1. Неспецифические защитные механизмы;

2. Специфические механизмы ПМР.

 

Эти 2 группы механизмов имеют принципиальное различие:

- Неспецифический механизм передается по наследству, специфический не наследуется;

- Если неспецифические механизмы отождествляют с врожденным иммунитетом, то специфические – с приобретенным.

 

3.

Листериоз — заболевание, вызываемое патогенными видами листерий . Листериоз считают типичным сапронозом, при этом первичным природным резервуаром листерий является почва, из которой они могут попадать в организмы растений. Источником заражения сельскохозяйственных животных являются корма, в частности, силос, где листерии размножаются. Заражение людей связано с употреблением в пищу овощей и продуктов животноводства. Известно, что листерия чувствительна к широкому спектру антибиотиков, за исключением новых цефалоспоринов и фосфомицина. Листерии чувствительны к производным пенициллина (особенно аминопенициллинам), большинству макролидов (кроме азитромицина и спирамицина), аминогликозидам, тетрациклина. Листерия — род грамположительных палочковидных бактерий,  представляют собой палочки с закруглёнными концами, иногда почти кокки, одиночные или в коротких цепочках, реже образуют длинные нити (0,4-0,5 х 0,5-2 мкм). Листерии ферментируют глюкозу, каталазоположительны, оксидазоотрицательны,образуют цитохромы. Не образуют споры и капсулы, факультативные анаэробы. Культура на твердой питательной среде имеет характерный запах творога. Листерии растут в виде мелких, беловатых с перламутровым оттенком, плоских, гладких блестящих колоний, на печеночном агаре колонии имеют слизистую консистенцию. В бульоне листерии вызывают небольшое помутнение среды с образованием слизистого осадка. На кровяном агаре вокруг колоний образуется узкая зона гемолиза.

Микробиологическая диагностика основана на идентификации выделенной из патологического материала (или на питательной среде или посредством биопробы) чистой культуры возбудителя. Обнаружение листерий в патологическом материале возможно также и с помощью ПЦР. В сыворотке крови определяют нарастание титра специфических антител. При низком титре последних ставят аллергическую пробу для выявления ГЗТ.

В качестве патологического материала при микробиологической диагностике листериоза используют кровь, ликвор, слизь из зева, пунктат увеличенных лимфатических узлов, околоплодные воды; у новорожденных – меконий, пупочную кровь, секционный материал. Идентификацию чистой культуры проводят по следующим признакам: состоит Антитела в сыворотке крови обнаруживают в РА, РНГА, РСК с использованием метода парных сывороток. У лиц со слабоположительными серологическими реакциями подтвердить диагноз помогает положительная кожно-аллергическая проба.

Специфическая профилактика листериоза не разработана. Антимикробная терапия листериоза (хороший эффект дает применение антибиотиков пенициллинового ряда) при беременности может предотвратить заражение плода или перинатальное заболевание и его последствия.

Для этиотропной терапии листериоза используют антибиотики и сульфаниламиды.

4.

Аденовирусы - это семейство ДНК-содержащих вирусов. ДНК линейная двунитчатая, тип симметрии нуклеокапсида кубический. Суперкапсидной оболочки нет, они устойчивы к действию эфира.. Размеры вириона 70-90 нм. У вируса есть гемагглютинин. Представлен особыми белковыми выростами капсида. По антигенам гемагглютинина различают много сероваров, но все аденовирусы человека имеют общий антиген капсидной оболочки. Аденовирусы размножаются в культурах тканей почек эмбрионов человека,. Вирус устойчив к действию физических и химических агентов, длительно сохраняется в окружающей среде при пониженных температурах, инактивируется УФ-лучами и при температуре более 560С. Источник инфекции - больные люди и вирусоносители, заражение от которых происходит воздушно-капельным путем при ОРВИ и возможен фекально-оральный путь передачи при ОКВИ аденовирусной этиологии. Чаще болеют дети от 6 месяцев до 2 лет. Иммунитет переболевших типоспецифический, повторные заболевания могут наблюдаться через 8-12 месяцевВ диагностике аденовирусных инфекций могут быть использованы вирусологическое и серологическое исследование, методы иммуноиндикации. При вирусологическом исследовании исследуемый материал определяется клинической формой инфекции (при ОРВИ - носоглоточный смыв, секрет конъюнктивы глаз, при ОКВИ – фекалии.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                            «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 10              1.Споры: значение, методы изучения. Некультивируемые формы бактерий; методы обнаружения.                      2.Определение понятия «антиген». Признаки антигенности. Свойства                антигенов.      3.Холера. Биология возбудителя. Факторы вирулентности. Лабораторная диагностика холеры. Специфическая профилактика.      4.Пикорнавирусы. Их биологическая характеристика и роль в патологии человека.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

Билет 10

1.

Спорообразование – очень сложный процесс в клетке. Происходит уплотнение и утолщение мембран. Они пропитываются солями дипикалината кальция. Одновременно клетка теряет значительную часть воды, а оставшаяся ее часть связывается клеточными структурами. Эти процессы происходят в неблагоприятных условиях и переводят клетку в состояние анабиоза. Спорообразующие бактерии относятся к семейству Bacillaceae, родам Clostridium и Bacillus. Выявить споры можно специальными методами окраски. Они основаны на том, что споры и вегетативная часть клетки окрашиваются при обработке концентрированными растворами краски при высокой температуре (первый этап окраски), при последующей обработке концентрированным раствором серной кислоты вегетативная часть клетки теряет окраску, а спора нет (второй этап окраски).  Методика окраски спор по Клейну.

Некультивируемыми (НФ) называют такие формы микроорганизмов, которые в ответ на действие неблагоприятных факторов прекращают рост на питательных средах, но сохраняют жизнеспособность, а при улучшений условий культивирования возобновляют пролиферацию. Некультивируемое состояние (НС) обнаружено у многих патогенных видов. для выявления НФ в организме или клиническом материале наиболее широко используются молекулярно-генетические методы: полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ее различные модификации, лигазная цепная реакция (ЛЦР), техника гибридизации тотальной клеточной РНК, ПЦР с обратной транскриптазой. Преимущество указанных методов является их высокая чувствительность и специфичность. Белки-шапероны, которые связываются с ДНК в процессе перехода в НС, могут препятствовать выявлению НФ в ПЦР. В водных объектах окружающей среды НФ можно обнаружить с помощью флуоресцирующих моноклональных антител (МКА), что позволяет определить видовую принадлежность бактерий, но неинформативно в отношении жизнеспособности клеток. Применение магнитных сорбентов повышает чувствительность метода, а использование набора специфических моноклональных антител к стабильным и лабильным эпитопам липополисахарида дает возможность судить о потенциальной жизнеспособности НФ. Перечисленные методы позволили выявить присутствие НФ патогенных бактерий в организме человека и животных в продуктах питания, в объектах окружающей среды: в воде в почве. Экспериментальные и гипотетические сведения об обнаружении НФ в

окружающей среде дополняют работы об индукторах НС и реверсии.

 

2.

Антиген- это вещ-ва или тела, несущие на себе отпечаток чужеродной генетической информации. Антигены делят на сильные (выраженный иммунный ответ), слабые.

Свойства, иммуногенность, антигенность- взаимодействие с продуктами иммунного ответа. Классификации антигенов.

Антигены классифицируются по происхождению (экзогенные и эндогенные), по природе (белковые и небелковые), по структуре (глобулярные и фибриллярные), по необходимости участия в иммунном ответе Т-хелперов (Т-зависимые и Т-независимые), по иммуногенности (иммуногены и гаптены), по степени чужеродности.

свойств у антигенов два: антигенность и иммуногенность.

А. Под антигенностью понимают способность антигена специфически реагировать с антителами или клетками, которые продуцируются на его введение в организм (человека или животного). Это свойство, как только что было указано, неотъемлемое, т.е. если антиген не обладает свойством антигенности, то он, строго говоря, не может быть рассматриваем как антиген.

Б. Под иммуногенностью понимают способность антигенов индуцировать специфический иммунный ответ, в результате чего продуцируются антитела или активируются иммунные лимфоциты. Это свойство, в отличие от антигенности, не присуще всем без исключения антигенам.

 

3.

V. cholerae – этот вид включает многочисленных представителей, которые внутри вида подразделяются на биохимические группы и на серогруппы. Морфологические свойства соответствуют характеристике семейства.  Культуральные свойства – не требовательны к питательным средам.  Отличительной биологической особенностью является галофильность (щелечелюбивость)  – основные элективные питательные среды – 1% щелочная пептонная вода и щелочной  агар. На этих средах другие микроорганизмы или не растут, или рост появляется  значительно позднее. На 1% ПВ рост V. сholerae рост появляется уже через 6 часов – они  аэробы, поэтому растут в виде пленки нежно-голубого цвета. На ЩА видимый рост  появляется через 12 часов – колонии средней величины, круглые, гладкие, выпуклые,  бесцветные с голубым оттенком.  Биохимические свойства – выражена ферментативная активность по отношению к  трем углеводам (манноза, сахароза, арабиноза), по отношению к которым все  представители вида делятся на 6 групп (триада Хейберга). Возбудитель холеры относится  к I группе по Хейбергу (манноза К+, сахароза К+, арабиноза -). К I группе по Хейбергу  относится не только возбудитель холеры, но и другие представители вида.  Антигенное строение. Имеют Н-антиген, который является общим у всех  представителей вида. По О-антигену все представители вида делятся на серогруппы  (более 150). Факторы вирулентности. Холерный вибрион обладает тропизмом к эпителиальным  клеткам тонкого кишечника.  1. наличие фактора колонизации CF, который кодируется плазмидой 2. продукция энтеротоксина (холероген), который состоит из фракций: LT

(термолабильная), которая стимулирует аденилатциклазу, и ST (термостабильная) –  стимулирует гуанилатциклазу, в результате чего нарушается энтеросорбция  3. эндотоксин – обеспечивает общетоксическое действие. Микробиологическая диагностика основана на бактериологическом исследовании, материал- фекалии и рвотные массы. Можно использовать методы иммуноиндикаии и молекулярно- генетические методики.

Назначают антибиотики. Для спец. Профил. Используют убитую холерную вакцину и комбинированную вакцину(холероген-анатоксин м О-антигена холерного вибриона).

 

4.

Вирусы семейства пикорнавирусов - это РНК-содержащие вирусы. РНК однонитевая, линейная, “плюс-нить”, выполняющая функцию и-РНК. Вирион имеет простое строение и представляет собой нуклеокапсид, т.е. РНК покрыта капсидной оболочкой, в которой капсомеры уложены по кубическому типу симметрии. Суперкапсидной оболочки нет, вирусы устойчивы к эфиру. Вирионы имеют форму многогранника. Размеры 20-30 нм. Вирус полиомиелита (полеовирус) является типичным представителем рода энтеровирусов. Строение его РНК и нуклеокапсида соответствует общей характеристике семейства пикорнавирусов. Капсидная оболочка состоит из 4 белков: 3 на внешней поверхности (VP1, VP2, VP3) и 1 на внутренней (VP4). Вирион имеет сферическую форму. Как и все энтеровирусы, вирус полиомиелита не размножается в курином эмбрионе, хорошо размножается как в первичных, так и перевиваемых культурах тканей (Hela, фибробластов человека). Репродукция вирусов в культурах тканей сопровождается цитопатическим действием и образованием вирусных включений. Вирус полиомиелита инактивируется при температуре 500-550С, чувствителен к УФ, высушиванию, хлорпроизводным дезинфектантам, но устойчив к действию детергентов, эфира и низким рН. Искусственный активный иммунитет создают вакцинацией. В микробиологической диагностике полиомиелита могут быть использованы вирусологическое, серологическое исследование и методы иммуноиндикации. Материалом для вирусологического исследования могут служить фекалии, кровь, спинно-мозговая жидкость. Производят заражение вирусодержащим материалом культур тканей, где индикацию вируса проводят по характерному цитопатическому действию, феномену бляшкообразования под агаром, а окончательную идентификацию в реакции вирусонейтрализации. В том же исследуемом материале антигены полеовируса можно обнаружить методами иммуноиндикации, используя РСК, ИФА, РИФ и другие реакции иммунитета. Серологическое исследование позволяет подтвердить диагноз на основании обнаружения нарастания титра антител в парных сыворотках больного.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65                Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 11              1. Антибиотики. Определение. Классификация антибиотиков. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам                      2.Антигены бактерий. Классификация по локализации и специфичности.      3.Лептоспирозы. Возбудитель. Лабораторная диагностика.      4.Полимиелит. Возбудитель. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 11

1.

 

 Антибиотики – это химические вещества биологической природы, обладающие способностью подавлять рост или вызывать гибель микроорганизмов.

Классификация:

I. По происхождению. Продуцентами антибиотиков могут быть:

- плесневые грибы (пенициллин)

-актиномицеты (из них получено большинство антибиотиков)

-типичные бактерии (грамицидин)

-продуценты антибиотиков животного происхождения (экмолин)

-антибиотики растительного происхождения (фитонциды)

II. По химическому строению:

 

III. По направленности действия:

- противопротозойные;

- противогрибковые;

- антибактериальные;

- противовирусные.

IV. По механизму действия.

 

Все антибиотики действуют на те или иные стороны метаболизма микроорганизмов; они никогда на нарушают уже готовые структуры бактерий.

1. Антибиотики – ингибиторы синтеза клеточной стенки, в частности ингибиторы синтеза пептидогликана муреина.

а) β – лактамные антибиотики

- пенициллины

- цефалоспорины

- монобактамы

- карбапенемы (имипенем, меропенем, эртапенем, дорипенем).

б) гликопептиды – действуют на другие этапы синтеза пептидогликана, чем β – лактамы:

- ванкомицин

- липогликопептид - телаванцин.

 

2. Антибиотики, подавляющие синтез белка.

- аминогликозиды, макролиды, линкозамиды, тетрациклины, хлорамфеникол, линезолид, тигециклин.

 

3. Антибиотики, нарушающие энергетические процессы на ЦПЭ.

- полимиксины, полиены.

 

4. Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот

V. По характеру действия:

Антибиотики оказывают либо бактериостатическое действие (способность подавлять рост и размножение бактерий), либо бактерицидное действие (способность вызвать гибель бактерий).

VI. По спектру действия:

-с узким спектром действия;

-с широким спектром действия.

 

Существуют 2

метода определения чувствительности бактерий к антибиотикам:

1. качественный – метод стандартных индикаторных дисков. Он по-

зволяет охарактеризовать культуру бактерий, выделенную от больно-

го, как устойчивую, умеренно устойчивую, умеренно чувствительную,

чувствительную или высоко чувствительную к тому или иному анти-

биотику.

 

Количественный – метод серийных разведений. Он позволяет коли-

чественно оценить уровень чувствительности изучаемой культуры

бактерий, т.к. определить минимальную ингибирующую концентра-

цию (МИК) данного антибиотика для данного штамма. Если МИК вы-

сока, то бактерии устойчивы к антибиотику, и его нельзя использовать

для лечения.

 

2.

Антигены бактерий: классификации по специфичности и по природе (происхождению).

Антигены бактерий классифицируются по специфичности (групповые – общие у нескольких видов, видовые – общие для одного вида, типовые – общие для одного серовара) и по природе (продукты распада – принадлежащие клеточным структурам бактериальной клетки, продукты жизнедеятельности бактериальной клетки).

 

Антигены, входящие в состав органелл бактериальной клетки.

В состав клеточных структур бактериальной клетки входят, например, следующие антигены: O-Ag (антиген клеточной стенки), К-Ag и Vi-Ag (антигены капсулы), Н-Ag (антиген жгутиков).

 

Антигены, продуцируемые микробной клеткой в процессе своего метаболизма.

К ним относятся белковые токсины, ферменты (в том числе – ферменты вирулентности).

 

Антигенные свойства грибов.

Антигенный состав грибов крайне гетерогенен, грибная клетка содержит многие десятки и даже сотни антигенов.

 

3.

Лептоспироз — острая инфекционная болезнь, вызываемая возбудителем из рода лептоспир. Характеризуется поражением капилляров, часто поражением печени, почек, мышц, явлениями интоксикации, сопровождается волнообразной лихорадкой. Диагностика.  Эпидемиологический анамнез (контакт с животными, купание в водоемах), выявление антител в парных сыворотках, кровь для посева на культуральные среды, моча (протеинурия, лейкоцитурия, эритроцитурия, цилиндрурия). Дифференцировать надо прежде всего с гепатитом. Основные различия: анамнез — при гепатите В гемотрансфузии, при лептоспирозе контакт с грызунами; преджелтушный период при гепатите есть, при лептоспирозе отсутствует; температура при гепатите до желтухи, а при лептоспирозе одновременно с желтухой; при гепатите нет болей в мышцах, билирубин при гепатите увеличен прямой, а при лептоспирозе оба.

4.

Полиомиелит – острое лихорадочное заболевание, которое иногда сопровождается поражением серого вещества спинного мозга и ствола головного мозга, в результате чего развиваются вялые параличи и парезы мышц ног, туловища, рук.

По структуре полиовирусы – типичные представители рода Enterovirus. Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3.

Для специфической профилактики полиомиелита используется несколько типов вакцин:

- убитые вакцины,

- живая вакцина.

Микробиологическая диагностика

1. Серодиагностика – антитела к HBS-антигену, к НВС-антигену (суммарные), к НВС-антигену IgM, к НВE-антигену IgG.

2. Иммуноиндикация – обнаружение антигенов HBS и НВС .

 

Специфическая профилактика – рекомбинантная вакцина.

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.6                 Форма обучения       очная                                                                                                                                              ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 12              1. Основные биологические свойства бактерий и методы их изучения.                      2.Классы иммунных глобулинов. Их характеристика. Схема строения                молекулы иммуноглобулина G. Полные и неполные антитела.           3.Группа риккетсий. Особенности биологии, методы культивирования. Классификация.      4.Рабдовирусы. Возбудитель бешенства. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 12

1.

Культуральные свойства бактерий - питательные потребности, условия роста и характер роста бактерий на бактериол. средах. В питательные потребности включают источники углерода, азота и ростовых факторов, способность бактерий расти на определенных питательных средах, в условия роста -рН,Eh, концентрацию О₂ плотность, осмотическое давление среды, температуру роста; в характер роста - скорость роста (быстрый, медленный), внешний вид к-ры на жидких, плотных и полужидких средах, изменения, к-рые наступают в среде или отдельных ее компонентах в процессе роста микробов.

2. № 60 Классы иммуноглобулинов, их характеристика. Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобиологическим свойствам разделяются на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Иммуноглобулин класса G. Изотип G составляет основную массу Ig сыворотки крови. На его долю приходится 70—80 % всех сывороточных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости. Среднее содержание IgG в сыворотке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Период полураспада IgG — 21 день. IgG — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (может одновременно связать 2 молекулы антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы Gl, G2, G3 и G4. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном иммунном ответе. Обладает высокой аффинностью. IgGl и IgG3 связывают комплемент, причем G3 активнее, чем Gl. IgG4, подобно IgE, обладает цитофильностью (тропностью, или сродством, к тучным клеткам и базофилам) и участвует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических реакциях IgG может проявлять себя как неполное антитело. Легко проходит через плацентарный барьер и обеспечивает гуморальный иммунитет новорожденного в первые 3—4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко путем диффузии. IgG обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществляет запуск комплемент-опосредованного цитолиза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.

3.

Риккетсии - это бактерии, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Риккетсии выделены в отдельный порядок Rickettsiales. Клетки риккетсий полиморфные (палочковидные, кокковидные, нитевидные), грамотрицательные. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Риккетсии относятся к медленно растущим организмам. Время генерации не менее 8-9 часов. Размножаются, подобно бактериям, простым поперечным делением или дроблением нитевидных форм. По типу дыхания - аэробы. У риккетсий имеются различные ферменты и им присущи многие обменные процессы. Однако в процессе эволюции они утратили некоторые энзимные системы, необходимые для синтеза отдельных жизненно важных биополимеров, и поэтому перешли к паразитическому образу жизни. Патогенные для человека риккетсии не способны размножаться на бесклеточных средах (исключение R.quintana). Для их культивирования применяют те же методы, что и для культивирования вирусов: заражение культуры тканей, культивирование в развивающихся куриных эмбрионах, организме экспериментальных животных или эктопаразитов. Риккетсии имеют два антигена - растворимый (группоспецифический) и корпускулярный (видоспецифический). Риккетсии образуют отдельный порядок Rickettsiales. Патогенные риккетсии образуют токсические вещества (природа которых окончательно не установлена). Они нестойки, легко разрушаются, обладают гемолитической активностью и вызывают парез кровеносных сосудов. Заболевания, вызываемые риккесиями, носят общее название риккетсиозов. Два из них - эпидемический сыпной тиф (возбудитель R.  prowazekii) и волынская лихорадка (возбудитель R. quintana) являются антропонозными инфекциями. Для большинства других риккетсий основным резервуаром являются грызуны и членистоногие. Риккетсиозы – трансмиссивные инфекции. Возбудитель передается человеку при укусе кровососущих членистоногих (вши, блохи, клещи). Лишь Ку-лихорадка (возбудитель C.burneti) передается алиментарным или воздушно-капельным путем, а естественным хозяином ее возбудителя является домашний скот. Большинство риккетсиозов относится к природно-очаговым инфекциям.

Об этом свидетельствуют и их названия - марсельская, волынская лихорадка, североазиатский риккетсиоз и др. Лишь сыпной тиф, один из наиболее тяжелых риккетсиозов, распространен повсеместно. Риккетсии поражают клетки ретикулоэндотелиальной системы и эндотелия сосудов. В основе патогенеза риккетсиозов лежит интоксикация и развитие характерных изменений в эндотелии артериол и капилляров в виде эндоваскулита. Как следствие возникают тромбозы, стазы и кровоизлияния в различных органах и тканях, в том числе ЦНС. Для клинике всех риккетсиозов характерными симптомами является выраженная интоксикация и геморрагии. Смерть наступает в результате развития острой сердечной недостаточности и Поражения ЦНС. Постинфекционный иммунитет - длительный, стойкий. Основным методом микробиологической диагностики риккетсиозов является серологическое исследование (РА, РПГА, РСК с соответствующими риккетсиозными диагностикумами). Выделение риккетсий возможно только в

специальных лабораториях строгого режима. Для этиотропной терапии используют антибиотики группы тетрациклина и хлорамфеникол (левомицетин). Менее эффективны антибиотики - макролиды. Специфическая профилактика разработана в отношении двух риккетсиозов: сыпного тифа и Ку-лихорадки. Она проводится по эпидпоказаниям живой или химической сыпнотифозной вакциной и живой вакциной из риккетсий Бернета.

 

4.

Семейство Rabdoviridae характеризуется широким кругом естественных хозяев среди позвоночных и беспозвоночных животных, простейших и растений, и только 2 представителя этого семейства патогенны для человека: вирус бешенства и вирус везикулярного стоматита. Но если везикулярный стоматит не представляет серьезной опасности для больного, то бешенство по-

прежнему остается одной из наиболее тяжелых болезней человека. Вирус бешенства является типичным представителем семейства рабдовирусов. Нуклеокапсид содержит одну “минус-нить” нефрагментированной РНК и геномные белки, в том числе и РНК-зависимую РНК-полимеразу. Нуклеопротеин является группоспецифическим антигеном вируса. Нуклеокапсид построен по спиральному типу симметрии и покрыт сверху липидосодержащей суперкапсидной оболочкой, что делает вирус чувствительным к эфиру. Суперкапсидная оболочка имеет шиповидные выросты из гликопротеидов, выполняющих функцию гемагглютининов и вариантспецифических антигенов, выявляемых в РТГА. Вирион имеет пулевидную форму. Вирус может размножаться в организме лабораторных животных, в культуре почек новорожденных хомячков или диплоидных клеток человека.  Иммунотерапия и иммунопрофилактика бешенства. Для спасения больного вводят живую антирабическую вакцину, содержащую ослабленный вирус, подкожно в переднюю стенку живота. Током крови вакцинный вирус быстро достигает чувствительные клетки головного мозга, где фиксируется на специфических рецепторах, не вызывая инфекцию или вызывая ее ослабленные варианты течения, опережая вирус-возбудитель. Когда инфекционный вирус достигает чувствительных клеток, их рецепторы оказываются блокированными вакцинным вирусом, что предотвращает развитие инфекции. Это явление вирусной интерференции. Вакцина также стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета и синтез интерферона. Своевременное введение вакцины - единственное средство специфической терапии бешенства. Методы микробиологической диагностики бешенства. В целях микробиологического подтверждения диагноза используют методы иммуноиндикации (РИФ по обнаружению вирусного антигена в слоне или в посмертном материале), биопробу на белых мышах, а также для посмертной диагностики вирусоскопическое исследование.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                              Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                                                              ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 13              1.Микроорганизмы с дефектной клеточной стенкой. Протопласты, сферопласты. L-формы бактерий; роль в патологии человека.                      2.Сыворотки антимикробные и антитоксические. Получение. Практическое                применение.                     3.Патогенные спирохеты. Классификация. Особенности биологии. Роль в патологии человека. Сифилис. Возбудитель. Лабораторная диагностика.      4.Методы генетического анализа. ПЦР.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 13

1.

Из любой бактериальной клетки можно получить форму, полностью или частично лишенную клеточной стенки Они называются соответственно, протопласты  и сферопласты. Весьма существенным является то, что под воздействием химиопрепаратов и других факторов. Нарушающих формирование клеточной стенки,  они могут образовываться в организме больного, но при этом бактерии сохраняют  способность взаимодействовать с организмом больного. Кроме того существуют, так  называемые L – формы бактерий, которые в отличии от протопластов и  сферопластов способные к размножению - это сферические образования разных  размеров. Существуют стабильные L – формы, не способные реверсировать в  исходный морфотип и нестабильные L – формы, реверсирующие в исходный тип при  устранении причин, вызывающих их образование. В процессе реверсии  восстанавливается способность бактерий синтезировать пептидоглика – муреин  клеточной стенки. L – формы различных бактерий играют существенную роль в  патогенезе многих хронических рецедивирующих заболеваний (бруцеллез,  туберкулез, сифилис, хр. гонорея).

 

2. Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител. 1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины. 2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша. 3.Противовирусныесыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела. Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации животных (лошади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с последующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной сыворотки. Иммунные сыворотки, полученные от животных, называют гетерогенными, так как они содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Для получения гомологичных нечужеродных иммунных сывороток используют сыворотки переболевших людей (коревая, оспенная сыворотки) или специально иммунизированных людей-доноров (противостолбнячная, противоботулиническая), содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного заболевания. Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины. Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами. Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для лечения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета

3.

Спирохеты — порядок бактерий с длинными (3—500 мкм) и тонкими (0,1—1,5 мкм) спирально закрученными клетками. Грамотрицательны, хемоорганогетеротрофы. Подвижны, размножаются поперечным делением. Эндоспор не образуют. Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные и факультативно-анаэробные. Спирохеты встречаются в почве, воде, других организмах. Сифилис - одна из классических венерических болезней. Возбудитель - Treponema pallidum (бледная трепонема). Она имеет форму правильной спирали размером до 15 мкм, с 8-12 крутыми глубокими равномерными завитками, концы заострены. Из многих антигенов возбудителя наиболее изучены три: липополисахаридный кардиолипин, белковый и нуклеопротеиновый. Treponema pallidum очень требовательны к питательным средам и на обычных средах не растут. Для их культивирования используют сложные среды, содержащие почечную и мозговую ткань. Посевы культивируют в строго анаэробных условиях при температуре 350С. При нагревании до 600С возбудитель быстро погибает. Под действием пенициллина переходит в L-формы. Для сифилиса характерно волнообразное течение. Выделяют первичный, вторичный и третичный периоды болезни. Первичный период начинается с появления на месте внедрения возбудителя (слизистая половых органов, анальное отверстие, полость рта) первичной сифиломы (твердого шанкра). Его продолжительность 45-50 дней. Он делится на: серонегативный (2-3 недели) и сменяющий его серопозитивный (в крови появляются антитела). Вторичный период развивается при отсутствии лечения, как результат генерализации инфекции. Он может продолжаться 3-4 года. Третичный период. Для него характерно образование грубых поражений кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов, костей. Методы микробиологической диагностики. Основными методами микробиологической диагностики сифилиса являются: • бактериоскопический; • серологический. Бактериоскопическое исследование. Оно является одним из основных методов диагностики при первичном сифилисе. Исследуют материал из первичной сифиломы, пунктат лимфатических узлов. Из него готовят мазки, окрашивают их по Романовскому- Гимза и микроскопируют. Используют и темнопольную микроскопию неокрашенных мазков. Серологическое исследование. Оно становится возможным с 3-4 недели заболевания и является основным методом диагностики сифилиса. Антитела выявляют в осадочных тестах (на основе реакции преципитации), РСК и реакций с мечеными антиглобулиновыми сыворотками. В серологической диагностике сифилиса используются две группы стандартных антигенных препаратов, нетрепонемные и трепонемные. Первые (кардиолипин бычьего сердца) имеют лишь сходство с антигенами возбудителя сифилиса, вторые являются либо стандартными штаммами Treponema pallidum, либо их ультразвуковым дезинтегратом. С кардиолипиновыми антигенами ставят осадочную микрореакцию преципитации (МР), р.Кана (флокуляционный тест) и РСК, с трепонемными - РСК и реакцию иммобилизации трепонем. Оценка результатов реакции качественная, по системе + + + +. В настоящее время в серодиагностике сифилиса широко используются иммунолюминисцентные и иммуноферментные методики, для реализации которых предложен ряд коммерческих тест систем.

 

4. Основным способом генетического анализа считают метод молекулярной гибридизации. Сущность способа заключается во взаимодействии комплементарных цепей ДНК или РНК, в результате которого образуются двунитчатые структуры. Гибридизация может осуществляться между комплементарными молекулами ДНК и ДНК, ДНК и РНК, РНК и РНК. Гибридизация осуществляют поэтапно. Сначала деспирализуют генетический материал с целью получения одноцепочных структур, затем адсорбируют его на нитроцеллюлозной мембране. Следующим этапом является обработка материала зондом, который представляет собой короткую последовательность нуклеиновой кислоты, комплементарной исследуемой кислоте и меченную радиоактивным фосфором. После обработки материала зондом, исследуемые пробы помещают в специальный счетчик. Искомую последовательность нуклеиновой кислоты в материале определяют по степени радиоактивности пробы. Метод высокочувствителен, т. к. позволяет выявить до 10^-10 г. нуклеиновой кислоты в 1 г. материала.

В начале 80-х годов К. Мюллисом был разработан способ под названием полимеразная цепная реакция (ПЦР). Суть этого метода сводится к следующему. Исследуемый материал нагревают до 90-100 єС, что приводит к раскручиванию 2-х цепочной ДНК на отдельные цепи. После расхождения цепей ДНК, к ним добавляют набор всех пуриновых и пиримидиновых оснований, праймеры и термостабильную ДНК, комплементарные той нуклеиновой кислоте, которую амплифицируют (накапливают). Затем смесь ДНК и праймеров охлаждают. При этом праймеры при наличии в смеси ДНК искомого гена связываются с его комплементарными участками. В результате синтезируются две копии гена. После этого цикл повторяют снова и снова. При каждом повторе цикла количество ДНК гена будет увеличиваться в 2 раза. Для проведения реакции необходимы специальные приборы – амплификаторы.

Этот метод позволяет обнаружить 100 молекул ДНК или РНК в 1 г. исследуемого материала, т. е. является самым высокочувствительным методом из всех известных в настоящее время.

ПЦР применяют для диагностики вирусных и бактериальных инфекций, анализ рекомбинаций фагов

Естественно, что гибридизация фагов, происходящая в период их внутриклеточного размножения, не может быть обнаружена, если клетка заражается фаговыми частицами одного генотипа. Не обнаруживается она и при смешанном заражении мутантом и нормальным фагом, так как гибридизация может быть выявлена лишь по рекомбинации признаков фагов двух генотипов. Накопление различных мутантных линий фагов оказалось необходимой предпосылкой проведения гибридизационной работы с фагами.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                            «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                                                                      ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 14              1.Бактериологическое исследование, его этапы. Принципы внутривидовой дифференциации бактерий.                      2.Иммунный ответ. Его типы. Клеточные кооперации. Роль макрофагов в                образовании антител.                     3.Чума. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Лечение. Профилактика.      4.Безусловные и условные латентные вирусные инфекции и механизм их развития.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Билет 14

1.

Выделение чистой культуры лежит в основе бактериологического исследования – важнейшего метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Цель его – выделение чистой культуры и ее идентификация, что позволяет правильно поставить диагноз инфекционного заболевания. ЭТАПЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ. 1. Первичная микроскопия исследуемого материала (необязательный этап). 2. Первичный посев с целью выделения чистой культуры. 3. Накопление чистой культуры. 4. Изучение биологических свойств выделенной чистой культуры и ее окончательная идентификация.

 

2.

иммунный ответ - это совокупность процессов, происходящих в иммунной системе в ответ на введение антигена. Клетки, участвующие в иммунном ответе (Т- и В-лимфоциты и макрофаги), называются иммунокомпетентными.

 

Иммунный ответ может быть:

первичным (при первой встрече с антигеном),

вторичным (при повторной встрече с антигеном).

 

При этом выраженность первичного иммунного ответа достигает максимума к 7-8-му дню, сохраняется в течение 2 недель, а затем снижается. Вторичный иммунный ответ развивается быстрее и достигает большей (в 3-4 раза) интенсивности. 

 

По типу взаимодействия клеток и образовавшихся клеток-эффекторов (по конечному результату) принято различать три типа иммунного ответа:

 

гуморальный иммунный ответ,

клеточный иммунный ответ,

иммунологическую толерантность.

 

3.

Возбудитель чумы относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia, виду Y.pestis. Возбудитель чумы - полиморфные, мелкие, овоидные палочки. Они неподвижны, аспорогенны, в организме образуют капсулу. Грамотрицательные, окрашиваются биполярно. Факультативные анаэробы, психрофиллы, температурный оптимум 28⁰С. Хорошо растут на простых питательных средах. На плотных питательных средах уже через 12 часов формируются шероховатые (R-формы) колонии. Авирулентные штаммы образуют гладкие (S-формы) колонии. На жидких средах Y.pestis дает поверхностную пленку со спускающимися нитями. Биохимическая активность невелика. Носителями возбудителя являются дикие грызуны, а переносчиками - блохи. Природные очаги чумы занимают 6-7 % территории суши земного шара и выявлены на всех континентах. Заражение человека чаще всего происходит при укусе инфицированными блохами, контакте с больными, погибшими от чумы грызунами, а также при забое и разделке больных чумой верблюдов. Чума может передаваться и от человека человеку как антропонозное заболевание. Чума характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением лимфатической системы, септицемией. В зависимости от пути проникновения возбудителя в организм человека чума протекает в виде различных клинических форм: кожной, бубонной, первично-септической и легочной. После перенесенного заболевания вырабатывается стойкий и длительный иммунитет, обусловленный, преимущественно, фагоцитарной активностью клеток макрофагальной системы. Этиотропная терапия проводится антибиотиками, предпочтение отдается аминогликозидам. С целью специфической профилактики применяют живую вакцину. После вакцинации иммунитет сохраняется около года. Материал для исследования определяется клинической формой заболевания (пунктат бубона, мокрота, кровь). Как указывалось выше, микробиологическая диагностика чумы проводится только в специализированных лабораториях и предусматривает первичную бактериоскопию, выделение возбудителя или обнаружение его антигенов. Используются и методы серологической диагностики.

 

4.

Взаимодействие вируса с клеткой - это сложный процесс, результаты которого могут быть различны. По этому признаку (конечный результат) можно выделить 4 типа взаимодействия вирусов и клеток. Латентная вирусная инфекция. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором происходит репродукция вирусов, но клетка не погибает, а сохраняет свою жизнеспособность. В ней происходит синтез и вирусных, и клеточных компонентов, при этом клеточные синтезы преобладают, и поэтому клетка достаточно длительно сохраняет свои функции. Этот механизм лежит в основе безусловных латентных вирусных инфекций.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 15          1. Нормальная микрофлора человека. Строение, функции.       2.Фазы образования антител и их характеристика. Специфичность антител. Их классификация по признаку специфичности. Моноклональные антитела.      3.Стафилококки, их роль в патологии. Факторы патогенности стафилококков и методы их изучения. Принципы специфической терапии и профилактики.      4.Герпес-вирусы. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

Билет 15

1.

Нормальная микрофлора сопутствует своему хозяину на протяжении всей его  жизни. С современных позиций ее следует рассматривать как совокупность множества  микробиоценозов, характеризующихся определенным видовым составом и занимающих  тот или иной биотоп в организме. В любом микробиоценозе следует различать постоянно  встречающиеся виды микроорганизмов - характерные (индигенная, автохтонная флора),  добавочные и случайные - транзиторные (аллохтонная флора). Количество характерных  видов относительно невелико, но численно они всегда представлены наиболее обильно.  Видовой состав транзиторных микроорганизмов разнообразен, но они немногочисленны.  Количество бактерий, населяющих покровные ткани (кожу, слизистые оболочки) во много  раз превосходи! число собственных клеток хозяина. Формирование нормальной микрофлоры ребенка начинается уже при прохождении плода  через родовые пути матери.  Польза от резидентных бактерий сводится прежде всего к защите от экзогенной инфекции  и контролю за собственным микробным гомеостазом. Обеспечение колонизационной  резистентности - одна из важнейших функций нормальной микрофлоры. Способность  нормальной микрофлоры защищать поверхность слизистых оболочек и кожи от  патогенных бактерий - мощный механизм противомикробной резистентности.  Нормальная микрофлора является мощным иммуномодулятором. Она способствует  созреванию иммунной системы. На гнотобионтах было установлено, что у безмикробных  организмов недоразвиты лимфоидные органы, снижено число лимфоцитов и  плазматических клеток, изменена фагоцитарная активность. Имеет место  гипогаммаглобулинемия и низкий уровень нормальных антител. Нормальная микрофлора  поддерживает иммунокомпетентные клетки в состоянии "постоянной готовности"  праймирования (субактивации), что обеспечивает более быстрый и эффективный ответ на  инфекцию.  Нормальная микрофлора толстого кишечника принимает активное участие в различных метаболических процессах (обмен холестерина, стероидных гормонов, липидном обмене)  за счет продукции большого количества ферментов, а также образования метаболитов при  микробной трансформации субстратов эндогенного и экзогенного происхождения. При  этом исходный субстрат через каскад биохимических реакций превращается либо в  промежуточный, либо в конечный продукт катаболизма.3 Нормальная микрофлора - неограниченный банк генетического материала. Между  представителями нормальной микрофлоры постоянно происходит обмен генетического  материала, а также его передача патогенным видам, попадающим в ту или иную  экологическую нишу.  Нормальная микрофлора обладает детоксикационными свойствами как в отношении  организмов, попавших из внешней среды, так и в отношении образующихся токсических  продуктов метаболизма, путем их биосорбции или трансформации в нетоксичные  продукты.  Нормальная микрофлора участвует в регуляции газового, водно-солевого обмена,  поддержании рН среды.  Бактерии толстого кишечника синтезируют витамины, в том числе биотин, рибофлавин,  пантотеновую кислоту, витамины К, Е, В12, фолиевую кислоту. Однако витамины не  всасываются в толстом кишечнике и поэтому можно рассчитывать только на те из них,  которые в небольшом количестве образуются в подвздошной кишке.

 

2.

В образовании антител различают четыре фазы:

 

1. Фаза покоя (лаг-фаза, фаза индукции) - с момента поступления антигена в организм до появления антител. Продолжительность этой фазы - от нескольких дней до 1 мес., в зависимости от свойств антигена, его дозы, способа введения в организм, возраста животного и др. В этот период происходит пролиферация и дифференцировка лимфоидных клеток в направлении синтеза иммуноглобулина класса М.

 

2. Фаза нарастания титров антител (лог-фаза, продуктивная фаза) - от появления антител до момента достижения их максимального количества. Длительность этой фазы - 2-15 дней. В этой фазе антитела освобождаются из плазмоцитов и поступают в кровяное русло. Уменьшается число клеток, синтезирующих IgM, начинает нарастать продукция IgG. Впоследствии появляются IgA, а также JgE, JgD.

 

3. Фаза стабилизации, в которой уровень антител (или их титр) остается неизменным обычно в течение нескольких дней или недель. Ее длительность зависит от вида животного, характера антигенов и класса продуцируемых антител (иммуноглобулины имеют разный период полураспада).

 

4. Фаза снижения продукции антител. Продолжительность этой фазы различна и зависит от сохранения антигена в тканях, который является индуктором образования антител. Этому способствует, например, введение антигена с адъювантом, который создает депо, из которого АГ медленно поступает в организм, обеспечивая длительную антигенную стимуляцию. Снижение титра антител в результате начинается спустя несколько недель или месяцев. Способность к длительному образованию антител и в высоких титрах можно поддерживать путем повторных введений антигена на протяжении длительного времени.

 

При повторном попадании антигена через несколько недель или месяцев динамика иммунного ответа изменяется (информация об антигене хранится в генетическом аппарате лимфоцитов иммунной памяти). Латентный период и период нарастания титра антител становятся короче. Титры антител достигают максимума быстрее и сохраняются на высоком уровне дольше, повышается аффинитет антител. При вторичном ответе сразу синтезируются антитела класса G.

 

Каждое антитело специфично для определенного антигена; это связано с уникальной структурной организацией аминокислот в вариабельных участках его легких и тяжелых цепочек. Аминокислотная организация имеет разную пространственную конфигурацию для каждой антигенной специфичности, поэтому когда антиген вступает в контакт с антителом, многочисленные простетические группы антигена как зеркальное изображение соответствуют таким же группам антитела, благодаря чему между антителом и антигеном осуществляется быстрое и плотное связывание. Если антитело высокоспецифично и имеется много мест связи, происходит мощное сцепление между антителом и антигеном посредством: (1) гидрофобных связей; (2) водородных связей; (3) ионного притягивания; (4) ван-дер-вааль-совых сил. Комплекс антиген-антитело также подчиняется термодинамическому закону действия масс.

 

3.

Стафилококки - кокки правильной круглой формы, в мазках обычно располагаются  ассиметричными скоплениями (“гроздья винограда”) или беспорядочно. Спор не образуют, неподвижны. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Не требовательны к питательным средам. На плотных средах образуют гладкие, круглые, выпуклые колонии. Колонии окрашены за счет нерастворимого в воде

пигмента в различные оттенки желтого или белого цвета. На жидких средах при росте дают равномерное помутнение. Особенностью стафилококков является их способность расти на средах с высоким (до 15%) содержанием NaCl. Это используется при создании элективных питательных сред для их выделения. Стафилококки - метаболически активные микроорганизмы. Ферментируют многие углеводы, обладают протеолитической активностью. На основании различий биохимической активности все представители рода Staphylococcus делятся на более чем три десятка видов. Основную роль в патологии человека играют S.aureus, S.epidermidis, S.saprophyticus. Стафилококки имеют сложное антигенное строение. У них обнаружено свыше 50 различных антигенов. Они отличаются как по строению, так и по локализации. По локализации различают: − экстрацеллюлярные антигены - это антигены микрокапсулы и белковые антигены экзотоксинов и экзоферментов; − целлюлярные антигены - глубокие и поверхностные антигены клеточной стенки (тейхоевые кислоты, пептидогликан, белок А и другие поверхностные белки). Белок А способен прочно связываться с Fс-фрагментом молекул Ig G (в меньшей степени Ig M, Ig A), при этом Fab-фрагменты остаются свободными. Это свойство белка А используется при приготовлении антительных реагентов для реакции коагглютинации. С другой стороны, белок А является одной из причин того, что стафилококковые инфекции часто сопровождаются развитием

вторичного иммунодефицита. По специфичности антигены стафилококков подразделяют на родовые, видовые, типоспецифические и перекрестно-реагирующие - общие с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека. Стафилококки - условно-патогенные микроорганизмы. Способность отдельных штаммов вызывать те или иные формы стафилококковой инфекции во многом определяется их способностью продуцировать тот или иной набор токсинов и ферментов агрессии и защиты. Токсины стафилококков. Стафилококки продуцируют комплекс секретируемых экзотоксинов. Это мемброноповреждающие токсины - α, β, δ и γ-гемотоксины. Повреждая мембраны, каждый из этих токсинов разрушает эритроциты, лейкоциты, макрофаги и другие клетки. Кроме того, стафилококки могут образовывать энтеротоксины (такие штаммы вызывают кишечные формы стафилококковой инфекции), эксфолиативный токсин (обуславливает клинику пузырчатки новорожденных), лейкоцидин. α-гемотоксин, энтеротоксины А и В вызывают развитие синдрома токсического шока. Ферменты агрессии и защиты. Это многочисленная группа секретируемых белков-ферментов. Они обеспечивают распространение стафилококков по тканям и органам и защищают их от действия антимикробных механизмов организма. Это плазмокоагулаза, гиалуронидаза, фибринолизин, лецитиназа, протеаза, ДНК-азы и др.  Основным методом микробиологической диагностики стафилококковых инфекций является бактериологическое исследование. Материал для него определяется ее клиническими проявлениями. В ходе бактериологического исследования помимо видовой идентификации возбудителя определяют продукцию выделенным штаммом факторов вирулентности. При внутрибольничной стафилококковой инфекции проводят фаготипирование выделенных штаммов Staphylococcus aureus. Для этиотропной терапии острых форм стафилококковой инфекции используют антибиотики, стафилококковую плазму или γ-глобулин, поливалентные стафилококковые фаги, в лечении хронических форм - анатоксин, аутовакцины. Для специфической профилактики стафилококковой инфекции можно применять стафилококковый анатоксин.

 

4.

Вирусы семейства Herpesviridae занимают важное место в инфекционной патологии человека.

Вирионы герпес-вирусов имеют сферическую форму, их размеры от 140 до 210 нм. Геном представлен двунитевой линейной ДНК. ДНК состоит из двух ковалентно связанных фрагментов разной длины и содержащих разные нуклеотидные последовательности, но на концах имеются повторы. Нуклеокапсид построен по кубическому типу симметрии и окружен суперкапсидной оболочкой, содержащей липиды, что делает вирусы чувствительными к эфиру. Среди белков суперкапсидной оболочки есть гемагглютинины. Антигенами вирусов прежде всего являются гликопротеиды суперкапсидной оболочки (вариантспецифические антигены) и белки нуклеокапсида (группоспецифические антигены). Вирусы размножаются в различных культурах тканей с образованием ядерных включений и куриных эмбрионах. Вирусы герпеса характеризуются полиорганным тропизмом. Они могут вызывать не только острые, клинически выраженные формы, но и развитие бессимптомных, латентных форм инфекции. Герпес-вирусы проникают в чувствительные клетки путем эндоцитоза, утрачивая свою суперкапсидную оболочку. Методы микробиологической диагностики. Исследуемым материалом служит содержимое герпетических визикул. При вирусоскопическом исследовании в этом материале обнаруживают гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями. Этот же материал используют для заражения культур тканей, куриных эмбрионов при вирусологическом исследовании. В хорионаллантоисной оболочке эти вирусы образуют бляшки. Идентифицируют вирусы в реакции вирусонейтрализации. В содержимом герпетических везикул выявляют антигены вирусов герпеса методом иммуноиндикации, используя РСК и ИФА. С помощью этих же реакций в ходе серологического исследования обнаруживают инфекционные антитела в парных сыворотках больного.

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                  Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 16             1.Особенности метаболизма у бактерий. Конститутивные и индуцибельные ферменты бактерий. Автоматическая регуляция синтеза ферментов.                      2. Практическое применение учения об иммунитете      3.Возбудители анаэробной клостридиальной раневой инфекции. Их характеристика. Лабораторная диагностика.      4. Возбудитель амебиаза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

 

1.Понятие о метаболизме. Анаболизм и катаболизм. Особенности метаболизма у бактерий. Методы изучения метаболизма бактерий.

Метаболизм бактерий представляет собой совокупность двух противоположных, но взаимосвязанных процессов - катаболизма и анаболизма. Катаболизм (диссимиляция) - распад веществ в процессе ферментативных реакций и накопление выделяемой при этом энергии в молекулах АТФ. Анаболизм (ассимиляция) - синтез веществ с затратой энергии. Изучают метаболизм бактерий с помощью биохимических и физико- химических методов исследования в процессе культивирования бактерий в определенных условиях на питательных средах, содержащих определенные субстраты. Особенности метаболизма у бактерий. 1) Процессы диссимиляции преобладают над процессами ассимиляции; 2)Высокая интенсивность процессов метаболизма, обусловленная тем, что соотношение поверхности к единице массы больше, чем у многоклеточных; 3)Субстратный спектр потребляемых бактериями веществ очень широк – от углекислого газа, азота, нитритов, нитратов до органических соединений, включая антропогенные вещества - загрязнители окружающей среды (обеспечивая тем самым ее самоочищение). 4)Бактерии имеют очень широкий набор ферментов - это также способствует высокой интенсивности метаболических процессов.

методы изучения

Изучают метаболизм бактерий с помощью биохимических и физико-химических  методов исследования в процессе культивирования бактерий в определенных  условиях на питательных средах, определенные субстраты.

Конститутивные и индуцибельные ферменты бактерий. Автоматическая регуляция синтеза ферментов.

Экзоферменты - ферменты бактерий, выделяемые во внешнюю среду и действующие на субстрат вне клетки (например, протеазы, полисахаридазы, олигосахаридазы) и Эндоферменты - ферменты бактерий, действующие на субстраты внутри клетки (например, ферменты, расщепляющие аминокислоты, моносахара, синтетазы). Синтез ферментов генетически детерминирован, но регуляция их синтеза идет за счет прямой и обратной связи, т.е. для одних - репрессируется, а для других - инициируется субстратом. Ферменты, синтез которых зависит от наличия соответствующего субстрата в среде (например, β-галактозидаза, β-лактамаза), называются индуцибельными. Другая группа ферментов, синтез которых не зависит от наличия субстрата в среде называетсяконститутивными (например, ферменты гликолиза). Их синтез имеет место всегда, и они всегда содержатся в микробных клетках в определенных концентрациях.

 

2.Практическое значение иммунитета

На учении об иммунитете базируются:

• специфическая диагностика
• профилактика и терапия инфекционных болезней животных, являющихся важным звеном в общем комплексе противоэпизоотических мероприятий 

Искусственная иммунизация - по существу направленное изменение защитных сил организма, создание в нём новых полезных свойств устойчивости. Основа специфической диагностики - серодиагностика, построена на принципе строгой специфичности соединения антигена и антитела. 

При помощи заведомо известного антитела можно обнаружить искомый антиген и, наоборот, с помощью антигена найти соответствующее ему антитело. С помощью типоспецифических диагностических сывороток удаётся установить тип изучаемого возбудителя (эшерихии, сальмонеллы, лептоспиры и другие).

Типирование циркулирующего возбудителя важно для иммунологического анализа эпизоотического процесса и отбора соответствующего его типу иммунного препарата. В ветеринарно-санитарной экспертизе серологическими методами определяют в мясных продуктах (колбаса и другие) примесь мяса определённых видов животных. 

Широко применяется в ветеринарии аллергическая диагностика (бруцеллёз, туберкулёз и другие).

3.)Возбудители анаэробной клостридиальной раневой инфекции. Их характеристика.

Возбудители анаэробной инфекции по способности к спорообразованию делятся на две большие группы: спорообразующие (клостридии) и неспорообразующие (неклостридиальные анаэробы).  Эти бактерии относятся к семейству Bacillaceae. Клостридии - это палочки средней величины или крупные, с закругленными, прямыми или заостренными концами, полиморфны. В мазках располагаются попарно или короткими цепочками. Большинство видов подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков. Образуют овальные или сферические эндоспоры, диаметр которых превышает ширину клеток. Отдельные виды (C.perfringens) образуют капсулу. Грамположительны. Облигатные анаэробы. Обладают сахаролитической и протеолитической активностью. Обитают в кишечном тракте млекопитающих, птиц и человека, откуда попадают в окружающую природную среду. Патогенные виды образуют сильные экзотоксины. Род Clostridium включает до 100 видов, из которых патогенными для человека являются возбудители газовой гангрены, столбняка и ботулизма.

4.Вирусы Коксаки выделены от больных с полиомиелитоподобными

заболеваниями. Они отличаются от вируса полиомиелита антигенными и

некоторыми другими биологическими свойствами.

По способности вызывать вялые и спастические параличи у лабораторных

животных различают вирус Коксаки А и вирус Коксаки В, причем у первого 24,

а у второго 6 сероваров. Некоторые серовары обладают гемагглютинирующей

активностью, в том числе и холодовой гемагглютинацией. Некоторые серовары

вируса Коксаки А не культивируются в культурах тканей.

Клинические формы Коксаки-инфекции разнообразны. Вирусы Коксаки А

обладают миотропностью, и для клинических проявлений вызываемой ими

инфекций характерны лихорадка, менингеальные явления, “герпетические”

ангины, перикардиты. Вирус Коксаки Вв силу своей нейротропности вызывает

энцефаломиелиты, менингиты, полиомиелитоподобные заболевания, обладая

кардиотропизмом, вызывает миокардиты. Специфическим для него является

поражение сердца с развитием некроза и аневризмы. Так же эти вирусы могут

вызывать ОКВИ и ОРВИ у детей. Иммунитет напряженный

вариантспецифический.

Специфической профилактики нет.

Вирусы ЕСНО антигенно отличны от вирусов полиомиелита и Коксаки.

Различают 31 серовар этих вирусов. Большинство из них обладают

гемагглютинирующей активностью, непатогенны для белых мышей, а вкультуре ткани дают выраженное цитопатическое действие.

Вирусы ЕСНО в основном вызывают кишечные инфекции у детей, но

может быть клиника и более тяжелых полимиелитоподобных заболеваний.

Принципы микробиологической диагностики инфекций Коксаки ЕСНО те же, что и при полиомиелите.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65                Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 17             1.Типы питания бактерий. Классификация бактерий по источникам углерода и азота. Механизмы питания бактерий.                      2.Имунная система, как орган иммуногенеза. Центральные и периферические               органы иммунной системы. Т- и В-лимфоциты. Их характеристика, методы               подсчета.                     3.Кампилобактериоз. Биология возбудителя. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика. Хеликобактериоз. Микробиологическая диагностика.      4. Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1.Типы питания бактерий. Классификация бактерий по источникам углерода и азота.

Питание бактерий - процесс потребления различных органических и минеральных  соединений, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов. Бактериальная  клетка не имеет специальных органов питания - является голофитной по способу  потребления питательных веществ.  По способу питания бактерии делятся на: Автотрофы – синтезируют все углеводсодержащие компоненты клетки из СО2 как  единственного источника углерода. Гетеротрофы – организмы, которые не могут  удовлетворять свои потребности в углероде только за счет СО , а также требует для своего  питания готовые органичесике соединения. В свою очередь, гетеротрофов, подразделяют  насапрофитов – источник питания мертвые органичесике соединения, паразитов –  живущих за счет живых тканей животных и растений. В зависимости от источников энергии все организмы можно подразделить на три группы. Фотолитотрофы источник энергии солнечный свет, доноры электронов – неорганические соединения. Хемолитотрофы - источник энергии окислительно –  восстановительные реакции, доноры электронов – неорганические соединения.  Хемоорганитрофы – источник энергии окислительно-восстановительные реакции, доноры электронов – органические соединения. По источникам азота: Азотофиксирующие бактерии способны усваивать  молекулярный азот из атмосферы или неорганический азот из солей аммония, нитратов  или нитритов. Нитрифицирующие бактерии, которые способны использовать для  синтеза белков в качестве основных источников азота соли аммиака, азотистой и азотной  кислоты. Прототрофы – микроорганизмы, способные синтезировать все необходимые им  органические соединения ( углеводы, аминокислоты) из глюкозы и солей аммония. Ауксотрофы – микроорганизмы, не способные синтезировать какое - либо из указанных

20). Механизмы питания бактерий.

Основные механизмы поступления питательных веществ в бактериальную клетку:  Пассивный транспорт. Осуществляется за счет различного содержания питательных  веществ в среде и в клетке и происходит в направлении от большой концентрации к  меньшей, т.е. по градиенту концентрации. Для пассивной диффузии характерно  отсутствие субстратной специфичности и она не требует затраты энергии. Облегченная диффузия. Характеризуется выраженной субстратной специфичностью и протекает при обязательном участии специфических белков, локализованных в  мембране – это пермиазы – «проходящие сквозь». Они распознают и связывают  молекулу субстрата на внешней стороне мембраны и обеспечивают ее перенос через  мембрану. Облегченная диффузия происходит только по градиенту концентрации –  поэтому не требует затрат энергии.  Активный транспорт. С помощью этого механизма растворенные вещества могут  поступать в клетку против градиента концентрации, поэтому активный транспорт  требует от клетки затраты энергии. У бактерий этот механизм преобладает.

2. Центральными органами иммунной системы называют органы, где происходит формирование и созревание иммуноцитов. К ним относят костный мозг, вилочковую железу (тимус) и сумку Фабрициуса. Периферические органы иммунной системы содержат зрелые лимфоциты. Здесь после антигенного воздействия происходит их дальнейшая пролиферация и дифференцировка, продуцируются антитела и эффекторньш лимфоциты. К периферическим органам относятсяселезенка, лимфатические узлы, скопления лимфоидной ткани под слизистыми поверхностями желудочно-кишечного, дыхательного, мочеполового трактов(групповые лимфатические фолликулы, тонзиллы, пейеровы бляшки).

 

3.Кампилобактериоз. Возбудители. Клинические формы. Микробиологическая диагностика.

Возбудители кампилобактериоза относятся к семейству Spirillaceae, роду Campylobacter. Кампилобактеры имеют характерную s-образную форму с одним или более витком. Подвижны. Клетки имеют по одному полярному жгутику на одном или обоих концах. Спор, капсул не образуют. Грамотрицательны. Микроаэрофилы, рост возможен при концентрации О₂ не выше 3-6%. Очень требовательны к питательным средам. Для культивирования используют сердечно-мозговой или шоколадный агар. Однако, даже на этих высокопитательных средах видимый рост появляется на 6 сутки. Колонии круглые, мелкие, гладкие, выпуклые, блестящие. Имеют О- и Н- антигены. Они обладают выраженной инвазивной активностью и способны к внутриклеточному размножению. Продуцируют эндотоксин и энтеротоксин. Кампилобактериоз относится к сапронозам. Кампилобактеры широко распространены среди животных и птиц; средой их обитания является вода. Заболевание человека, при которых в роли этиологического агента выступают кампилобактеры, делятся на 4 группы: − диарреи (энтероколиты); − генерализованные и/или локализованные внекишечные формы инфекции; − перинатальные инфекции; − заболевания ротовой полости. Наиболее частыми возбудителями диарреи являются C.coli, C.jejuni. Внекишечные формы кампилобактериозов обычно развиваются как осложнения кишечной, но могут возникать и как самостоятельное заболевание. Иммунитет не достаточно изучен. Основными методами микробиологической диагностикикампилобактериозов являются методы иммуноиндикации и молекулярно - генетические. Для этиотропной терапии используют антибиотики. Специфическая профилактика не разработана.

 

4.25. Реакция нейтрализации (реакция нейтрализации токсина антитоксином; реакция вирусной нейтрализации на животных, эмбрионах и клеточных культурах.Механизм и практическое использование).

Идентифицировать вирус по характеру его действия на монослой культуры клеток, которые он разрушает или вызывает в них разного рода структурные изменения, очень трудно, и поэтому прибегают к постановке реакции нейтрализации (РН) вирусов заведомо известными вируснейтрализующими сыворотками. С этой целью полученный от больного вирус накапливают в культуре клеток и различные его разведения смешивают с неразведенной противовирусной сывороткой или, наоборот, постоянную дозу вируса добавляют к различным разведениям иммунной сыворотки. Смеси инкубируют в термостате. После этого смесями вируса и сыворотки заражают культуру клеток и о нейтрализующей силе ее антител судят по отсутствию цитопатического действия на клетки Смесью вирусов и сывороток можно заражать куриные эмбрионы или чувствительных животных. В таких случаях нейтрализующую активность антител определяют по предотвращению развития патологических изменений на хорионаллантоисной оболочке; нейтрализации вирусных гемагглютининов в жидкостях эмбриона, устранению летального действия вируса на животных

Подобным образом с помощью РН идентифицируются вирусы, выделенные из материала больных при заражении им куриных эмбрионов и животных. В таких случаях к вируснейтрализующим сывороткам прибавляют вируссодержащие жидкости эмбрионов и взвеси пораженных органов животных. После определенного времени инкубации смесями инфицируют культуры клеток, куриные эмбрионы и животных.

В серодиагностике вирусных инфекций РН определяют вирус–нейтрализующие антитела в сыворотке больных по известному вирусу. Ставят ее в динамике с парными сыворотками, одну из которых берут в разгаре заболевания, а вторую – спустя 2–3 недели, и по четырехкратному нарастанию титра антител в этой последней подтверждают диагноз.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                     Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 18              1.Белковый обмен бактерий. Методы его изучения. Тление и гниение. Углеводный обмен бактерий. Методы его изучения. Горение и брожение.                      2.Теории образования антител.         3.Стрептококки. Биология возбудителя. Инвазивные формы стрептококков. Факторы вирулентности. Специфические  формы инфекций, вызванных пиогенным стрептококком. Лабораторная диагностика и терапия.     4.Функциональное значение отдельных компонентов вирионов (вирусных нуклеиновых кислот, вирусных белков). Прионы. Вироиды.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1. Белковый обмен - это процесс синтеза собственных аминокислот и белков путем  ассимиляции необходимых компонентов из внешней среды. Тление – расщепление  белков в аэробных условиях. Гниение – расщепление белков в анаэробных условиях.  Протеолитические свойства - способность расщеплять белки до промежуточных  продуктов распада – пептонов - изучается при посеве на желатин и (или) лакмусовое  молоко. При наличии протеаз у бактерий желатин разжижается, а в молоке образуется  сгусток кремового цвета, а над ним светлая, прозрачная жидкость).  Пептолитические свойства - способность расщеплять только промежуточные продукты  распада белков – пептоны, до элементарных радикалов) изучается при посеве бактерий  в мясо-пептонный бульон. Под крышку пробирки помещают индикаторные  полоски, способные изменять свой цвет в присутствии летучих продуктов распада пептонов (аммиака, сероводорода, индола)

Углеводный обмен  – это процесс синтеза и  распада углеводов. Горение – это расщепление углеводов в аэробных условиях.  Брожение – это расщепление углеводов в анаэробных условиях. Изучается углеводный  обмен в процессе культивирования исследуемых бактерий на средах Гисса (полужидких средах, содержащих углевод и индикатор, реагирующий на появление кислых продуктов  распада углеводов).

2. Теории образования антител

Теория боковых цепей Эрлиха. Эрлих полагал, что антитела представляют собой макромолекулы, специфичность которых для антигена зависит от присутствия определенных стереохимических конфигураций, обладающих комплементарностью к аналогичным структурам антигена, что обеспечивает специфическое взаимодействие между ними.

Инструктивные теории образования антител.

 Сложилось убеждение, что именно антиген управляет образованием специфических антител, направляя механизмы белкового синтеза на изготовление тех уникальных молекулярных конфигураций, которые определяют иммунологическую специфичность

 

3. Стрептококки относятся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus. Стрептококки - кокки, располагающиеся цепочкой или попарно (вид S.pneumoniae, т.е. пневмококки), неподвижны, спор не образуют. S.pneumoniae в организме человека и животных образуют капсулу. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Требовательны к питательным средам, растут на средах с добавлением глюкозы или крови. На плотных питательных средах образуют мелкие (“точечные”), беспигментные колонии с матовой поверхностью. При росте в жидких средах стрептококки дают придонно - пристеночный рост, а среда остается прозрачной. Наибольшее значение в патологии человека играют: S.pyogenes, S.agalactiae, S.pneumoniae.  Стрептококки имею сложное антигенное строение. По локализации их антигены делят на:  − экстрацеллюлярные (антигены токсинов и ферментов агрессии и защиты, капсульные у пневмококков); − целлюлярные (поверхностные и глубокие). Факторы вирулентности стрептококков весьма разнообразны. Прежде всего, это белки клеточной стенки, в комплексе с тейхоеевыми кислотами обеспечивающие адгезию стрептококков на клетках тканей и органов.  М-белок стрептококков серогруппы А является протективным антигеном. Он нарушает процессы фагоцитоза, из-за сходства в строении с антигенами сердечной и почечной ткани становится причиной аутоиммунных процессов. Являясь суперантигеном, этот белок вызывает множественную активацию популяций лимфоцитов и медиаторов иммунной системы, что опосредованно обуславливает развитие синдрома токсического шока. Fc-белок стрептококков неспецифически связывается с Fc-фрагментом иммуноглобулинов классов G и А, обладает антикомплементарным и антифагоцитарным действием и также может обуславливать аутоиммунные конфликты. Это токсины - стрептолизин О и стрептолизин S.  Стрептококки относятся к условно-патогенным микроорганизмам. Они являются обитателями слизистых оболочек верхних дыхательных путей, пищеварительного (род Enterococcus) и мочеполового трактов. Поэтому вызываемые ими заболевания могут иметь как эндогенное, так и экзогенное происхождение. При экзогенном инфицировании пути передачи инфекции могут быть различными, но чаще всего это воздушно-капельный, контактно - бытовой или артифициальный. Стрептококки способны поражать любые органы и ткани, вызывая различные гнойно-воспалительные заболевания: от ангины до сепсиса. Основным методом микробиологической диагностики стрептококковой инфекции является бактериологическое исследование. Материал для него определяется клиническими ее проявлениями. Для обнаружения в исследуемом материале антигенов могут быть использованы методы иммуноиндикации (реакции коагглютинации, латекс-агглютинации, ИФА). Серологическую диагностику (определение титра антигиалуронидазы и анти-О-стрептолизина) используют как вспомогательный метод диагностики ревматического процесса и оценки степени его активности.

Для лечения применяют пенициллин, сульфаниламидные препараты. В случаях тяжелого течения используют антитоксическую противоскарлатинозную сыворотку.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат:

1) слизь из зева при ангине и скарлатине;

2) кровь при эндокардите и подозрении на сепсис;

3) гнойное отделяемое из очага поражения;

4) мокрота при заболеваниях органов дыхания;

5) моча при заболеваниях почек и мочевыводящих путей. Чаще всего исследуют слизь из зева и кровь. Слизь из зева, взятую стерильным ватным тампоном, засевают на чашки с кровяным агаром. Посевы выдерживают в термостате при 37°С 18—20 ч (первый день). На второй день просматривают колонии, делают мазки, микроскопируют. Колонии, окруженные зоной гемолиза, отсевают в пробирку с бульоном Мартена или кровяным бульоном.

 

На третий день учитывают характерный рост стрептококка на бульоне Мартена и проводят определение серологической группы стрептококка с помощью реакции преципитации, определяют серологический тип стрептококка в реакции агглютинации на стекле по методу Гриффитса с типовыми антистрептококковыми сыворотками.

 

Посев 5—10 мл крови для бактериологического исследования производят в колбы с 10-кратным объемом сахарного бульона или печеночного бульона Китта — Тароцци. Посевы выдерживают в термостате 17,2—2 мес, делая контрольные высевы на чашки с кровяным агаром каждые 2—3 дня. Дальнейший ход исследования аналогичен бактериологическому изучению мазков из зева.

 

Серологический метод диагностики стрептококковых инфекций используют главным образом для определения антител к стрептолизину О, фибринолизину, гиалуронидазе.

 

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Стрептококки, особенно группы А, высокочувствительны к пенициллину и в отличие от стафилококков, как правило, не приобретают к нему устойчивости. Эффективны сульфаниламидные препараты. При хронических процессах применяют вакцинотерапию, фаготерапию.

 

4. Прионы — инфекционные агенты белковой природы, вызывающие смертельные заболевания у животных и человека. Прионы представляют собой неправильно свернутые молекулы прионного белка PrP, способные «размножаться», превращая нормальные молекулы PrP в подобие самих себя. Оказалось, что у прионов есть нечто похожее на наследственную изменчивость, что позволяет им эволюционировать под действием естественного отбора. Они могут приспосабливаться к разным типам клеток и даже вырабатывать устойчивость к лекарствам.\

Вироиды – это лишенные оболочки, ковалентно замкнутые кольцевые молекулы РНК, состоящие из 246–371 нуклеотидов, которые служат причиной некоторых заболеваний высших расте ний. Определена первичная и наиболее вероятная вторичная структура ряда вироидов. После того как было показано, что кло нированная кДНК вироида обладает инфекционностью, стало возможным более глубокое изучение структурно функциональ ных особенностей вироидов.

Функции вирусных нуклеиновых кислот

 

 Функция вирусных нуклеиновых кислот независимо от их типа состоит в хранении и передаче генетической информации. Вирусные ДНК могут быть линейными (как у эукариотов) или кольцевыми (как у прокариотов), однако в отличие от ДНК тех и других она может быть представлена однонитевой молекулой. Вирусные РНК имеют разную организацию (линейные, кольцевые, фрагментированные, однонитевые и двунитевые), они могут быть представлены плюс- или минус-нитями.

Плюс-нити функционально тождественны и-РНК, т. е. способны транслировать закодированную в них генетическую информацию на рибосомы клетки хозяина.

ирусные белки

 

 Вирусные белки по локализации в вирионе делятся на:

 

 -капсидные,

 

 -белки суперкапсидной оболочки,

 

 -геномные.

 

 

Белки капсидной оболочки у нуклеокапсидных вирусов выполняют защитную функцию - защищают вирусную нуклеиновую кислоту от неблагоприятных воздействий, - и рецепторную (якорную) функцию, обеспечивая адсорбцию вирусов на клетках хозяина и проникновение в них.

 

 

 

 Белки суперкапсидной оболочки, как и белки капсидной оболочки, выполняют защитную и рецепторную функции. Это сложные белки - липо- и гликопротеиды. Некоторые из этих белков могут формировать морфологические субъединицы в виде шипованных отростков и обладают свойствами гемагглютининов (вызывают агглютинацию эритроцитов) или нейраминидазы (разрушают нейраминовую кислоту, входящую в состав клеточных стенок).

 

 

 

 Отдельную группу составляют геномные белки, они ковалентно связаны с геномом и образуют с вирусной нуклеиновой кислотой рибо- или дезоксирибонуклеопротеиды. Основная функция геномных белков - участие в репликации нуклеиновой кислоты и реализации содержащейся в ней генетической информации, к ним относятся РНК-зависимая РНК-полимераза и обратная транскриптаза.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 19             1.Типы окислительно-восстановительных процессов у бактерий. Особенности дыхательного аппарата у бактерий. Методы культивирования анаэробов.                      2. Реакции иммунитета. Механизм взаимодействия антитела и антигена.               Специфичность реакций иммунитета.      3.Гонококк. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика осложненной и неосложненной гонореи.      4.Возбудитель лямблиоза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1. Типы окислительно-восстановительных процессов у бактерий. ЦПЭ аэробных, факультативно анаэробных и анаэробных бактерий.  Особенности дыхательного аппарата бактерий.

По типу дыхания микроорганизмы делятся на: Аэробы - которые нуждаются в свободном кислороде. Облигатные (строгие) аэробы  (например, некоторые виды псевдомонад) не могут жить и размножаться в отсутствии  молекулярного кислорода, поскольку они используют его в качестве акцептора  электронов. Молекулы АТФ образуются или при окислительном фосфорилировании с  участием цитохромоксидаз, флавинзависимых оксидаз и дегидрогеназ. При этом, если  конечным акцептором электронов является О2, выделяется значительное количество  энергии.  Анаэробы – получают энергию при отсутствии доступа кислорода путем ускоренного, но  не полного расщепления питательных веществ. Облигатные анаэробы (например,  возбудители столбняка, ботулизма) не переносят даже следов кислорода. Они могут  образовывать АТФ в результате окисления углеводов, белков, липидов путем 3 субстратного фосфорилирования до пирувата. При этом выделяется сравнительно  небольшое количество энергии. Существуют факультативные анаэробы, которые могут  расти и размножаться как в присутствии кислорода воздуха, так и без него. Они образуют  АТФ при окислительном и субстратном фосфорилировании.

Органеллами дыхания у большинства бактерий являются производные цитоплазматической мембраны – мезосомы, на которых локализуются специальные дыхательные ферменты типа цитохромоксидаз.

Для культивирования анаэробных микроорганизмов необходимо создание бескислородных условий, достигаемое различными методами.

Методы культивирования анаэробов.

Физические методы основаны на создании вакуума в специальных аппаратах — анаэростатах. Иногда воздух в них заменяют каким-либо другим газом, например СО2. Доступ кислорода в питательную среду можно затруднить, если культивировать анаэробов в глубине столбика сахарного агара или среды Вильсона — Блера, налитых в пробирки в расплавленном состоянии и остуженных до 43°С. По методу Вейона — Виньяля расплавленный и остуженный агар с посевным материалом набирают в стеклянные трубочки, которые запаивают с двух концов.

 

Химические методы заключаются в том, что при культивировании исследуемого материала на плотных средах в эксикатор помещают химические вещества, например пирогаллол и щелочь, реакция между которыми идет с поглощением кислорода. В жидкие питательные среды можно добавлять различные редуцирующие вещества: аскорбиновую или тиогликолевую кислоту.

 

Биологический метод основан на одновременном культивировании аэробов и анаэробов на плотных питательных средах в чашках Петри, герметически закупоренных. Вначале кислород поглощается растущими аэробами, посеянными на одной половине среды, а затем начинается рост анаэробов, посев которых сделан на другой половине. Наиболее удобна для культивирования анаэробов специальная среда Китта — Тароцци. В нее входят сахарный МПБ, который наливают в пробирки в количестве 10—12 мл, и кусочки вареных паренхиматозных органов. Перед употреблением среду Китта ,— Тароцци кипятят на водяной бане для удаления растворенного в ней кислорода. Среду заливают сверху стерильным вазелиновым маслом. Заметный рост анаэробов (помутнение) может наблюдаться через 48 ч и более в зависимости от количества посевного материала.

 

Рост изолированных колоний анаэробов можно получить при рассеве исследуемого материала по поверхности кровяно-сахарного агара, разлитого в чашки Петри. После посева чашки помещают в анаэростат. Исследуемый материал в убывающей концентрации можно засевать в высокий столбик агара. Образовавшиеся отдельные колонии анаэробов выделяют, распилив пробирку в месте роста. Колонии анаэробов для получения значительного количества биомассы отсевают затем на среду Китта — Тароцци. В качестве источника энергии для анаэробов используют глюкозу, добавление которой в питательную среду обязательно.

 

2. Реакции иммунитета – это взаимодействие антигена с продуктами иммунного ответа. В любой реакции иммунитета выделяют две фазы:

    1) специфическую – обусловлена взаимодействием антигена с антителом и образованием комплекса АГ – АТ;

    2) неспецифическую.

    Все реакции иммунитета делятся на:

    1) простые; участвуют два компонента (антиген и антитело);

    2) сложные; участвуют три компонента и более (антиген, антитело, комплемент и т. д.).

    Выделяют также:

    1) прямые; результат учитывается визуально без специальных индикаторных систем;

    2) непрямые; для учета требуются специальные системы индикации.

   

В основе реакции антиген–антитело лежит взаимодействие между эпито-

пом антигена и активным центром антитела, основанное на их пространст-

венном соответствии ( комплементарности). Это взаимодействие состоит в

установлении между эпитопом и активным центром антитела нековалент-

ных химических связей, в основе которых лежат следующие типы межмо-

лекулярных взаимодействий (ни одно из них не является специфичным для

реакции антиген–антитело)

Приобретенный иммунитет специфичен, и иммунная система способна точно различить два различных микроорганизма. Разумеется, в основе специфичности лежит способность распознающих участков молекул  антител различать  антигены . Эта способность узнавать единственный антиген и выделять его среди других имеет фундаментальное биологическое значение для распознавания своего и чужого. Неспособность отличить "свое" от "чужого" может привести к синтезу антител, взаимодействующих с компонентами собственного организма ( аутоантитела ), что заканчивается серьезными последствиями.

3.Гонокок.

Микробиологическая диагностика. Исследуют отделяемое уретры, влагалища, шейки матки, при бленнорее — гнойные выделения конъюнктивы глаза. При хронической гонорее исследуют также мочу. Основной метод лабораторной диагностики — микроскопия исследуемого материала. Наличие характерной триады признаков дает основание поставить лабораторный диагноз гонореи. Однако однократное обследование больных иногда бывает недостаточным. Для улучшения диагностики больным, у которых не обнаружен гонококк, рекомендуют проводить провокацию (инъекция гоновакцины, смазывание очагов поражения 1% люголевским раствором на глицерине), а затем ежедневно 3—7 дней бактериологическое исследование отделяемого из очагов поражения. В случае хронического течения инфекции, а также при острой гонорее, леченной антибиотиками, микроскопический метод может не дать положительных результатов, поэтому прибегают к микробиологическому исследованию патологического материала. Производят посев на свежеприготовленный сывороточный, кровяной или асцит-агар. Наряду с этим, начиная с 3-й недели заболевания, проводят серологическое исследование: ставят реакцию связывания комплемента (реакция Борде — Жангу) с сывороткой крови больного и гонококковым антигеном. Иногда прибегают к постановке кожно-аллергической пробы с гонококковой вакциной. Однако эта реакция может быть положительной в течение многих лет после перенесенного заболевания.

 

Профилактика и лечение. Профилактика сводится к санитарно-просветительной работе среди населения, своевременному выявлению и лечению больных. Специфическая профилактика не осуществляется. Для профилактики бленнореи новорожденным в конъюнктивальный мешок вводят по 1—2 капли 30% раствора альбуцида.

Морфология и биологические свойства. Гонококки напоминают кофейные зерна или бобы. Это парные кокки, обращенные друг к другу вогнутыми сторонами. Размер их в среднем 0,7X1,3 мкм. В гнойном отделяемом располагаются в цитоплазме лейкоцитов, сохраняя там жизнеспособность (явление незавершенного фагоцитоза). В чистой культуре имеют вид круглых или бобовидных кокков, разных по величине, расположенных беспорядочно. Хорошо красятся всеми анилиновыми красками. Грамотрицательны. Внутриклеточное расположение, бобовидная форма и грамотрицательная окраска составляют характерную триаду свойств, которыми гонококки отличаются от других диплококков. Однако под действием лекарственных средств и при хроническом течении болезни они могут изменяться: наряду с грамотрицательными встречаются грамположительные гонококки неправильной формы, разной величины. При этом могут образовываться L-формы гонококка. Они обычно шаровидной формы и разных размеров: наряду с крупными встречаются очень мелкие. Спор, не образуют, неподвижны. В патологическом материале вокруг гонококка образуется слизистое капсулоподобное вещество. Аэробы. К питательным средам очень требовательны. Растут на средах, содержащих нативный человеческий белок (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость), при рН 7,2— 7,4, с обязательным добавлением витаминов. Обязательное условие культивирования — достаточная влажность Среды И присутствие СО,2. Рост происходит в пределах 30—39°С при оптимуме 37°С. На асцит-агаре колонии мелкие (1—2 мм), напоминающие капельки росы; иногда образуются дочерние колонии. На асцитическом бульоне дают слабое помутнение, образуют пленку, которая оседает на дно пробирки. Из углеводов разлагают только глюкозу. На кровяном агаре гемолиза не дают. Экзотоксина гонококки не образуют. При разрушении клетки выделяют эндотоксин, введение которого внутрибрюшинно белым мышам вызывает их гибель.

4.Лямблиоз.

Возбудителем лямблиоза у человека является Lamblia intestinalis, относящаяся к типу простейших, классу жгутиковых

 В организме человека и животных лямблии имеют две формы существования — вегетативную (трофозоит) и в виде спор (цист). В вегетативной форме лямблии преимущественно находятся в верхних отделах тонкой кишки. При попадании в толстую кишку вегетативные формы превращаются в цисты, которые выделяются с испражнениями во внешнюю среду.

Цисты лямблий сохраняются жизнеспособными во влажном кале в зависимости от температуры от суток до 3 недель, а в чистой воде — до 5 недель. Длительно они выживают на различных пищевых продуктах, особенно на влажных. При высыхании происходит незамедлительная гибель цист

линическими показаниями к лабораторному обследованию для исключения лямблиоза являются (А. Я. Лысенко и др., 2002 г.):

• наличие болезней пищеварительного тракта, их тенденция к хроническому течению с частыми обострениями;

• нейроциркуляторная дисфункция, особенно в сочетании с патологией пищеварительного тракта;

• стойкая эозинофилия крови;

• аллергические проявления;

• «диарея путешественников».

 

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования. Проводится микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий. Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо примененять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях (Сафаралиева, Турдыева, Барроу) и проводить многократные исследования (от 2-3 до 6-7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод всплывания. В большинстве случаев цисты лямблий в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении лямблий могут колебаться от 2-3 суток до 2-3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

 

В дуоденальном содержимом трофозоиты лямблий обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании лямблий в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов.

 

В последнее время для лабораторного подтвеждения лямблиоза применяют иммунологические методы исследования, основанные на выявлении АГ возбудителя в фекалиях или специфических AT в сыворотке крови. При размножении L. intestinalis в кишечнике в большом количестве продуцируется специфический АГ GSA 65. В фекалиях его определяют методом моноклональных AT. Специфические AT класса IgM можно выявлять в сыворотке крови больного методом ИФА уже на 10-14 день от начала инвазии, их наличие в диагностических титрах свидетельствует об остром лямблиозе. Использование ПЦР для обнаружения ДНК лямблий в биологических субстратах является высоко эффективным методом диагностики, но применяется в основном для проведения научных исследований.

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 20              1.Простые и сложные методы окраски бактерий. Окраска по Граму.                      2.Диагностическая реакция  агглютинации. Ее значение  в диагностике                инфекционных заболеваний. РНГА и её практическое применение.      3.Менингококк. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика менингококковой инфекции. Менингококковое бактерионосительство. Методы его выявления.      4.Принципы классификации вирусов. Основные систематические группы.              Зав. кафедрой       Профессор    _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1.Простые и сложные методы окраски бактерий. Окраска по Граму.

В бактериологии различают следующие способы окраски: 1)Негативные (С помощью специальных приемов окрашивается фон мазка и тогда на нем хорошо видны неокрашенные бактериальные клетки.) 2) Позитивные (окрашиваются сами бактериальные клетки, хорошо видимые на неокрашенном фоне мазка): а) Простые- Используется 1 краситель, мало информативен; б)Сложные - Используется 2 и более красителей: Дифференциально – диагностические: _ Метод Грамма_ Метод Циля-Нильсена; Специальные: _ Окраска спор_ Окраска капсул_ Окраска жгутиков_ Окраска включений. Метод Грамма – основной метод окраски бактерий в бактериологии, важен для идентификации бактерий, позволяет изучить морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Тинкториальные свойства – отношение к окраске по Граму. Все бактерии делятся на грамположительные и грамотрицательные в зависимости от строения клеточной стенки. Грамположительные бактерии – при окраске по Граму окрашиваются генциан-виолетом в синий цвет и не обесцвечиваются спиртом. Грамотрицательные бактерии – при окраске по Граму обесцвечиваются спиртом и докрашиваются фуксином в красный цвет. ЭТАПЫ ОКРАСКИ ПО МЕТОДУ ГРАМА. 1. генциан-виолет – 40 секунд; 2. раствор Люголя – 40 секунд; 3. спирт этиловый – 20 секунд; 4. промыть водой; 5. водный фуксин – 120 секунд.

2. Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия хлорида. Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка (клетки, «склеенные» антителами, име ющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА используют для: 1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях; 2) определения возбудителя, выделенного от больного; 3) определения групп крови с использованием моноклональных антител против алло-антигенов эритроцитов. Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок. Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увеличивающимися разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка. Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии.

3.. Менингококк. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции. Менингококковое бактерионосительство. Методы его выявления.

Менингококки - это диплококки, в мазках из материала, взятого от больного, имеют вид кофейных зерен. Спор не образуют, жгутиков не имеют, в организме образуют капсулу (исключение менингококки группы В). Грамотрицательны. Строгие аэробы. Требовательны к питательным средам. Растут только на средах с добавлением сыворотки. На сывороточном агареколонии нежные, прозрачные, средней величины. В сывороточном бульоне - помутнение и осадок на дне. Биохимическая активность невелика, ее изучение используется для дифференциации менингококков от других представителей рода. Менингококки крайне неустойчивы во внешней среде, что следует учитывать при доставке материала. У менингококков выделяют 4 группы антигенов. По капсульному полисахаридному антигену их делят на группы, которые обозначаются заглавными буквами латинского алфавита (А, В, С и т.д.). Большинство выделяемых в настоящее время штаммов относится к группам А, В, Y. К факторам вирулентности менингококков относят их способность к адгезии и колонизации клеток, инвазии и продукцию токсических и аллергенных факторов. Важным компонентом вирулентности менингококков являются капсульные полисахаридные антигены, защищающие их от фагоцитоза, а также продукция ферментов агрессии и защиты. Подавление менингококками фагоцитов способствует их распространению в организме и генерализации инфекционного процесса. Менингококковая инфекция - антропоноз. Источником инфекции является больной или бактерионоситель. Основной путь передачи - воздушно- капельный. Клиническими формами проявления менингококковой инфекции могут быть: назофарингит, эпидемический цереброспинальный менингит, менингококцемия, менингококковый эндокардит. Для диагностики используются различные методы исследования: бактериоскопические (мазок из осадка спинномозговой жидкости при эпидемическом цереброспинальном менингите), бактериологические, методы иммуноиндикации, серодиагностики.

 

4.Принципы классификации вирусов. Основные систематические группы.

Вирусные белки. По локализации в вирионе они делятся на капсидные, белки суперкапсидной оболочки и геномные. Белки капсидной оболочки у нуклеокапсидных вирусов выполняют защитную и рецепторную функции, т.е. защищают вирусную нуклеиновую кислоту и участвуют в адсорбции вирусов на клетках хозяина и проникновении в них. Белки суперкапсидной оболочки как и белки капсидной оболочки выполняют защитную и рецепторную функции. Это сложные белки – липо - и гликопротеиды. Отдельную группу составляют геномные белки. Они ковалентносвязаны с геномом и образуют с вирусной нуклеиновой кислотой рибо- или дезоксирибонуклеопротеиды. Основная функция геномных белков - участие в репликации вирусной нуклеиновой кислоты и реализации содержащейся в ней генетической информации.  Представители царства Vira по типу нуклеиновой кислоты делится на 2 подцарства - рибовирусы и дезоксирибовирусы.

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                            «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 21              1.Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактериальной популяции в жидкой питательной среде. Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон». Понятие “Quorum sensing”.                      2.Реакция  агглютинации по идентификации. Ее значение в               микробиологических исследованиях. Получение агглютинирующих сывороток.                     3.Туляремия. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика.             Специфическая профилактика.      4. Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

 

1.Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактериальной популяции в жидкой питательной

среде. Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон». Понятие “Quorumsensing”

 

Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам, реже путем почкования. Актиномицеты, как и грибы, могут раз­множаться спорами. Актиномицеты, являясь ветвящимися бактериями, размножаются путем фрагментации нитевидных клеток. Грамположительные бактерии делятся путем врастания синтези­рующихся перегородок деления внутрь клетки, а грамотрицательные — путем перетяжки, в результате образования гантелевидных фигур, из которых образуются две одинаковые клетки.

Фазы развития бактериальной популяции в жидкой питательной среде.

размножение бактерий на жидких средах в периодической культуре можно  рассматривать как замкнутую систему. В этом процессе выделяют 4 фазы.  1 фаза – начальная, или лаг – фаза, или фаза задержки размножения, характеризуется  началом интенсивного роста клеток, но скорость их деления остается невысокой;2.фаза – логарифмическая, или лог – фаза, или экспоненциальная фаза, она характеризуется постоянной максимальной скоростью деления клеток, и  значительным увеличением числа клеток в популяции;  3. фаза – стационарная, она наступает тогда, когда число клеток в популяции  перестает увеличиваться.  Это связано с тем, что наступает равновесие между числом в вновь образующихся и  гибнущих клеток. Число живых бактериальных клеток в популяции на единицу объема  питательной среды в стационарной фазе обозначается как М – концентрация. Этот  показатель является характерным признаком для каждого вида бактерий. 4.фаза – фаза отмирания (логарифмической гибели), которая характеризуется  преобладанием в популяции числа погибших клеток и прогрессивным снижением числа  жизнеспособных клеток популяции.

Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон».

Штамм — чистая культура вирусов, бактерий, других микроорганизмов или культура клеток, изолированная в определённое время и в определённом месте. Поскольку многие микроорганизмы размножаются митозом (делением), без участия полового процесса, по существу, виды у таких микроорганизмов состоят из клональных линий, генетически и морфологическиидентичных исходной клетке.  Культура микроорганизмов - популяция микроорганизмов на питательной среде, находящаяся в состоянии размножения или закончившая его. Чистая культура состоит из микроорганизмов одного вида, смешанная (первично выделенная из природных источников — почвы, воздуха, воды и др.) — из нескольких. Колония бактериальная — скопление микроорганизмов в процессе их роста, размножения на поверхности пищевых продуктов, почвы, при посеве в лабораторных условиях на различных питательных средах.Клон - культура микроорганизма (популяция клеток), полученная из одной (родительской) клетки путем бесполого размножения.

 

Понятие “Quorumsensing”.

Понятие quorumsensing - «чувство кворума» - быстрый способ общения микроорганизмов друг с другом посредством сигнальных молекул.

 

2.Реакция  агглютинации по идентификации. Ее значение в микробиологических исследованиях. Получение агглютинирующих сывороток.

 

Агглютинирующая сыворотка — сыворотка крови животных, способная вызывать реакцию агглютинации, получаемая при иммунизации животного определённой бактериальной культурой.

Такая сыворотка вызывает агглютинацию при взаимодействии именно с теми микроорганизмами, которые вводились животному, и не реагирует с другими (или реагирует очень слабо с родственными видами).

Такое свойство агглютинирующих сывороток позволяет определять с их помощью принадлежность микроорганизма к определённому виду. Во время инфекционного заболевания сыворотка больного также приобретает агглютинирующие свойства, с помощью чего можно установить вид возбудителя, поставив реакцию агглютинации с сывороткой больного и антигенами микроорганизма.

Агглютинирующие сыворотки могут обладать различной силой действия - минимальное количество сыворотки, при котором она способна агглютинировать называется титром сыворотки. При получении иммунных сывороток при помощи гипериммунизации животных их титр выше (до десятитысячных миллилитра), чем у сывороток больных. Титр сывороток, полученных искусственной иммунизацией, обычно значительно выше титра сывороток больных (до сотых долей миллилитра).

Для получения агглютинирующих сывороток иммунизацией животных чаще всего используют кроликов, овец и лошадей. Кролики - наиболее подходят для этой цели, так как сыворотка кроликов обладает слабыми агглютинирующими свойствами, а у сыворотки крови гипериммунизированных кроликов групповая агглютинация выражена более слабо, чем у бараньей и лошадиной сывороток.

Иммунизацию проводят как живыми культурами микроорганизмов, так и мертвыми или частями микробных клеток.

3.Туляремия. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

Возбудитель туляремии отнесен к роду Francisellatularensis подразделяют на три географические расы (подвиды). F.tularensis - мелкиекоккобактерии; неподвижны, не образуют спор, продуцируют капсулообразное вещество. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Возбудитель туляремии, особенно в первых генерациях, не растет на искусственных питательных средах, что является одним из существенных признаков при его идентификации. Для поддержания лабораторных культур используют специальные (с добавлением желтка или цистина) среды, на которых через 2-5 суток формируются мелкие колонии с ровными краями беловатого цвета. Ферментативная активность туляремийного микроба не выражена. Возбудитель туляремии имеет Vi- и О-антигены. F.tularensis является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность связана со способностью развиваться в фагоцитах и подавлять их киллерную активность, образовывать капсулу, эндотоксин, нейраминидазу. Антигены клеточной стенки обладают свойствами аллергенов, что ведет к сенсибилизации инфицированного организма и усугубляет действие других факторов вирулентности. Естественные хозяева возбудителя - грызуны, водные крысы, домовые мыши. Заражение людей происходит при прямом контакте с больными животными, их трупами, через объекты внешней среды и пищевые продукты, инфицированные выделениями больных грызунов. Возможен и трансмиссивный путь передачи через укусы кровососущих членистоногих. От больных людей заболевание не передается. Возбудитель может проникать в организм через слизистые оболочки верхних дыхательных путей, глаз, желудочно-кишечного тракта и даже через неповрежденную кожу. Заболевание протекает тяжело, продолжается в среднем 4-6 недель и заканчивается, как правило, выздоровлением.  Для микробиологической диагностики используют методы серодиагностики, иммуноиндикации, постановку аллергической диагностической пробы с тулярином. В специализированных лабораториях проводят бактериологическое исследование (материал для исследования определяется клинической формой болезни). Культуру выделяют, заражая лабораторных животных. Для лечения туляремии используют антибиотики: хлортетрациклин, левомицетин, стрептомицин.  Специфическая профилактика осуществляется живой туляремийной вакциной.

 

4.Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий

Инвазия (от лат. invasio — вторжение, внедрение) — заражение человека, животных и растений паразитами. Инвазия может произойти активно, когда паразит нападает или внедряется в организм хозяина через поврежденные и неповрежденные кожные покровы, или пассивно, когда паразит вносится в организм с водой, пищей.
проникновение в организм паразитов с последующим их взаимодействием с организмом хозяина
паразитарные заболевания, возбудителями которых являются животные или протисты

Заболевания, вызываемые животными-эндопаразитами (гельминтозы — глистные инвазии, акариазы, миазы — болезни животных, вызываемые оводами) и мухами, все авторы однозначно относят к инвазиям. Менее ясно, употребим ли этот термин к болезням, которые вызываются насекомыми-эктопаразитами (таким, как педикулёз или фтириаз). вот что нашла

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                  Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 22             1.Питательные среды. Требования, предъявляемые к ним. Классификация питательных сред.                      2. Цитокины. Их классификация и значение в развитии иммунного ответа.      3.Бруцеллез. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.      4.Особенности противовирусного иммунитета. Внутри- и внеклеточные механизмы устойчивости к вирусам.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1.Питательные среды. Требования, предъявляемые к ним. Классификации питательных сред.

Питательная среда — вещество или смесь веществ, применяемая для культивирования макро- и микроорганизмов. Существует множество стандартных биологических питательных сред. Питательные среды должны содержать источники органогенов,неорганические соединения в виде различных солей, факторы роста, т.е.отвечать основному требованию к питательным средам - питательности.Кроме того, питательные среды, используемые в бактериологии, должныотвечать еще некоторым требованиям. Они должны быть изотоничны,стерильны и иметь определенную рН (кислотность) среды, определенный рН(электронный) потенциал и быть по возможности прозрачными.Для выращивания и изучения различных микроорганизмов предложенобольшое количество питательных сред. В зависимости от их происхождения,состава, назначения и консистенции (плотности) все среды можноподразделить на несколько групп.Классификация питательных сред по происхождению: 1)естественные - приготовленные из естественных продуктов (яичноглицериновая, картофельно-глицериновая среда, молоко, мясная вода и пр.); 2)искусственные - приготовленные из веществ, искусственно полученных из естественных продуктов (пептон, аминопептид, дрожжевой экстракт, казаминокислоты и т.п.), например, пептонная вода для культивирования холерного вибриона 3)синтетические - среды известного состава, приготовленные из химически чистых неорганических и органических соединений;Классификация питательных сред по составу: 1)простые - мясо-пептонный бульон (МПБ), мясо-пептонныйагар(МПА), агарХоттингера, бульон Хоттингера;2)сложные - это простые среды с добавлением дополнительногопитательного компонента. Классификация питательных сред по назначению: 1)основные - пригодные для культивирования разных бактерий;2)элективные (селективные) - пригодные для культивирования бактерийодного рода или вида;3)дифференциально-диагностические - среды, на которых рост однихвидов бактерий отличается от других;4)специальные - для определения отдельных свойств разных бактерий. Классификация питательных сред по плотности (консистенции): 1)жидкие;2)полужидкие (содержат 0,15 - 0,7% агар-агара);3)плотные (содержат 1,5 - 2% агар-агара).В связи с разнообразием питательных потребностей разныхмикроорганизмов создать универсальную питательную среду, пригодную длякультивирования любых бактерий, практически невозможно

 

2.Цитокины. Их классификация и значение в развитии иммунного ответа.

Цитокины — это небольшие регуляторные пептиды, участвующие в иммунорегуляции, хеморегуляции и биорегуляции в целом, которые секретируются неэндокринными клетками (в основном, иммунными) и оказывают местное воздействие на соседние клетки-мишени. Цитокины вместе с факторами роста относятся к гистогормонам (тканевым гормонам).

Цитокины вместе с продуцирующими их клетками  бразуют «микроэндокринную систему», которая обеспечивает взаимодействие клеток иммунной, кроветворной, нервной и эндокринной систем. Образно можно сказать, что с помощью цитокинов клетки иммунной системы общаются друг с другом и с остальными клетками организма, передавая от цитокин-продуцирующих клеток команды на изменение состояния клеток-мишеней. И с этой точки зрения цитокины можно назвать для иммунносй системы «цитотрансмиттерами», «цитомедиаторами» или «цитомодуляторами» по аналогии с нейротрансмиттерами, нейромедиаторами и нейромодуляторами нервной системы.

Виды цитокинов

1.Интерлейкины (ИЛ) и  фактор некроза опухолей (ФНО)
2.Интерфероны.
3.Малыецитокины.
4. Колониестимулирующие факторы  (КСФ).

Функциональная классификация цитокинов

1.       Провоспалительные, обеспечивающие мобилизацию воспалительного ответа (интерлейкины 1,2,6,8, ФНОα, интерферон γ).
2. Противовоспалительные, ограничивающие развитие воспаления (интерлейкины 4,10, TGFβ).
3. Регуляторы клеточного и гуморального иммунитета (естественного или специфического), обладающие собственными эффекторными функциями (противовирусными, цитотоксическими).

 

3.Бруцеллез. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

 

Бруцеллы - это мелкие, неподвижные микроорганизмы, имеющие форму коккобактерий и коротких палочек,располагаются отдельными группами. Не имеют спор, некоторые штаммы образуют капсулу. Грамотрицательны. Облигатные аэробы. Высоко требовательны к питательным средам. Элективной средой для их культивирования является печеночный агар, печеночный бульон. Культивируются в аэробных условиях, но при повышенном содержании СО₂.

При выделении из патологического материала в первых генерациях растут медленно, в течение 1-3 недель. Лабораторные культуры формируют колонии через 24-48 часов. Колонии разной величины, бесцветные, с перламутровым оттенком. В жидких средах наблюдается помутнение. Биохимическибруцеллы малоактивны. Источником инфекции являются больные животные. Люди, болеющие бруцеллезом, как источник инфекции практически не опасны. Основные пути заражения - алиментарный или контактно-бытовой. Бруцеллы проникают в организм через неповрежденные кожу и слизистые оболочки. Материал для исследования - кровь. Основной метод диагностики - серологическое исследование (реакции Райта или Хейдельсона), а также постановка аллергической диагностической пробы с бруцеллином (р.Бюрне). Разработаны тест-системы для реализации методов иммуноиндикации и молекулярно-генетических методов. Бактериологическое исследование проводится только в лабораториях строгого режима.

 

4.Особенности противовирусного иммунитета. Внутри- и внеклеточные механизмы устойчивости к вирусам.

( СМОТРЕТЬ КАРТИНКУ, ТАК КАК НАПИСАНО КРАТКО)

 

Существование вирусов в двух (внеклеточной и внутриклеточной) формах предопределяют и особенности иммунитета при вирусных инфекциях. В отношении внеклеточных вирусов действуют те же неспецифические и специфические механизмы антимикробной резистентности, что и в отношении бактерий. Для защиты от внутриклеточного вируса в ходе эволюции клетки приобрели способность вырабатывать особый белок – интерферон - это природный белок, обладающий противовирусной активностью в отношении внутриклеточных форм вируса. Он нарушает трансляцию и-РНК на рибосомах инфицированных вирусом клеток, что ведет к прекращению синтеза вирусного белка. Специфичность интерферона иная. Она носит видовой характер, т.е. человеческий интерферон ингибирует репродукцию вирусов в клетках человека, мышиный - мыши и т.д. Интерферон обладает и противоопухолевым действием, что является косвенным свидетельством роли вирусов в возникновении опухолей. Образование интерферона в клетке начинается уже через 2 часа после заражения вирусом, т.е. намного раньше, чем его репродукция, и опережает механизм антителообразования. Интерферон образуют любые клетки, но наиболее активными его продуцентами являются лейкоциты и лимфоциты. В последние годы разработан широкий круг препаратов индукторов эндогенного интерферона. Их применение предпочтительнее, нежели введение экзогенного интерферона.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65              Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 23              1.Методы выделения чистых культур.                      2. Реакция преципитации. Способы её постановки.      3. Сибирская язва Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Терапия.          4. Хламидии; особенности биологии, методы культивирования, классификация, роль в патологии человека.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1.Методы выделения чистых культур.

Чистая культура – бактерии одного вида, выращенные на питательной среде. Методы выделения чистых культур:  1. Методы механического разобщения бактерий на твердой питательной среде. Один из них – метод штриха с обжиганием петли. Взяв материал стерильной петлей, его наносят частыми штрихами на ограниченную поверхность питательной среды в чашке Петри, затем петлю обжигают. Остудив петлю, через засеянную поверхность проводят 2-3 штриха в сторону свободной поверхности среды. Петлю вновь обжигают. Остудив рассеивают нанесенный материал широкими штрихами навстречу первым. По окончании работы обжигают петлю. Такая техника позволяет разделить бактериальные клетки и получить изолированные колонки (потомство одной клетки), т.е. чистую культуру. 2. Методы, основанные на биологических особенностях бактерий. К ним относятся: Использование элективных питательных сред (на них подавляется рост других бактерий за счет изменения питательности, pН среды или ее Еh- потенциала. Например, низкая питательность и щелочная pНпептонной воды делает ее элективной для холерного вибриона, а добавление солей натрия в высоких концентрациях в желточный агар (для стафилококков); Использование различных температурных режимов роста.Выделение чистой культуры лежит в основе бактериологического исследования – важнейшего метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Цель его – выделение чистой культуры и ее идентификация, что позволяет правильно поставить диагноз инфекционного заболевания. ЭТАПЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ. 1. Первичная микроскопия исследуемого материала (необязательныйэтап). 2. Первичный посев с целью выделения чистой культуры. 3. Накопление чистой культуры. 4. Изучение биологических свойств выделенной чистой культуры и ее окончательная идентификация.

 

 

2. . Реакция преципитации Способы её постановки.

 

 

 

3.Сибирская язва. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

Возбудитель сибирской язвы относится к семейству Bacillaceaeanthracis. B.anthracis - это крупные палочки с прямыми концами, неподвижны. В мазках располагаются парами, часто - цепочками. В организме образуют капсулу. В неблагоприятных условиях внешней среды при доступе кислорода образуют споры. Споры располагаются центрально, имеют овальную форму и по диаметру не превышают ширину клеток. При попадании в благоприятную среду в течение нескольких часов споры прорастают и дают начало вегетативной форме. Грамположительные. Факультативные анаэробы. Нетребовательны к питательным средам. На мясо-пептонномагаре через 24 часа формируются характерные колонии. Они серебристо-серые, зернистые, диаметром 3-5 мм, с бахромчатыми краями и отходящими от них пучками нитей. Основным фактором вирулентностиB.anthracis является капсула. Мутанты, дефектные по образованию капсулы, авирулентны и используются в качестве вакцинных штаммов. Другой важный фактор вирулентности - токсинобразование. Сибирская язва - зоонозная инфекция. Люди заражаются при уходе за больными животными, разделе туш вынужденно забитых больных животных, употреблении в пищу их мяса, выделке шкур погибших животных.  Материал для исследования определяется клинической формой болезни; это содержимое сибиреязвенного карбункула, мокрота, кровь, фекалии. Для обнаружения возбудителя используют микроскопию мазков из патологического материала, методы иммуноиндикации. Бактериологическое исследование проводится только в лабораториях строгого режима. Для лечения сибирской язвы помимо антибиотиков (пенициллинового и тетрациклинового ряда) используют специфическую противосибиреязвенную сыворотку или специфический γ-глобулин. Специфическая профилактика проводится живой сибиреязвенной вакциной. На основе “протективного” антигена разработана также химическая сибиреязвенная вакцина.

 

4. Хламидии, особенности биологии, формы хламидий, методы культивирования, классификация.  Chlamydiatrachomatis. Роль в патологии человека.

Хламидии относятся к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia. Хламидии - прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Это “энергетические паразиты” клеток. Для них характерен уникальный цикл развития, включающий две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования. Это элементарные и инициальные (ретикулярные) тельца. Хламидии - кокковидные бактерии (0,3-1,5 мкм), неподвижны, капсул не образуют. Грамотрицательны. Цикл развития хламидий протекает в цитоплазматических включениях. Проникшие в клетку элементарные тельца (инфекционная форма) превращаются в ретикулярные тельца (вегетативная форма). Они размножаются путем бинарного деления и превращаются в элементарные тельца нового поколения. Такой цикл продолжается 40-72 часа и обычно завершается разрывом клетки и выходом элементарных телец хламидий в межклеточное пространство. Помимо такого репродуктивного цикла в неблагоприятных условиях реализуются и другие механизмы взаимодействия хламидий с клеткой хозяина. Это деструкция хламидий в фагосомах, L-подобная трансформация и персистенция. Трансформированные и персистентные формы хламидий способны реверсировать в исходные (ретикулярные) формы с последующим преобразованием в элементарные тельца, т.е. в инфекционные частицы. Для культивирования хламидий используют культуру тканей или развивающиеся куриные эмбрионы. Хламидии имеют групповой, видоспецифические и вариантспецифические антигены. C.trachomatisсероваров А, В, ВА и С являются возбудителями трахомы, конъюнктивитов с включениями; C.trachomatisсероваров D, E, F, G, H, I, J, К - урогенитальных хламидиозов, а сероваров L1, L2, L3 – венерической лимфогранулемы. Источником хламидийной инфекции является человек. Путь заражения - половой. Кроме того, возможно инфицирование новорожденных при прохождении через родовые пути больной матери и трансплацентарное инфицирование плода. При трахоме - контактно-бытовой путь заражения. C.trachomatisсероваров D...K обладают тропизмом к столбчатому эпителию мочеполового тракта. Клинические проявления хламидийной инфекции весьма разнообразны. Это уретриты, эпидимиты, простатиты, цервициты, эндометриты. В 30-50% случаев заболевание протекает бессимптомно. Хламидийная инфекция обуславливает развитие бесплодия, патологии беременности и плода. При инфицировании плода хламидии могут вызывать внутриутробное поражение головного мозга, органов зрения и слуха,

пневмонии, гастроэнтериты и т.д Источником является больной, путь передачи - воздушно-капельный.Средством этиотропной терапии хламидийной инфекции являются антибиотики. Препараты выбора - тетрациклины и макролиды. Специфическая профилактика не разработана

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                             «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 24              1.Стерилизация и её методы.                      2. Аллергия. Биологическое значение. Аллергия и иммунитет. Виды               аллергических состояний. Инфекционная аллергия. Механизмы развития               аллергических реакций. Два типа аллергических реакций      3. Внутрибольничные инфекции. Определение понятия. Основные возбудители. Госпитальные штаммы, рестрикционный анализ.      4. Репликация вирусных нуклеиновых кислот.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1.Стерилизация и её методы.

Стерилизация – уничтожение как вегетативных, так и споровых формбактерий. Для достижения стерильности в условиях баклаборатории используют различные методы стерилизации. Есть 3 группы методов стерилизации: 1. Физические (бактерии уничтожаются под действием физических агентов). К ним относятся: – прокаливание в пламени – для стерилизации бакпетель, шпателей и т.д. – стерилизация сухим паром в печах Пастера (сухо-жаровых шкафах) – для стерилизации посуды. – стерилизация паром под давлением в автоклаве – для стерилизации простых питательных сред, физиологического раствора, посуды, для убивки заразного материала.

– стерилизация текучим паром в аппарате Коха или в автоклаве при 0,5 атм (100°С) – для стерилизации сред с углеводами. – дробная стерилизация (обработка 60-90°С с последующим проращиванием спор при комнатной температуре и уничтожением образовавшихся вегетативных форм при повторной термообработке. Такая обработка осуществляется троекратно в течение 3-х суток) – для стерилизации белковых сред, молока.  – стерилизация магнитными полями (СВЧ, УФ) – для стерилизации помещений, сред. 2. Химические (бактерии уничтожаются под действием химических агентов). Химическую стерилизацию называют дезинфекцией, а используемые для этого химические соединения (например, фенол, производные хлора) называют дезинфектантами. Используется для обработки помещения, рабочего места и убивки заразного материала. Дезинфектанты токсичны! 3. Механические (или стерилизация фильтрованием), используются специальные бактериальные фильтры, размеры пор которых меньше размеров бактерий. Так стерилизуют гормоны, витамины, ферменты, антибиотики и другие вещества, легко разрушающиеся при термической обработке. Запомните: кровь не стерилизуют! Кровяной агар готовят, сохраняя стерильность взятой крови при добавлении к простерилизованной мясо-пептонной основе.

 

3.                   Внутрибольничные инфекции: определение, основные возбудители. Госпитальные штаммы. Рестрикционный анализ.

Внутрибольничные инфекции называют еще нозокомиальными, или госпитальными инфекциями. Наиболее восприимчивыми к внутрибольничным инфекциям являются пациенты хирургических (92%) и урологических отделений, а также родовспомогательных учреждений. Количество внутрибольничных инфекций сильно зависит от мощности лечебных учреждений, т.е. объема проводимых диагностических и лечебных инвазивных манипуляций, количества персонала, контактирующего с пациентами, а также от характера заболеваний пациентов, их восприимчивости к инфекции, использования в терапии иммунодепрессивных препаратов. Заболеваемость внутрибольничными инфекциями может быть спорадической, а могут быть и эпидемические вспышки этих инфекций. При этом как в том, так и в другом случае возможны различные варианты их проявления.  Группой наиболее высокого риска являются новорожденные и лица старше 65 лет, т.е. лица с ослабленной иммунной защитой. Отмечаемый в настоящее время рост внутрибольничных инфекций связан не только с понижением иммунобиологической резистентности людей и изменением медицинских технологий, но и с изменением биологических

свойств микроорганизмов - возбудителей этих заболеваний. В стационарах различного профиля складываются специфические микроэкологические условия, особенности которых определяют характер и возможности формирования госпитальных штаммов возбудителей, адаптировавшихся к конкретным больничным учреждениям. Уже из определения понятия внутрибольничная инфекция видно, что оно объединяет большую группу различных эндогенных и экзогенных инфекционных заболеваний, в формировании которых может принимать участие множество видов как патогенных, так и условно-патогенных возбудителей бактериальной, грибковой, вирусной и протозойной природы. Наиболее частыми возбудителями внутрибольничных инфекций являются: – грамположительные кокки:Staphylococcusaureus, Staphylococcusepidermidis, Streptococcuspyogenes и Enterococcusfaecalis; – грамотрицательные (аэробные и факультативно-анаэробные) палочки: Pseudomonasaeruginosa, Klebsiellapneumoniae, Рroteusmirabilis, Proteusvulgaris, Escherichiacoli, Serratiamarcescens, Salmonellatyphimurium; – грамположительные и грамотрицательные, чаще анаэробные палочки (например, Clostridiumdifficile, Bacteroidesfragilis, Fusobacteriummortiforum); – дрожжеподобные грибы. Основными путями передачи внутрибольничных инфекций являются воздушно-капельный и контактно-бытовой, однако помимо них могут быть и специфические пути передачи - инструментальный, имплантационный, ангиогенный (постинфузионный, посткатетеризационный). К числу важнейших условий, определяющих возникновение и течение внутрибольничных инфекций, относятся: − формирование у больных при лечебно-диагностических манипуляциях необычных входных ворот инфекции с непосредственной доставкой возбудителя в кровеносное русло, органы и системы; − развитие процесса в замкнутом ограниченном пространстве стационара среди людей, ослабленных основным заболеванием, оперативным вмешательством или травмой. Источником инфекции являются больные, бактерионосители и внешняя среда стационара (факультативный паразитизм). Основной метод диагностики внутрибольничных инфекций бактериологический. Основным направлением борьбы с внутрибольничными инфекциями является их неспецифическая профилактика.

 

4.                   Репликация вирусных нуклеиновых кислот

 

У ДНК-овых вирусов при репликации вирусной ДНК происходит как в

прокариотических или эукариотическихклетках при участии клеточной ДНК-

зависимой ДНК-полимеразы. У однонитевых ДНК-вирусов вначале

образуется комплементарная нить (так называемая репликативная форма),

которая служит матрицей для дочерних молекул ДНК.

Реализация содержащейся в ней генетической информации происходит

следующим образом. При участии ДНК-зависимой РНК-полимеразы

синтезируются и-РНК, которые поступают на рибосомы клетки, где и

синтезируются вирусспецифические белки. У двунитевых ДНК-овых вирусов,

геном которых транскрибируется в цитоплазме клетки хозяина, это

собственный геномный белок. Вирусы, геномы которых транскрибируются в

ядре клетки, используют содержащуюся там клеточную ДНК-зависимую РНК-

полимеразу.

У РНК-содержащих вирусов процессы репликации их генома,

транскрипции и трансляции генетической информации осуществляются

иными путями.

Репликация вирусных РНК, как минус, так и плюс-нитей,

осуществляется через репликативную форму РНК (комплементарную

исходной), синтез которой обеспечивает РНК-зависимая РНК-полимераза.

Это геномный белок, который есть у всех РНК-овых вирусов. Репликативная

форма РНК минус-нитевых вирусов (плюс нить) служит не только матрицей

для синтеза дочерних молекул вирусной РНК (минус нитей), но и выполняет

функции и-РНК, т.е. идет на рибосомы и обеспечивает синтез вирусных

белков (трансляция). 84

У плюс-нитевых РНК-овых вирусов функцию трансляции выполняют ее

копии, синтез которых осуществляется через репликативную форму (минус

нить) при участии вирусных РНК-зависимых РНК-полимераз.

У некоторых РНК-овых вирусов (ретровирусы) имеется совершенно

уникальный механизм транскрипции, который обеспечивается

специфическим вирусным ферментом ревертазой (обратной транскриптазой),

и называется обратной транскрипцией. Он состоит в том, что в начале на

матрице вирусной РНК при участии обратной транскриптазы образуется

транскрипт, представляющий собой одну нить ДНК. На нем синтезируется

вторая нить и формируется двунитевой ДНК-транскрипт. С него обычным

путем через образование и-РНК происходит реализация информации

вирусного генома

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 25              1 Бактериальные биопленки. Строение. Значение.                      2.Иммунный статус. Тесты I и  II уровня.      3.Неклостридиальные анаэробы. Их характеристика. Роль в норме и патологии. Принципы лабораторной диагностики и терапии      4.Вирусы гепатитов С, D, Е. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика.                Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1.Бактериальные биопленки. Строение. Значение.

В настоящее время нормальную микрофлору рассматривают как самостоятельный  экстракорпоральный орган. Он имеет характерное анатомическое строение (биопленка) и  ему присущи определенные функции. Микроорганизмы, составляющие нормальную микрофлору, образуют четкую морфологическую структуру - биопленку, толщина которой колеблется от 0,1 до 0,5 мм. Биопленка представляет собой полисахаридный каркас, состоящий из микробных полисахаридов и муцина, который продуцирует клетки макроорганизма. В каркасе  иммобилизованы микроколонии бактерий - представителей нормальной микрофлоры,  которые могут располагаться в несколько слоев.  Так, в биопленке покрывающей кожу, микроколонии располагаются в 1-2 слоя; а в биопленке толстого кишечника в 500-1000 слоев. Устойчивость бактерий к воздействию  неблагоприятных факторов внутри биопленки в десятки и сотни раз выше по сравнению с  неиммобилизованными клетками. В состав нормальной микрофлоры входят как  анаэробные, так и аэробные бактерии. Соотношение анаэробов и аэробов в большинстве  биоценозов составляет 10:1.

 

2.Иммунный статус Тесты I и  II уровня.

 

 

 

 

3.Неклостридиальные анаэробы. Их характеристика. Роль в патологии. Принципы микробиологической диагностики.

По своим морфологическим и тинкториальным свойствам неклостридиальные анаэробы делятсяна грамположительные кокки, грамотрицательные кокки, грамположительные палочки, грамотрицательные палочки. Факторами патогенности неклостридиальных анаэробов являются адгезины, капсулы, эндотоксины, ферменты агрессии и защиты. Неклостридиальные анаэробы входят в состав нормальной микрофлоры организма человека, все они являются условно-патогенными микроорганизмами. Вызывают гнойно-воспалительный заболевания, возникающие, в основном, как эндогенная инфекция. Материалом для исследования является содержимое очагов поражения. Основным методом микробиологической диагностики неклостридиальной инфекции является бактериологическое исследование. Для обнаружения характерных продуктов метаболизма анаэробных бактерий используется методика, основанная на хроматографическом исследовании образцов. Для этиотропной терапии используют метронидазол, клиндамицин и другие антибиотики, активные в отношении анаэробов. Специфическая профилактика не разработана.

 

 

4.Вирусы гепатитов С, D, Е. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика.

 

Вирусный гепатит — это системное инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением печени. В результате поражения клеток печени и развивающегося острого воспаления нарушается функция этого жизненно важного органа.

Гепатит D. Он представляет собой дефектный РНК-вирус величиной 35-37 нм. Вирион имеет однотитевую РНК, покрытую внешней оболочкой. Антигены вируса - это внутренние белки оболочки (D-антиген) и HВs-АГ вируса гепатита В, который также содержится в оболочке вируса. Этот вирус не способен к самостоятельной репликации в организме хозяина, так как синтез белков его внешней оболочки обеспечивает вирус гепатита В. Таким образом, гепатит D развивается только при одновременном инфицировании вирусом гепатита В и дельта-вирусом и может протекать в виде суперинфекции или коинфекции. Микробиологическая диагностика гепатита D основана на обнаружении антител к D-АГ дельта-вируса в сыворотке крови больного c помощью метода иммуноферментного анализа (серологическое исследование). Первый маркер инфекции - вирусспецифические антитела класса IgM. Они появляются на 10-15 день болезни. Через 4-11 недель их сменяют антитела класса IgG, постоянно циркулирующие у инфицированных лиц. Также в микробиологической диагностике гепатита D используют ПЦР или метод молекулярной гибридизации для выявления вирусной нуклеиновой кислоты.

Гепатит С. Его вирион сферической формы, диаметром 35-65 нм, содержит однонитевую плюс-нить РНК, геномные ферменты, участвующие в репликации вируса, и имеет суперкапсиднуюоблочку. В составе вирусной частицы присутствуют ядерный - капсидный (С) - и поверхностный - суперкапсидный (E1, E2) гликопротеиновые антигены. Основной метод микробиологической диагностики – иммуноиндикация и серологическое исследование (ИФА). Выявление антигенов вируса возможно в ранние сроки болезни, а антител к вирусу - в сравнительно поздние сроки заболевания.

Гепатит Е. Он также является РНК-содержащим вирусом, не имеющим суперкапсидной оболочки. Диаметр его нуклеокапсида 32-34 нм. По последним данным, вирус возможно, является прототипом для нового семейства вместе с вирусом краснухи. Микробиологическая диагностика гепатита Е. На практике диагноз гепатита Е в настоящее время ставят методом исключения. Достоверно диагноз подтверждают методы микробиологической диагностики. Методом ранней диагностики заболевания является иммуноиндикация - иммуноэлектронная микроскопия (ИЭМ) образцов фекалий, взятых в острой фазе заболевания, но этот метод недоступен для рутинного использования. Поэтому основным методом микробиологической диагностики является cерологическое исследование. С этой целью проводится ИФА по определению антител к антигену вируса гепатита Е в разведениях парных сывороток больного

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 26              1. Санитарно-микробиологическое исследование почвы, воды и воздуха. 2. Иммуноиндикация. Реакции иммунитета, используемые для иммуноиндикации.      3. Столбняк. Биология возбудителя. Серотерапия и серопрофилактика. Активная иммунизация. Лабораторная диагностика.          4.Продуктивная вирусная инфекция. Периоды ее течения. Их характеристика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

Санитарно-микробиологическое исследование почвы, воды и воздуха.

Основной целью санитарно-микробиологического исследования является обеспечение населения доброкачественной водой. Задачей санитарно-микробиологического исследования является текущий санитарный надзор за качественной питьевой водой (централизованного и нецентрализованного водоснабжения), государственный санитарный контроль за качеством воды в водоемах (особенно в местах водозабора), на очистных сооружениях. Особое внимание уделяется санитарно-микробиологическому исследованию воды плавательных бассейнов, которое необходимо проводить в порядке текущего контроля и по эпидемиологическим показаниям, а также выявление водных вспышек инфекционных заболеваний и предупреждение их возникновения. Воздух является средой, в которой микроорганизмы не способны размножаться, что обусловлено отсутствием в воздухе питательных веществ, недостатком влаги, губительным действием солнечных лучей. Жизнеспособность микроорганизмов в воздухе обеспечивается нахождением их в частицах воды, слизи, пыли, кусочках почвы. Микрофлору воздуха условно разделяют на постоянную или резидентную (автохтонную) и транзиторную или временную (аллохтонную). К представителям резидентной (автохтонной) микрофлоры, которая в  основном формируется за счет микроорганизмов почвы, относятся пигментообразующие кокки (Micrococcusroseus, Micrococcusflavus, Sarcinaflava, Sarcinaalba), бациллы (Bacillussubtilis, Bacilluscereus, Bacillusmacerans), актиномицеты (Actinomycesspp.), грибы (Penicillumspp., Aspergillusspp.), дрожжеподобные грибы рода Candida. Транзиторная (аллохтонная) микрофлора воздуха формируется преимущественно за счет микроорганизмов почвы, а также за счет видов, поступающих с поверхности водоемов и из организма людей и животных. Чтобы оценить роль почвы в передаче возбудителей инфекционных болезней, необходимо знать продолжительность сохранения и размножения  представителей нормальной микрофлоры тела человека и животных, и патогенных бактерий в почве. Патогенные для человека бактерии, которые могут быть обнаружены в почве, можно разделить на три группы:  К первой группе относится небольшое число постоянно обитающих в почве микроорганизмов, например, клостридии ботулизма, которые попадают в почву с испражнениями человека и животных и, образуя споры, сохраняются в ней. Вторая группа включает спорообразующие патогенные микроорганизмы (бациллы сибирской язвы, клостридии столбняка, газовой гангрены), которые также попадают в почву с фекалиями человека и выделениями животных.  В третью группу включены патогенные микроорганизмы, попадающие в почву с выделениями человека и животных, и сохраняющиеся в течение нескольких недель, реже месяцев. Это сальмонеллы, шигеллы, вибрионы, бруцеллы, францизеллы, микобактерии, лептоспиры, возбудители сапа и др. Они не образуют спор и поэтому быстро гибнут в результате воздействия различных физических и биологических факторов.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2.Иммуноиндикация. Реакции иммунитета, используемые для иммуноиндикации.

 

 

 

3.Столбняк. Биология возбудителя. Серотерапия и серопрофилактика. Активная иммунизация. Лабораторная диагностика.   

Семейство Clostridiaceaрод Clostridiumвид C.tetani - это крупные палочки. Образуют споры, расположенные терминально (что делает их похожими на барабанную палочку), перитрихи. Капсул не образуют. Грамположительные. C.tetani - облигатные анаэробы. На плотных питательных средах образуют шероховатые, гладкие,

прозрачные, серовато-желтые колонии средней величины, которые распространяются по среде в виде сети тонких нитей. При посеве в столбик полужидкогоагара формируют колонии в виде чечевичек или пушинок с плотным коричневым центром. C.tetani не расщепляют углеводов, обладают слабыми протеолитическими свойствами.  Все C.tetani имеют общий О-антиген, а по специфическим жгутиковым антигенам подразделяются на 10 сероваров. Главным фактором патогенности является столбнячный экзотоксин. Он состоит из двух фракций: тетаноспазмина и тетанолизина. Тетаноспазмин проникает в ЦНС, распространяясь по периневральным пространствам, кровеносным и лимфатическим сосудам. Он фиксируется ганглиозидами клеток спинного мозга и ствола головного мозга. Токсин блокирует освобождение ингибиторного медиатора в синапсах двигательных нервов, что приводит к развитию резко выраженнойгиперфлексии и резких спазмов скелетных мышц в ответ на любое раздражение. Нарушается также синаптическая передача в мионевральных соединениях, возможно, вследствие накопления ацетилхолина. Тетанолизин (тетаногемолизин) обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным действием. C.tetani распространены во всем мире; они находятся в почве, в навозе лошадей и других животных. В почве в виде спор они могут сохраняться десятилетиями. Заражение происходит при проникновении возбудителя в организм через дефекты кожи и слизистых оболочек при ранениях, ожогах, отморожениях, через операционные раны. При инфицировании пуповины возможно развитие столбняка у новорожденных. Больной столбняком не заразен для окружающих. C.tetani не являются инвазивными микроорганизмами. Возбудитель

остается на месте внедрения в области поврежденных тканей, в которые проникли споры. Столбняк тяжелое заболевание, ведущим проявлением которого является судорожный синдром, включающий болезненные сокращения и длительное напряжение мышц. Смерть обычно наступает в результате нарушения дыхания. Летальность при столбняке остается высокой и составляет около 50%. После перенесенной болезни иммунитет не вырабатывается. Микробиологическая диагностика основана на обнаружении в крови больного столбнячного токсина. С этой целью используют биопробу на мышах и реакцию токсиннейтрализации. Обязательным средством этиотропной терапии столбняка является применение противостолбнячной антитоксической сыворотки или противостолбнячного человеческого иммуноглобулина. Для создания искусственного активного иммунитета в плановом порядке проводится вакцинация анатоксином, который входит в состав АДС, АКДС или секстанатоксина.

При обширных ранах проводят экстренную профилактику противостолбнячным человеческим иммуноглобулином и столбнячным анатоксином.

 

4.Продуктивная вирусная инфекция. Периоды ее течения. Их характеристика

Инфекция — заражение живых организмовмикроорганизмами, а также вирусами, прионами

Продуктивная вирусная инфекция. Начальный период. 1.Адсорбция  вирионов на клетке осуществляется при наличии рецепторов: - неспецифическая – за счет  электростатических сил; затем переходит в специфическую фазу, при которой прикрепительные белки вируса «узнают» комплементарные им рецепторы и прочно с  ними связываются. 2.Проникновение вирионов в клетку происходит путем рецепторного эндоцитоза   или путем слияния мембран суперкапсида вируса и клетки, или их  сочетание.  3.Депротеинизация вирусов - это освобождения его НК. Вирусы, проникшие  в клетку путем рецепторного эндоцитоза и находящиеся в рецептосоме, покидают ее  путем слияния мембран , если это сложные вирусы, и, возможно, при участии капсидных  поверхностных белков, если это простые вирусы, при этом происходит частичная  депротеинизация вирусов под действием ферментов, находящихся в мембране  рецептосомы и лизосомальных ферментов. Частично дезинтегрированные вирусы  поступают в цитоплазму, где продолжается их «раздевание» с помощью протеаз  внутриклеточных мембран. В результате депротеинизации происходит дезинтеграция  вириона - на белок и нуклеиновую кислоту. Такое «раздевание» вируса производит  клетка с помощью своих лизосомальных ферментов. Освобожденная геномная НК  приобретает способность индуцировать репродукцию вирусов. Все события  последующих часов, связаны с нуклеиновой кислотой. Средний этап. Экспрессия вирусного генома начинается  после высвобождения вирусной НК. Реализация генетической программы вируса  начинается с процесса транскрипции с последующей трансляцией и репликацией  вирусного генома, в результате чего образуются компоненты вируса. Существуют два  способа формирования вирусных белков в зависимости от длины и-РНК. Короткие,  моноцистронные и-РНК кодируют отдельный, вирусный белок. Длинные,  полицистронные и-РНК, которые могут содержать всю информацию вирусного генома или ее часть, поступают на полирибосомы, на которых один гигантский полипротеин - предшественник. Этот полипептид нарезается вирусными и клеточными протеазами на  отдельные зрелые вирусные белки как неструктурные так и структурные.  1.У вирусов с двунитевой ДНК эти процессы происходят по универсальной для всего  живого схеме: геномная ДНК – транскрипция – и-РНК – трансляция – белок. Если  трансляция происходит в ядре, то она осуществляется клеточной ДНК-зависимой РНК- полимеразой (транскриптазой), если происходит в цитоплазме, то ее выполняет вирусная  транскриптаза, входящая в состав вириона. 2.У плюс РНК-вирусов геномная РНК одновременно является информационной РНК,  поэтому стадия транскрипции отсутствует и схема укорочена. Геномная плюс РНК – 2 трансляция – белок. Плюс РНК, выполняющая функцию и-РНК, поступает на  полирибосомы и полностью транслируется с образованием гигантского полипептида - предшественника, который нарезается протеазами на отдельные белки – неструктурные и  структурные. 3. Уминус РНК вирусов синтез белка происходит по схеме: геномная минус РНК -  транскрипция – и-РНК – трансляция – белок. Транскрипция осуществляется  собственнымитранскриптазами вирусов, возможно образование как коротких, так и  длинных и-РНК с последующей трансляцией зрелых белков .  4. Ретровирусы (возбудители ВИЧ инфекции, онкогенные вирусы) имеют диплоидный  геном, состоящий из двух идентичных молекул плюс РНК и фермент РНК зависимую  ДНК полимеразу (обратную транскриптазу или ревиртазу). Схема синтеза белка у  ретровирусов: геномная РНК – комплементарная ДНК (провирус) – транскрипция –  и-РНК – трансляция – белок. Заключительный период. Формирование вириона из отдельных компонентов вируса у большинства вирусов  осуществляется в цитоплазме. Простые вирусы образуются путем самосборки при взаимодействии НК вируса и  капсидных белков. У сложных вирусов формируется сначала нуклеокапсид, который  взаимодействуют с модифицированными мембранами клетки, одевается   суперкапсидной оболочкой, у некоторых вирусов под суперкапсидом формируется слой  матриксного белка (М-белок).  Выход вириона из клетки происходит или при разрушении, лизисе клетки, или путем  почкования.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                   Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология          Лечебное дело 060101.65              Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 27             1. Бактериофаг: основные свойства, практическое применение.                      2. Реакция лизиса. Компоненты, участвующие в этой реакции иммунитета.      3. Дифтерия. Биология возбудителя. Иммунитет. Специфическая профилактика.      4. Бартонеллезы. Возбудители антропонозных и зоонозных бартонеллезов. Микробиологическая диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

. Бактериофаг: основные свойства, практическое применение.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2.Реакция лизиса. Компоненты, участвующие в этой реакции иммунитета.

 

 

 

3. Дифтерия. Биология возбудителя. Иммунитет. Специфическая профилактика.

семейству Corynebacteriaceae, рода CorynebacteriumC.diphtheriae - палочки средней величины с булавовидными утолщениями на концах. В мазках нередко имеют характерное расположение под углом друг к другу. В цитоплазме по полюсам клетки локализуются метахроматические гранулы, или зерна волютина, которые выявляются при окраске мазков по методу Нейссера. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Требовательны к питательным средам. Хорошо растут на свернутой сыворотке (среда Ру), образуя характерные изолированные не сливающиеся друг с другом колонии (“шагреневая кожа”). Для выделения коринебактерий используют элективные питательные среды, в частности среду Клауберга, содержащую кровь и теллурит калия. Ее применение основано на резистентности коринебактерий к высоким концентрациям теллурита калия (или натрия), ингибирующим рост сопутствующей микрофлоры. В процессе роста на теллуритовых средах C.diphtheriae восстанавливают это соединение в металлический теллур, аккумулирующийся внутри бактерий, который и обуславливает темный цвет колоний. C.diphtheriae на среде Клауберга образуют колонии трех типов: крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающей цветок маргаритки (биоварgravis); мелкие, черные, выпуклые, с ровными краями (биоварmitis); колонии похожие на колонии обоих типов (биоварintermedius). В жидких средах тип gravis дает зернистый осадок и пленку, mitis - равномерное помутнение бульона. Биохимическая активность C.diphtheriae достаточно высока. Ключевыми признаками, которые используются для дифференциации их от других представителей рода являются: ферментация глюкозы, цистеина (проба Пизу), неспособность разлагать сахарозу и мочевину. К факторам вирулентности C.diphtheriae относятся фимбрии, обеспечивающие их адгезию; ферменты агрессии и защиты (гиалуронидаза, нейраминидаза, протеаза), отвечающие за инвазивность возбудителя. Однако основным фактором вирулентности дифтерийных бактерий является образование экзотоксина, обладающего гистотоксическим, гемолитическим и дермонекротическим действием.  Экзотоксин C.diphtheriae поражает мышцу сердца, сосудистую систему, кору надпочечников, периферическую нервную систему. Дифтерия – антропонозная инфекция. Основные пути передачи - воздушно-капельный и контактно-бытовой. Клинически дифтерия – это системное бактериально-токсическое заболевание. Возбудитель остается на месте входных ворот, а все проявления дифтерии связаны с действием токсина. Дифтерия характеризуется локальным фибринозным воспалением с образованием характерной плотной, спаянной с подлежащей тканью пленки, развитием отека и некроза ткани в месте внедрения возбудителя. Наблюдаются общая интоксикация с поражением сердечно-сосудистой системы, почек и надпочечников, дыхательной мускулатуры, нервной системы. Чаще наблюдается дифтерия зева, гортани (дифтерийный круп), носа, реже - половых органов, кожи, ран.Основным методом микробиологической диагностики дифтерии является бактериологическое исследование, для которого материал берется из очага поражения. Возможно обнаружение экзотоксина в крови больного с помощью методов иммуноиндикации. Для лечения дифтерии обязательным является применение противодифтерийной антитоксической сыворотки. Антибиотики назначаются по показаниям. Специфическая профилактика дифтерии проводится дифтерийным анатоксином. Он может использоваться как в виде отдельного препарата, так и в комбинации со столбнячным анатоксином (АДС-анатоксин), или в форме АКДС-вакцины (ассоциированная коклюшно-дифтерийно- столбнячная вакцина).

 

 

4.Бартонеллезы. Возбудители антропонозных и зоонозныхбартонеллезов. Микробиологическая диагностика.

Бартонеллёз— тропическая инфекция, вызываемая бактерией Bartonellabacilliformis, состоящие из острой и хронической стадий. Протекает также в виде, или лихорадки Оройя, или, так называемой, перуанской бородавки.  В типичных случаях болезнь протекает двухфазно. В первой, острой фазе, называемой лихорадкой Оройя (не путать одноимённую фазу с заболеванием!), температура тела повышается до 39 — 40 °С и остается на этом уровне 10 — 30 дней, затем медленно снижается. Лихорадка сопровождается выраженными явлениями интоксикации, ознобом, проливным потом. Отмечаются сильная головная боль, костные, суставные и мышечные боли, общее недомогание, бессонница, бред или апатия, снижение аппетита, тошнота, рвота. На коже появляются кровоизлияния, печень и селезенка увеличены, возможна желтуха. Диагностика. Выделение возбудителя. Биопсия с последующей микроскопией биопсийного материала (ткани кожных узелков, лимфатических узлов или внутренних органов), импрегнированного серебром. Серологические методы. Этиотропная терапия бартонеллеза включает антибиотики: левомицетин по 0,5 г 3-4 раза в сутки; стрептомицин внутримышечно по 0,5-1,0 г в сутки; тетрациклины (природные или полусинтетические) по 0,2 г 4 раза в сутки. В острой фазе бартонеллеза и отдельном виде лихорадке Оройя высокоэффективен новарсенол внутривенно по 0,3-0,45 г однократно каждые 3-4 дня. В последние годы при данном заболевании всё чаще назначают фторхинолоны: таривид или ципробай по 200 мг 2 раза в сутки внутривенно капельно (3-5 дней) с последующим переходом на пероральный приём (7-10 дней). Проводят также активную дезинтоксикационную и антианемическую (включая гемотрансфузии) терапию, назначают гепатопротекторы, высокие дозы витаминов Е, С, В12, фолиевую кислоту, антигипоксанты и предшественники макроэргов (цитохром С, цито-МАК и др.)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология          Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 28             1. Антибиотики. Определение. Классификация антибиотиков. Практическое применение антибиотиков. Осложнение антибиотикотерапии.                      2. Серодиагностика инфекционных заболеваний.      3. Микоплазмы. Особенности биологии. Микоплазма-пневмония инфекции. Возбудитель. Клинические проявления. Микробиологическая диагностика.      4. ИППП. Общая характеристика. Основные возбудители.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1. Антибиотики. Определение. Классификация антибиотиков. Практическое применение антибиотиков. Осложнение антибиотикотерапии.

 

Сокращенно: на распечатонном листке

 

 

Антибиотики - это группа соединений природного происхождения или их  полусинтетических и синтетических аналогов, обладающих антимикробным или  противоопухолевым действием.  В основу классификации положено несколько признаков 1. По способу получения их делят на синтетические и полусинтетические - среди  продуцентов актиномицеты, плесневые грибы, бактерии - полимиксины; высшие растения  - (фитонциды); из тканей животных и рыб (эритрин). 2. По направленности действия - на антибактериальные, противогрибковые,  противоопухолевые.  6. По спектру действия: - препараты широкого спектра действия - (цефалоспорины, макролиды) - препараты узкого спектра действия (циклоспорин, ленкомицин). Классификация, основанная на химическом строении: 1 - лактамные антибиотики  - азотсодержащие гетероциклические соединения - в основе их молекулы лежит  лактамное кольцо. Они включают природные пенициллины, цефалоспорины,  монобактамы, карбопенемы.  2. Аминогликозиды - содержат аминосахара, соединенные гликозидной связью с  остальной частью молекулы - стрептомицин, гентамицин, канамицин, мономицин.  З.Тетрациклины - основу молекулы составляет полифункциональное гидронафтеновое  соединение с родовым названием тетрациклин. Это антибиотики широкого спектра  действия.  4. Макролиды - характеризуются наличием в их молекуле макроциклического  лактонного кольца. К ним относятся эритромицины, карбомицин, олеандомицины.  5. Линкозамиды - их фармакологические свойства близки к макролидам - далацин С.  6. Гликопептиды - содержат в молекуле замещенные пептидные соединения ванкомицин, тейкоплатин.  7. Полипептиды - содержат в молекуле остатки полипептидных соединений -  грамицидин, полимиксины, ванкомицин.  8. Полиеновые - к данной группе относятся нистатин, леворин, амфотерицин В.  Механизмы их действия связаны с адсорбцией на цитоплазматической мембране грибов и  взаимодействие с ее стерольным компонентом. 9. Антрациклиновые - противоопухолевые, рубомицин, акларубицин.  Механизмы антимикробного действия. В основе антимикробного действия антибиотиков (как и других  химиотерапевтических средств), лежит нарушение метаболизма микробных клеток. По механизму антимикробного действия антибиотики можно разделить на  несколько групп: 1.Ингибиторы синтеза клеточной стенки - это группа лактамных антибиотиков  (пенициллины, цефалоспорины), монобактамы, карбапинемы, ванкомицин. Механизм  антибактериального действия всех пенициллинов связан с нарушением синтеза клеточной  стенки за счет блокирования пептидоглинканамуреина. Таким образом, пенициллины действуют только на растущие клетки, в которых осуществляется биосинтез  пептидогликана.  2.Антибиотики, нарушающие функции цитоплазматической мембраны - полиеновые  и полимиксины. Повреждения могут быть самыми различными - блокирование  фосфолипидного или белковых компонентов; нарушение проницаемости мембран. У  полимиксинов бактерицидное действие связано с нарушением осмотической  резистентности цитоплазматической мембраны.  Полиеновые антибиотики - включают нистатин, леворин. Используются как  противогрипковые. Механизм действия -связывание эргостерола (только у грибов) цитоплазматической мембраны с последующим выходом низкомолекулярных  соединений из клетки.  З.Подавляющие белковый синтез - основной механизм действия большинства  препаратов - нарушение функциональных свойств рибосом. Это самая многочисленная и  разнообразная по химической структуре группа антибиотиков природного происхождения  – аминогликозиды (блокирование субъединиц рибосомы 30 S и нарушает считывание  генетического кода), макролиды (блокирование субъединиц 50 S тетрациклины.  4.Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот - эти антибиотики обладают не только  антимикробной, но и цитостатической активностью. Поэтому они используются как  противоопухолевые средства - рифампицин, ингибирует ДНК зависимую РНК -  полимеразу, блокируя синтез белка на уровне транскрипции. Обладает широким  антибактериальным спектром, активен в отношении микобактерий туберкулеза.  5.Нарушение биоэнергетических процессов в микробной клетке: нитрофураны - при  этом механизме действия приобретенная устойчивость встречается редко.  Лекарственная устойчивость. Известны 2 типа лекарственной устойчивости-  естественная (природная) и приобретенная. ЕСТЕСТВЕННАЯ - ВИДОВОЙ ПРИЗНАК. Она присуща всем представителям данного  вида. Чаще всего эта резистентность связана с недоступностью мишеней для данного  антибиотика, обусловленной слабой проницаемостью клеточной стенки и цитоплазмы.  Если резистентность существует к нескольким антибиотикам - это полирезистентные бактерии. 2. Приобретенная устойчивость возникает только в результате изменения -©е- генома.  Характеризуется изменением мишени путем приобретения новой генетической  информации. Формирование резистентности может просходить как в результате  мутаций отдельных штаммов бактерий, так и в результате генетической  рекомбиниции между отдельными бактериальными клетками. Приобретенная  резистентность микроорганизмов к антибиотикам может быть первичной , характерной  для бактерий до начала лечения антибиотиками и вторичной, возникающей у бактерий в  процессе лечения антибактериальными препаратами.  Биохимические основы формирования антибиотикорезистентности: 1. Разрушение молекулы антибиотика. Этот механизм лежит, главным образом, в  основе формирования устойчивости кбета — лактамным антибиотикам. 2. Нарушение  проницаемости клеточной стенки - модификация пориновых каналов для  антибактериальных препаратов. Транспорт  антибиотика через внешнюю мембрану к чувствительным мишеням осуществляется  через пориновые каналы. В результате мутаций возможно изменение структуры  липополисахарида, приводящее к полной или частичной утрате пориновых белков.  3.Модификацией структуры - молекулы антибиотика, в результате которой  утрачиваются ее биохимическая активность. Гены, содержащиеся в Ft- плазмидах,  кодируют белки, которые вызывают различные модификации молекул антибиотика путем  ее ацетилирования и т. д. Существует целое семейство генов, определяющих инактивацию того, или иного антибиотика. 4. Изменение структуры чувствительных к действию антибиотиков мишеней.5. Образования бактериями обходного пути метаболизма для биосинтеза белка - мишени, который оказывается нечувствительным к данному химиопрепарату.  6. Формирование механизма активного выведения антибиотика из клетки (эффлюкс).  Этот механизм является наиболее характерным для группы тетрациклинов . Принципы рациональной химиотерапии: 1).назначает врач 2)соблюдены условия чувствительности к антибиотикам 3) назначают по определенной схеме 4) соблюдение минимального курса  Особенности генетического аппарата бактерий:а) ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ: 1. наследственный аппарат бактерий представлен нуклеоидом; 2. в отличие от ядра нуклеид не имеет ядерной мембраны; 3. в нуклеиде нет ядрышек; 4. в нуклеиде одна хромосома; 5. в бактериальной клетке может быть дополнительное наследственное  вещество – плазмида; 6. молекула ДНК хромосомы и плазмиды прикрепляются к ЦПМ. б) МОЛЕКУЛЯРНЫЕ: 1. хромосома бактерий имеет кольцевую структуру; 2. хромосома бактерий – чистая двунитчатая ДНК, не содержит гистонов; 3. в ДНК бактерий повышенное содержание метиллированных (минорных) азотистых оснований, они выполняют защитную функцию гистонов; 4. ДНК бактерий содержит is-последовательности, строение которых аналогично таким же участкам ДНК у высших организмов; 5. отмечается выраженная изменчивость нуклеотидного состава: соотношение гуанина и цитозина (Г/Ц – индекс) у бактерий имеет видовые отличия.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2.. Серодиагностика инфекционных заболеваний.

 

 

3.. Микоплазмы. Особенности биологии. Микоплазма-пневмония инфекции. Возбудитель. Клинические проявления. Микробиологическая диагностика

Микоплазмы выделены в класс Mollicutes, порядок Mycoplasmatalеs, который включает ряд семейств, в том числе семейство Mycoplasmatataceae; последнее делится на 6 родов, из них в патологии человека играют роль представители родов Mycoplasma и Ureaplasma. Микоплазмы - это бактерии. Отличительной биологической особенностью представителей этого семейства является отсутствие у них ригидной клеточной стенки, вместо которой они покрыты трехслойной

“объединяющей” мембраной, т.е. они имеют только одну липопротеиновую мембрану, выполняющую функции собственно цитоплазматической мембраны и клеточной стенки. Микоплазмы резистентны к антибиотикам – ингибиторам синтеза клеточной стенки. Культура микоплазм состоит из “зрелых” (400-1400 нм) клеток и “элементарных” телец (100-250 нм). Последние могут находиться как внутри, так и вне “зрелых” клеток. Микоплазмы отличаются выраженным полиморфизмом, морфология клеток не зависит от вида микоплазм, а определяется условиями культивирования. При выращивании на жидких питательных средах образуется большое количество различных форм, при выращивании на плотных - формируются сгустки протоплазмы неопределенной формы в виде дисков или шариков. Неподвижны. Спор и капсул не имеют. Окрашиваются грамотрицательно. Аэробы и анаэробы. Микоплазмы требовательны к питательным средам; для их культивирования используют сложные питательные среды (сердечно-мозговой агар или бульон с добавлением 30% сыворотки крупного рогатого скота). Температура культивирования 370С в течении 48-96 часов. На плотной питательной среде микоплазмы образуют характерные колонии, напоминающие “яичницу-глазунью”: колонии круглые с зернистой поверхностью и втянутым темным центром; плотно спаяны со средой. Колонии различных видов микоплазм не отличаются. На жидких питательных средах растут, образуя легкое помутнение. Видовая дифференциация микоплазм проводится на основании изучения их антигенной структуры.

. Респираторный микоплазмоз. Возбудителем заболевания является M.pneumoniae - единственный вид этого рода, патогенность которого для человека доказана. Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma.  В антигенном отношении вид однороден, типоспецифических антигенов не обнаружено. M.pneumoniae обладает тропизмом к эпителиальным клеткам дыхательных путей. Вирулентность их связана с наличием гемолитической активности и  способностью оказывать цитотоксическое действие.  Источником инфекции является больной человек, а также носители. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Возбудитель адсорбируется на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, размножается и активно распространяется по слизистой оболочке трахеи  и бронхов, достигая альвеолоцитов. В результате повреждения клеток развивается пневмония. Постинфекционный иммунитет сохраняется в течение 5-10 лет. Он обусловлен как секреторными, так и гуморальными антителами.

Клиническая картина микоплазменной инфекции не имеет патогномоничных только для нее симптомов. Установлена этиологическая роль микоплазм и уреаплазм в возникновении сальпингитов, оофоритов, кольпитов, эндоцервицитов, уретритов, простатитов. Эти микоплазмы выделены при сепсисе, абсцессах мозга; доказана их роль в развитии гломерулонефритов, циститов. Микоплазменная и уреаплазменная инфекции могут быть причиной бесплодия, различной патологии беременности (выкидыши, преждевременные роды, мертворождение плода) и новорожденных. Для микробиологической диагностики применяют бактериологическое исследование, методы серодиагностики, иммуноиндикации, молекулярно- генетические. Этиотропная терапия проводится антибиотиками (тетрациклины, макролиды) и фторхинолонами. Для специфической профилактики пневмонии, вызванной микоплазмами, разработана вакцина.

 

4.ИППП. Общая характеристика. Основные возбудители.

Урогенитальный хламидиози - инфекционное заболевание, передающееся половым путём, вызываемое хламидиями (Chlamydiatrachomatis).

Мочеполовой микоплазмоз и уреоплазмоз-  инфекционное заболевание мочеполовых органов, вызванное микроорганизмами, относящимися к семейству Mycoplasma. Это самые мелкие микроорганизмы, способные автономно жить и размножаться. В световом микроскопе микоплазмы не видны. Микоплазмы способны расти на искусственных питательных средах, размножаются делением и почкованием. Урогенитальные микоплазмы не относят к патогенным микроорганизмам, передаваемым половым путем. Более того, они как симбионты могут размножаться в мочеполовых путях, не вызывая воспалительных процессов. В настоящее время известно более 180 видов микоплазм. Некоторые виды обладают патогенными свойствами: М. hominis, М. genitalium, М. pneumoniae, М. penetrans, U. urealyticum.

Трихомониаз -системное инфекционное воспалительное заболевание, вызываемое простейшим трихомонадой (Trichomonasvaginalis).

Генитальный герпес – днк-содержащий вирус Herpessimplex второго серовара

Остроконечные кондиломы - днк-содержащий вирус они обусловлены вирусной инфекцией, вызываемой возбудителем —вирусом папилломы человека (ВПЧ).

Контагиозный моллюск – – днк-содержащий вирус это вирусная кожная инфекция, которая вызывается одним из вирусов группы оспы- Molluscovirushominis,семейство Poxviridae.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология          Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 29            1. Понятие о химиотерапии. Основные классы химиотерапевтических веществ. Принципы рациональной химиотерапии.                      2. Вакцины: живые, убитые, химические, ассоциированные,               генноинженерные. Понятие о прививочном календаре.      3. Туберкулез, возбудитель. Общая характеристика. Возбудители микобактериозов. Методы диагностики.      4. Возбудитель токсоплазмоза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1.Химиотерапия − это лечение инфекционных и опухолевых

заболеваний химическими препаратами, не являющимися продуктами

реакции организма на возбудителя.

 

По направленности действия все химиопрепараты делятся на:

По химическому строению выделяют несколько групп

химиотерапевтических препаратов..

Производные мышьяка, сурьмы и

висмута, сульфаниламиды, диаминопиримидины, нитрофурановые

препараты, хинолоны, азолы, антибиотики

 

В основу классификации антибиотиков также положено несколько

разных принципов:

По способу получения

по направленности действия

по спектру действия

По химическому строению

 

4.2. Механизмы антимикробного действия

В основе антимикробного действия антибиотиков, как и других

химиотерапевтических средств, лежит нарушение метаболизма микробных

клеток.

 

Химиотерапевтический препарат должен обладать этиотропностью,

т.е. подавлять жизнедеятельность и развитие возбудителя болезни или

опухолевых клеток, или уничтожать его в тканях и средах организма.

Вся химиотерапия в целом всегда является этиотропной, т.е.

направленной на причину заболевания − микроорганизм-возбудитель

заболевания или опухолевые клетки.

Следующее требование − химиопрепараты должны достаточно хорошо

растворяться в воде, т.к. только в таком виде они могут быть доставлены во

внутреннюю среду организма. Для того чтобы соответствовать именно этому

условию, для химиотерапии довольно часто используются соответствующие

производные основного действующего вещества. Малорастворимые или

нерастворимые вещества пригодны только для местного применения.

Химиотерапевтические препараты, с одной стороны, должны быть

достаточно стабильны во внутренней среде организма, но, с другой

стороны, они не должны иметь кумулятивного эффекта (способности

накапливаться в макроорганизме).

Кроме того, вещества, используемые для химиотерапии, должны быть

безвредны. Несмотря на то, что любой химиотерапевтический препарат

обладает тем или иным побочным действием на организм человека, это

действие должно быть по возможности минимальным, а тератогенный

(способность вызывать образование отклонений в развитии) и мутагенный

(способность вызывать мутации) эффекты по возможности отсутствовать.

Это требование к качеству химиопрепаратов (безвредность)

оценивается химиотерапевтическим индексом, который представляет

собой отношение минимальной терапевтической дозы препарата к

максимально переносимой. Очевидно, что, чем меньше

химиотерапевтический индекс, тем лучше препарат; если же этот индекс

близок или равен 1, то такое вещество не может быть использовано как

средство химиотерапии.

 

Принципы рациональной химиотерапии, к сожалению, очень часто

не соблюдаются, хотя достаточно просты и состоят в следующем.

Химиотерапия должна назначаться строго по показаниям, т.е. только

в тех случаях, когда без нее нельзя обойтись, с учетом противопоказаний,

например, повышенной чувствительности или аллергической реакции к

препаратам той или иной группы.

Выбор препарата для химиотерапии может проводиться в различных

вариантах возникающих ситуаций.

При этиологически расшифрованных заболеваниях выбор препарата

должен определяться с учетом чувствительности возбудителя

(антибиотикограмма), выделенного от данного конкретного больного в

результате бактериологического.

При выборе препарата необходимо учитывать данные его

фармакокинетики.

Лечение должно проводиться строго по схеме, рекомендованной для

выбранного химиопрепарата (способ и кратность введения препаратов,

длительность леченияДлительность приема химиопрепаратов должна

составлять как минимум 2-3 дня − в целях профилактики формирования

устойчивых к данному препарату штаммов возбудителей, а также

 

2.Вакцины: живые, убитые, химические, ассоциир

 

3.Туберкулёз. Возбудитель. Общая характеристика. Микробиологическая диагностика. Особенности иммунитета при туберкулезе. Специфическая профилактика.

Возбудитель туберкулеза относится к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium. Микобактерии туберкулеза - это палочки, длинные, тонкие, могут быть слегка изогнуты. В цитоплазме обнаруживаются зерна Муха. Спор, капсул не образуют. Неподвижны. Характерной особенностью микобактерий является высокое содержание вклеточной стенки липидов, что придает этим бактериям устойчивость к кислотам, щелочам и спирту. По этой же причине они плохо воспринимают анилиновые красители. Грамположительны, но по Граму окрашиваются с трудом. Для их окраски пользуются методом Циля-Нильсена. Аэробы. Требовательны к питательным средам. Оптимальной средой для их культивирования является яичная среда с добавлением глицерина (среда Левенштейна-Иенсена). Могут использоваться также синтетическим среды. Микобактерии туберкулеза растут медленно; через 28-35 дней на плотных средах формируются морщинистые, сухие, с неровными краями, изолированные, не сливающиеся друг с другом колонии. На жидких средах растут в виде морщинистой пленки. Для дифференциации видов микобактерий используют различия в их биохимических свойствах (ниациновый тест, редукция нитратов, расщепление мочевины, никотинамида). Антигенная структура микобактерий довольно сложна. Их антигенами являются белки и фосфотиды клеточной стенки, корд-фактор и эндотоксин. Факторами вирулентности возбудителей туберкулеза являются токсические компоненты клеточной стенки - высшие жирные кислоты (миколовая, туберкулостеариновая, фтионовая), эндотоксин - туберкулин и корд-фактор (димиколаттрегалозы). Основной источник заражения - больной человек; эпидемиологическую опасность представляют только больные с открытой формой туберкулеза, которые выделяют возбудителя в окружающую среду. Основной путь заражения - воздушно-капельный, но возможен и контактно-бытовой. Источником заражения могут быть и больные туберкулезом домашние животные. Туберкулез - хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся образованием в различных органах, чаще в легких, специфических воспалительных изменений. По локализации различают ряд клинических форм туберкулеза: туберкулез легких, туберкулез почек, костно-суставный туберкулез, туберкулез половых органов, туберкулезный менингит. При первичном инфицировании в раннем детском возрасте с обычной локализацией в легких формируется первичный туберкулезный комплекс, который включает воспалительный очаг в паренхиме легкого, лимфангоит и регионарный лимфаденит. Первичный комплекс в легких со временем может инкапсулироваться и кальцинироваться с образованием петрификата. Однако этот процесс не завершается освобождением организма от микобактерий. Они сохраняются в организме на протяжении многих лет, поддерживая состояние инфицированности. Вторичный туберкулез развивается в более позднем возрасте при повторном инфицировании или активации эндогенной инфекции. Иммунитет при туберкулезе имеет свои особенности. Во-первых, он нестерильный, т.е. поддерживается бактериями, персистирующими в организме и обеспечивающими состояние инфицированности. Во-вторых, он неустойчивый, т.е. те самые бактерии, которые обеспечивают инфицированность, могут явиться причиной эндогенной инфекции. В-третьих, антитела не играют существенной роли в противотуберкулезном иммунитете. Антитела являются лишь “свидетелями” иммунитета и не оказывают ингибирующего действия на возбудителя. В-четвертых, основной механизм противотуберкулезного иммунитета клеточный, реализуемый через гиперчувствительновать замедленного типа. Определенное значение имеют и механизмы неспецифической защиты. Для микробиологической диагностики туберкулеза используют разные методы. Можно применять микроскопическое исследование (микроскопия мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену или люминисцентная микроскопия мазков, обработанных флюорохромами). Основным методом диагностики является бактериологический; материал для исследования определяется клинической формой болезни. При туберкулезе легких - это мокрота. Возможно применение методов иммуноиндикации, серодиагностики, а также молекулярно  генетических. При массовых обследованиях населения используется аллергический метод диагностики (постановка аллергической диагностической пробы Манту). Эта же проба применяется для оценки напряженности противотуберкулезного иммунитета. Для лечения туберкулеза используют противотуберкулезные средства: препараты первого ряда - изониазид, тубазид, фтивазид, стрептомицин, ПАСК, ГИНК; препараты второго ряда - этионамид, циклосерин, канамицин, рифампицин, виомицин. Специфическая профилактика осуществляется живой вакциной БЦЖ. Первичная вакцинация проводится всем детям на 3-5 день после рождения. Ревакцинация - в определенных возрастных группах лицам с отрицательной пробой Манту.

 

4.Возбудитель токсоплазмоза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника.

Токсоплазмоз — паразитарное заболевание человека и животных, вызываемое токсоплазмами. Источник инвазии — различные виды (свыше 180) домашних и диких млекопитающих. Различают врождённый и приобретённый (острый и хронический) токсоплазмоз. При врождённом токсоплазмозе наблюдаются гибель плода в утробе матери, смерть новорождённого в результате общей инфекции или (у оставшихся в живых) поражение нервной системы, глаз и др. органов. Острая приобретённая форма протекает как тифоподобное заболевание (с высокой температурой, увеличением печени, селезёнки) либо с преимущественным поражением нервной системы (головная боль, судороги, рвота, параличи и др.). Чаще токсоплазмоз протекает хронически, с субфебрильной температурой, головной болью, увеличением лимфоузлов и печени, понижением работоспособности; может сопровождаться поражением глаз, сердца, нервной и др. систем и органов. Токсоплазмоз может протекать и в латентной (скрытой) форме. Исследования показали, что при поражении иммунной системы и мозга человека паразит может вызвать влечение к запаху кошки и шизофрению. Основным методом диагностики заболевания является серологический метод. ИФА является методом выбора при анализе уровня IgM, с его помощью регистрируется рост их концентрации уже через 2 недели после инфицирования. Пик концентрации антител достигается через месяц, исчезают они обычно через 6—9 месяцев, но в отдельных случаях могут периодически обнаруживаться в течение 2 и более лет, затрудняя дифференцировку острой и хронической форм инфекции. Борьба с токсоплазмозом домашних животных, соблюдение санитарных правил при уходе за животными и обработке продуктов, тщательное обследование на токсоплазмоз беременных.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология          Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 30              1. ПЦР. Цель, компоненты, этапы реакции.                      2. Иммунотерапия. Лечебные вакцины и их применение.       3.Пневмококк, биология возбудителя. Заболевания, вызываемые пневмококками; лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.     4.Вирусологическое исследование. Методы культивирования вирусов.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1.ПЦР. Цель, компоненты, этапы реакции.

Молекулярно-генетический  метод основан на анализе нуклеиновых кислот, в первую очередь, молекул ДНК.  Основной целью этих методов является диагностика мутаций, исследование их ассоциации с наследственными заболеваниями, а также выявление  гетерозиготных и гомозиготных носителей мутации. По-существу, молекулярная диагностика является наиболее объективным методом верификации наследственных заболеваний. Важно подчеркнуть, что нахождение мутаций в гомозиготном или гетерозиготном состояниях соответственно при рецессивных или доминантных заболеваниях является бесспорным подтверждением диагноза. Однако в тех случаях,  когда мутации не удается обнаружить, решающее заключение при постановке диагноза сохраняется за клиницистом, так как используемые на практике методы молекулярной диагностики чаще всего не позволяют идентифицировать все возможные мутации в исследуемом гене.  Внедрению молекулярно-генетической методологии в клиническую практику способствовала разработка метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) или специфической амплификации ДНК, произошедшая более 20 лет назад. Его суть заключается в избирательном копировании invitro небольшого фрагмента гена, в котором предположительно может быть локализована мутация, с использованием в качестве матрицы геномной ДНК обследуемого. Небольшие размеры копируемого (или амплифицируемого) фрагмента гена в сочетании с их огромным числом позволяют в дальнейшем использовать очень простые методы для анализа этого участка ДНК, выявления его особенностей у обследуемого пациента. Главными из этих методов являются электрофорез амплифицированной ДНК, ее окрашивание, разрезание специфическими ферментами – рестриктазами, и определение нуклеотидной последовательности этого фрагмента - секвенирование. ПЦР лежит в основе ДНК-диагностики любых наследственных заболеваний. Данный подход широко используется и для анализа генетических факторов риска, предрасполагающих к развитию широко распространенных мультифакториальных заболеваний. В случае молекулярной диагностики инфекций амплифицируется фрагмент ДНК, специфичный для определенного возбудителя, а затем с помощью электрофореза и окрашивания на ДНК тестируется наличие этого фрагмента, а значит и самого возбудителя, в том биологическом образце, который был взят для анализа. Использование ПЦР в судебной медицине основано на  амплификации высоко изменчивых областей генома, позволяющих проводить идентификацию личности – метод геномной дактилоскопии. 1. Микроскопия. Цель: обнаружение в исследуемом материале соответствующих бактерий.  Самостоятельное значение этот метод имеет для диагностики легочного туберкулеза, острой гонореи и первичного сифилиса, в остальных случаях – это этап бактериологического исследования. 2. Бактериологическое исследование – «золотой стандарт». Цель: выделение чистой культуры возбудителя и определение ее вида. Все остальные методы МБД являются косвенными. 3. Серодиагностика. Цель: обнаружение инфекционных антител в сыворотке больного 4. Иммуноиндикация. Цель: обнаружение в патологическом материале антигенов возбудителя. Недостатком этого метода является то, что в материале необязательно будут содержаться Живые бактерии. 5. Молекулярно-генетические методы (ПЦР). Цель: обнаружение в исследуемом материале (или в чистой культуре бактерий) нуклеотидных последовательностей, отвечающих либо за видовую принадлежность возбудителя, либо за продукцию основного фактора вирулентности. 6. Аллергические диагностические пробы. Цель: выявление состояния инфекционной аллергии. Эти пробы используются для диагностики инфекционных заболеваний, при которых развивается инфекционная аллергия (бруцеллез, туляремия, туберкулез)

 

2. Иммунотерапия. Лечебные вакцины и их применение.

Иммунотерапия − это использование иммунологических

закономерностей для лечения больных.

При лечении острых тяжелых генерализованных форм инфекционных

заболеваний, особенно тех, возбудители которых продуцируют экзотоксин,

возникает, как правило, необходимость экстренного создания пассивного

искусственного приобретенного иммунитета.

Для этих целей используются антительные препараты −

антитоксические и антибактериальные (антимикробные) иммунные

сыворотки, иммуноглобулины (гамма-глобулины), плазма.

Иммунные сыворотки, используемые в практике специфической

профилактики и терапии инфекционных болезней, это сыворотки, получаемые

от иммунизированных животных или переболевших людей, или специально

иммунизированных доноров.

Антитоксические сыворотки содержат антитела против экзотоксинов.

Их получают путем гипериммунизации животных (лошадей)

анатоксином. Активность таких сывороток измеряется в АЕ (антитоксических

единицах) или МЕ (международных единицах). Это минимальное количество

сыворотки, способное нейтрализовать определенное количество (обычно

100DLM) токсина для животных определенного вида и определенной массы.

В настоящее время в России широко используются следующие

антитоксические сыворотки − противодифтерийная, противостолбнячная,

противогангренозная, противоботулиническая, причем применение

антитоксических сывороток при лечении соответствующих инфекций является

обязательным.

Антимикробные сыворотки содержат антитела против клеточных

антигенов возбудителя.

Их получают иммунизацией животных клетками соответствующих

возбудителей, и дозируют в мл.

Антимикробные сыворотки могут применяться при лечении сибирской

язвы, чумы, стрептококковых, стафилококковой, синегнойной инфекций. Их

назначение определяется тяжестью течения заболевания и в отличие от

антитоксических не является обязательным.

При лечении больных с хроническими, длительно, вяло текущими

формами инфекционных заболеваний, возникает необходимость

стимулировать собственные механизмы специфической защиты путем

введения различных антигенных препаратов и создания активного

приобретенного искусственного иммунитета (иммунотерапия антигенными

препаратами).

Для этих целей используются в основном лечебные вакцины, и

значительно реже − аутовакцины или стафилококковый анатоксин.

При этом убитые лечебные вакцины − дизентерийная, гонококковая

(гоновакцина), бруцеллезная, стафилококковая, используются довольно давно,

а вакцина СолкоУровак, вакцина IRS19, поликомпонентная вакцина ВП-4,

вакцина стафило-протейно-синегнойная – сравнительно недавно.

Вакцина СолкоУровак (фирма Солко Базель, Швейцария) содержит 6

различных штаммов Escherichiacoli, Proteusmirabilis, ProteusmorganniilKebsiellapneumoniae, Streptococcusfaecalis) и используется для лечения

хронических инфекций мочевых путей, при лечении острых инфекций

требуется предварительное проведение антибиотикотерапии.

Вакцина IRS19 содержит лизаты антигенов бактерий наиболее частых

возбудителей инфекций верхних дыхательных путей – Diplococcus

pneumoniae, Streptococcus, Micrococcus pyogenes (staphylococci), Gafkya

tetragena, Neisseria, Klebsiellapneumoniae, Moraxella, Hemophilusinfluenzae) и

используется, соответственно, для профилактики и лечения воспалительных и

инфекционных поражений в области уха, горла и носа, а также верхних

дыхательных путей.

Вакцина ВП-4 содержит антигены условно-патогенных бактерий

Staphylococcus aureus, Klebsiellapneumoniae, Escherichia coli, Proteus vulgaris и

используется для лечения в основном детей, часто болеющих острыми

респираторными заболеваниями, поскольку за счет иммуномодулирующего

эффекта снижает частоту и тяжесть заболеваний.

Особую отдельную группу лечебных вакцин представляют

аутовакцины. Это вакцины, приготовленные из убитых прогреванием при

70-80оС в течение 1 часа штаммов возбудителей, выделенных в результате

бактериологического исследования от данного больного. Аутовакцины имеют

определенные преимущества по сравнению с остальными, т.к. индуцируют в

макроорганизме иммунный ответ на антигены конкретного возбудителя,

учитывая его штаммовые особенности.

При проведении иммунотерапии необходимо учитывать несколько

достаточно важных моментов:

− противовирусные антительные препараты не используются, т.к.

антитела не действуют на внутриклеточные формы вирусов;

− лечение путем введения антитоксических сывороток должно быть

начато, как можно раньше, не дожидаясь результатов микробиологического

диагноза, т.к. серотерапия ими эффективна только до адсорбции (фиксации)

токсина клетками организма;

− антитоксические иммунные сыворотки часто содержат лошадиный

белок, и введение таких сывороток пациентам допустимо лишь в случае

отсутствия в течение 20-30 мин выраженной кожной реакции на лошадиную

сыворотку (в/к, в разведении 1:100, в объеме 0,1 мл);

− в некоторых случаях возможно одновременное введение и

антигенных, и антительных препаратов. Например, в соответствии с

приказами Минздрава РФ и отдела управления здравоохранения Саратовской

области при первичной хирургической обработке ран столбнячный анатоксин

вводится вместе с противостолбнячным иммуноглобулином, а при

множественных укусах животными людей в область головы и шеи,

параллельно с антирабической вакциной вводится и специфический

антирабический иммуноглобулин;

− клинически доказано, что использование препаратов

иммуноглобулинов, полученных от иммунизированных людей, при

иммунотерапии гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой

этиологии и столбняка более эффективно, чем использование

соответствующих иммунных антитоксических сывороток (лошадиных).

 

3.Пневмококк. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика пневмококковых инфекций.

Пневмококк (Streptococcus pneumoniae) — неподвижный ланцетовидный диплококк длиной 0,5—1,25 мкм. Является представителем рода Streptococcus, в который входят грамположительные, каталазо- и оксидазоотрицательные шаровидные бактерии, являющиеся факультативными анаэробами, рост которых усиливается при повышении содержания углекислого газа в атмосфере инкубации до 5—7 %. Строение клеточной стенки стрептококков типично для грамположительных бактерий. Её основой является пептидогликан со встроенными углеводами, тейхоевыми кислотами, липопротеинами и поверхностными белками. Для пневмококков дополнительно характерно наличие мощной полисахаридной капсулы, которая выполняет защитную функцию, препятствуя опсонизации и последующему фагоцитозу. Пневмококки являются одним из основных возбудителей менингита, среднего отита, синусита, внебольничной пневмонии у детей и взрослых. В более редких случаях пневмококк может вызывать инфекции другой локализации (эндокардит, септический артрит, первичный перитонит, флегмоны и др.)

 

 

4.Вирусологическое исследование. Методы культивирования вирусов.

 

 

Вирусологическое исследование направлено на выделение вируса и его

идентификацию.

Для выделения вирусов используют заражение лабораторных животных,

куриных эмбрионов или культуры тканей.

Первичную идентификацию выделенного вируса до уровня семейства

можно провести с помощью определения типа нуклеиновой кислоты (проба с

бромдезоксиуридином) и особенностей ее строения (электронная

микроскопия), размеров вириона (фильтрование через мембранные фильтры с порами диаметром 50 и 100 нм), наличия суперкапсидной оболочки (проба с

эфиром), гемагглютининов (реакция гемагглютинации), типа симметрии

нуклеокапсида (электронная микроскопия).

Результаты оценивают заражая культуру ткани пробой, подвергнутой

соответствующей обработке, и с последующим учетом результатов заражения

методом цветной пробефильтрования.

Существенное значение для идентификации вирусов (до рода, вида,

внутри вида) имеет также изучение их антигенного строения, которое

проводится в реакции вирусонейтрализации с соответствующими иммунными

сыворотками. Сущность этой реакции состоит в том, что после обработки

гомологичными антителами вирус утрачивает свою биологическую активность

(нейтрализуется) и клетка хозяина развивается так же, как и неинфицированная

вирусом. Об этом судят по отсутствию цитопатического действия, цветной

пробе, результатам реакции торможения гемагглютинации (РТГА), отсутствию

изменений при заражении куриных эмбрионов, выживаемости чувствительных

животных.

Вирусологическое исследование − это “золотой стандарт” вирусологии и

должно проводится в специализированной вирусологической лаборатории. В

настоящее время оно используется практически только в условиях

возникновения эпидемической вспышки того или иного вирусного

инфекционного заболевания.

Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли

методы иммунодиагностики (серодиагностики и иммуноиндикации). Они

реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета − радиоизотопный

иммунный анализ (РИА), иммуноферментный анализ (ИФА), реакция

иммунофлюоресценции (РИФ), реакция связывания комплемента (РСК),

реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), реакция торможения

гемагглютинации (РТГА) и др.

При использовании методов серодиагностики обязательным является

исследование парных сывороток. При этом четырехкратное нарастание титра

антител во второй сыворотке в большинстве случаев служит показателем

протекающей или свежеперенесенной инфекции.

При исследовании одной сыворотки, взятой в острой стадии болезни,

диагностическое значение имеет обнаружение антител класса IgМ,

свидетельствующее об острой инфекции.

Большим достижением современной вирусологии является внедрение в

практику диагностики вирусных инфекций молекулярно-генетических

методов (ДНК-зондирование, полимеразной цепной реакции − ПЦР). В первую

очередь с их помощью выявляют персистирующие вирусы, находящиеся в

клиническом материале, с трудом обнаруживаемые или необнаруживаемые  другими методами.

Для культивирования вирусов используют ряд методов. Это культивирование в организме экспериментальных животных, развивающихся куриных эмбрионах и культурах тканей, чаще всего это эмбриональные ткани или опухолевые клетки. Для выращивания клеток тканевых культур используют специальные сложные по составу многокомпонентные питательные среды (среда 199, среда Игла и др.). Они содержат индикатор изменения рН среды и антибиотики для подавления возможного бактериального загрязнения.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                   Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология        Лечебное дело 060101.65                  Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №31              1. Ультраструктура бактериальной клетки.                      2. Антитела, классификация.      3.Парентеральные эшерихиозы, возбудители, патовары,                                                                                                                                                                                                                                           методы микробиологической диагностики.      4.Вирусы – возбудители острых кишечных инфекций. Характеристика.                   Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1 Бактерии (прокариоты) существенно отличаются от клеток растений и животных (эукариоты). ^

Прокариоты — обычно содержат один ген, который не отделен специальной мембраной от цитоплазмы, не имеют митохондрий и аппарата Гольджи, не обладают амебоидным движением. Они состоят из нуклеоида, цитоплазмы (содержащей различные включения), оболочки и других структур-органоидов (жгутики), и несмотря на внешнюю простоту строения бактериальной клетки, представлют собой сложное живое существо.

Ультраструктура бактерий изучается с помощью электронно-микроскопических и микрохимических исследований.

* Нуклеоид, ядерное вещество клетки, ее наследственный аппарат, состоит из двойной нити ДНК, сомкнутой в кольцо и свободно погруженное в цитоплазму, в отличие от эукариотов. В молекуле ДНК закодирована генетическая информация клетки.

* Цитоплазма бактерий — дисперсная смесь коллоидов, состоящая из воды, белков, углеводов, липидов, минеральных соединений и других веществ. Бактериальная цитоплазма неподвижна, имеет высокую плотность, содержит мелкие зерна, состоящие из 60% РНК и 40% протеина, представляющие собой рибонуклеоп-ротеиды, получившие название «рибосом». Они выполняют функцию синтеза белка.

В цитоплазме находятся включения: гранулы, содержащие запасные питательные вещества; гранулы волютина, ли-попротеидные тельца, гликоген, пигментные скопления, сера, кальций и др. Гранулы волютина окрашиваются более интенсивно, чем цитоплазма клетки, и содержат метафос-фаты. Они обнаруживаются в некоторых видах бактерий, как, например: Corynebacterium diphtheriae, что учитывается при лабораторной диагностике дифтерии. Липопротеидные тельца в виде капель жира довольно часто встречаются у ряда бацилл и спирилл. Они исчезают при голодании клеток и появляются при росте бактерий на питательных средах, содержащих много углеводов.

Биологическое значение гранул волютина и липопротеиновых включений состоит в том, что они служат запасным питательным материалом и используются бактериями при недостатке питательных веществ.

Роль вакуолей изучена недостаточно. Одни ученые их рассматривают как участки, где откладываются вредные продукты метаболизма (экзотоксины), другие приписывают им роль добавочных ферментов дыхания.

Оболочка бактерий состоит из цитоплазматической мембраны, клеточной стенки и капсульного слоя, превращающегося у некоторых видов в истинную капсулу.

Цитоплазматическая мембрана прилегает к внутренней поверхности стенки и состоит из трех слоев: липидного, протеинового и полисахаридного. Она выполняет функцию разделительной перегородки, через нее с помощью ферментов осуществляется активный транспорт различных веществ и ионов, необходимых для жизнедеятельности клетки. В клеточных мембранах локализованы высокочувствительные рецепторы, с помощью которых клетки распознают и отрабатывают сигналы, поступающие из окружающей среды, дифференцируют питательные вещества и различные антибактериальные соединения. На поверхности цитоплазматической мембраны содержатся активные ферментные системы (пер-меазы), принимающие участие в синтезе белка, ферментов, нуклеиновых кислот. Цитоплазматическая мембрана образует лизосомы, участвующие в делении клетки.

# Клеточная стенка защищает бактерии от вредных факторов внешней среды, принимает участие в росте и делении клетки. Прочность стенки обеспечивает му-реин, вещество полисахаридной природы. Некоторые вещества, например, лизоцим, могут разрушать клеточную стенку. Бактерии, полностью лишенные клеточной стенки, называются «протопластами», они имеют шаровидную форму, обладают способностью к дыханию, синтезу белков, нуклеиновых кислот, ферментов, спорообразованию. Сохранить протопласты можно только в гипертонических растворах.

Рис. 1. Строение бактериальной клетки

1 — капсула; 2 — клеточная стенка; 3 — цитоплазмати-ческая мембрана; 4 — спора; 5— цитоплазма; 6 — ядерное вещество; 7 — ли-зосомы; 8 — рибосомы; 9 — жгутик; 10— пили

* Капсула. Под влиянием различных факторов среды некоторые микробы обладают способностью откладывать на поверхности своего тела более мощный слизистый слой вокруг клеточной стенки, получивший название «капсулы».

Капсульное вещество бактерии состоит из полисахаридов, мукополисахаридов или полисахаридов. Капсулообра-зование считается приспособительной функцией микроба. Патогенные капсульные микробы (клебсиеллы, возбудители сибирской язвы, возбудители пневмонии) более устойчивы к фагоцитозу, действию защитных факторов организма и внешней среды.

« Жгутики являются основным локомоторным органоидом бактерий. В результате их энергичного движения, напоминающего вращение штопора, жидкость движется вдоль жгутиков и бактерий и развивает скорость « 50 мкмс. Жгутики состоят из белковых веществ типа флагеллина, принадлежащего к классу сократимых белков.

Жгутики связаны с телом бактериальной клетки при помощи двух дисков: наружный находится в клеточной стенке, внутренний — в цитоплазматической мембране. По расположению жгутиков подвижные микробы подразделяются на 4 группы:

1. Монотрихи — бактерии с одним жгутиком на конце (холерный вибрион, синегнойная палочка).

2. Амфитрихи — бактерии с двумя полярно расположенными жгутиками или имеющие по пучку жгутиков на обоих концах (Spimliun volutans).

3. Лофотрихи — бактерии, которые имеют по пучку жгутиков на одном конце (палочки сине-зеленого молока).

4. Перитрихи — бактерии, обладающие жгутиками по всей поверхности тела (Е. coli, сальмонеллы брюшного тифа, паратифов А и В).

У некоторых видов микробов имеются пили (реснички, фимбрии, филаменты), представляющие собой образования, которые значительно короче и тоньше жгутиков. Они покрывают тело клетки. Полагают, что они не являются органами передвижения, а способствуют прикреплению микробных клеток к поверхности некоторых субстратов.

Споры и спорообразование. Спорообразование присуще некоторым, преимущественно палочковидным микроорганизмам (бациллы и клостридии). При попадании бацилл в неблагоприятные условия в клетке возникают структурные изменения. В одном из участков клетки цитоплазма с частью нуклеоида уплотняется, образуется предспоровая мембрана; затем она покрывается плотной многослойной мембраной, содержащей минимальное количество свободной воды и большое количество кальция, липидов и миколовой кислоты.

Споры обладают повышенной устойчивостью к действию факторов внешней среды и могут длительно (десятки лет) сохраняться в неблагоприятных условиях. Споры некоторых бацилл выдерживают кипячение и действие высоких концентраций дезинфицирующих средств.

Спорообразование происходит у бактерий в течение 18— 20 часов. В бактериальной клетке образуется только одна спора, из нее прорастает только одна вегетативная клетка, следовательно, спора не является органом размножения, а служит только для перенесения неблагоприятных условий.
2. Антителами называются сывороточные белки, образующиеся в ответ

на действие антигена. Они относятся к сывороточным глобулинам и поэтому

называются иммуноглобулины (Ig). Через них реализуется гуморальный тип

иммунного ответа.

Антитела обладают двумя свойствами. Они гетерогенны по физико-

химическому строению и специфичности и способны вступать во

взаимодействие с антигеном, аналогичным тому, который вызвал их

образование.

По происхождению иммуноглобулины делятся на:

1)нормальные;

2)инфекционные;

3)постинфекционные;

4)поствакцинальные.

По своему химическому строению иммуноглобулины - это

гликопротеиды.

По физико-химическим и антигенным свойствам иммуноглобулины

делят на классы G, M, A, E, D

 

Антитела (Ig) всегда специфичны антигену, индуцировавшему их

образование. Тем не менее, противомикробные иммуноглобулины по

специфичности делятся на:

1)группоспецифические;

2)видоспецифические;

3)вариантспецифические;

4)перекрестнореагирующие; т.е. на те же группы, что и микробные

антигены.

3. E.coli - палочки средней величины с закругленными концами,

располагаются беспорядочно; не образуют спор; некоторые штаммы имеют

микрокапсулу; подвижны, но встречаются и неподвижные варианты.

Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. E.coli не требовательны к

питательным средам. На мясо-пептонном агаре образуют круглые, выпуклые,

средней величины, полупрозрачные, бесцветные колонии. В жидкой среде

вызывают диффузное помутнение. E.coli обладают высокой ферментативной

активностью. Расщепляют углеводы с образованием кислоты и газа (имеются

безгазовые варианты). У условно-патогенных кишечных палочек основным фактором

вирулентности является образование эндотоксина.

Парэнтеральные

эшерихиозы вызывают условно-патогенные E.coli - представители нормальной

микрофлоры. При снижении иммунологической реактивности кишечная

палочка может покидать место своего постоянного обитания (кишечник) и

гематогенно либо лимфогенно распространяется, вызывая гнойно-

воспалительные процессы самой различной локализации.

Основным методом микробиологической диагностики эшерихиозов

является бактериологическое исследование. Материалом для посева при

энтеральных эшерихиозах являются фекалии, при парэнтеральных - гнойное

отделяемое, при септических формах - кровь. Для диагностики эшерихиозов

возможно использование методов иммуноиндикации и генной диагностики.

Для этиотропной терапии используют антибиотики. Специфическая

профилактика не разработана.

 

4 вопрос

 

Вирусы семейства пикорнавирусов - это РНК-содержащие вирусы. РНК

однонитевая, линейная, “плюс-нить”, выполняющая функцию и-РНК. Вирион

имеет простое строение и представляет собой нуклеокапсид, т.е. РНК покрыта

капсидной оболочкой, в которой капсомеры уложены по кубическому типу

симметрии. Суперкапсидной оболочки нет, вирусы устойчивы к эфиру.

Вирионы имеют форму многогранника. Размеры 20-30 нм.

Семейство Picornaviridae включает 4 рода: Enterovirus, Rinovirus,

Cardiovirus, Aphtovirus. Представители родов отличаются антигенным

строением, различной чувствительностью к низким значениям pH,

патогенностью для человека и клиникой вызываемых заболеваний. Кардио- и

афтовирусы патогенны для животных, представители двух других родов

ответственны за развитие инфекций у человека. Риновирусы вызывают острые

респираторные вирусные инфекции с поражением носоглотки. Энтеровирусы

передаются фекально-оральным путем. Местом их первичной локализации

являются носоглотка и кишечник, но они могут проникать в кровь и попадать в

другие органы, давая экстракишечные формы инфекции. К энтеровирусам

относятся полеовирус, вирусы Коксаки А и В, вирусы ECHO (enteritic

cytopathogenic human orphan), энтеровирусы серотипов 68-71 и вирус гепатита А

(ранее называли энтеровирус серотип70).

 

Род ротавирусов относят к семейству Reoviridae, куда также включены

патогенные для человека рода реовирусов и орбивирусов. Все эти вирусы могут

вызывать у человека респираторные и кишечные инфекции и объединены в одно

семейство по сходству организации вириона. В центре их вириона находится

двунитевая фрагментированная РНК, связанная с вирусспецифической

транскриптазой. Капсидная оболочка двуслойная, истинной суперкапсидной

оболочки нет.

Для ротавирусов очень характерен внешний вид вириона в виде колеса со

спицами при электронной микроскопии. Их капсидная оболочка состоит из двух

слоев. В наружном слое капсомеры уложены плотно, а во внутреннем рыхло:

капсомер - пустота- капсомер. Это и придает им своеобразный внешний вид.

Наружный слой капсидной оболочки ротавирусов разрушается под действием

α-галактазидазы, а не протеазы, как у реовирусов.

Ротавирусы не размножаются в куриных эмбрионах, плохо размножаются

в культурах тканей и организме лабораторных животных. Удается

культивировать их в культурах первичных и перевиваемых почечных клеток

зеленых мартышек, где можно наблюдать ЦПД в виде уплотнений и округления

клеток. Могут появляться конгломераты клеток, соединенные между собой

тяжами. Но не все штаммы ротавирусов удается адаптировать к культурам

тканей. Большинство ротавирусов не обладают гемагглютинином, но некоторые

серовары могут агглютинировать эритроциты человека группы 0.

По антигенному строению ротавирусы отличаются от рео- и орбивирусов.

У ротавирусов человека различают 4 серотипа. За типовые антигены и

гемагглютинирующую активность отвечает гликопротеид наружного слоя

капсидной оболочки. Эпидемиология и патогенез ротавирусных инфекций человека.

Ротавирусы - одни из наиболее частых возбудителей кишечных инфекций

у детей первых лет жизни. Обычно ротавирусные инфекции протекают с

клиникой гастроэнтеритов, но могут иметь более тяжелое течение, особенно у

новорожденных. Источник инфекции - больной. Путь предачи - фекально-

оральный. Вирус поражает эпителий кишечника. Адсорбируясь на мембранах

энтероцитов за счет гликопротеидов наружного слоя капсидной оболочки, вирус

проникает в клетку путем эндоцитоза, и в фагосоме идет его частичная

депротеинизация с потерей наружного слоя. С освобождением сердцевины

вируса начинает действовать его геномный белок - РНК-транскриптаза. На

одной нити каждого фрагмента РНК вируса синтезируется “плюс-нить” и-РНК.

Она же является матрицей и для синтеза РНК “минус- нитей”. Таким образом

образуется вирусная РНК, состоящая из “плюс” и “минус”- нитей. Вирусная и-

РНК собирает рибосомы в вирусспецифические полисомы, где происходит

синтез вирусных белков, после чего становится возможной сборка вирионов.

179

Выход до 1000 вирусных частиц из одной клетки сопровождается ее лизисом.

При ротавирусной инфекции микроворсинки щеточной каймы энтероцитов

укорачиваются или полностью исчезают, нарушается процесс всасывания,

развивается диарейный синдром.

В процессе заболевания развивается иммунный ответ. Сначала появляются

иммуноглобулины М, а затем G, обладающие вируснейтрализующей

активностью. В процессе заболевания важное место в локализации процесса,

снижении тяжести заболевания играют секреторные иммуноглобулины класса

А.

Иммуноглобулины G могут сохраняться десятилетиями, обеспечивая

постинфекционный иммунитет. Он передается от матери плоду и обеспечивает

относительную устойчивость новорожденных к ротавирусной инфекции.

Специфическая профилактика ротавирусной инфекции в нашей стране

не проводится, в некоторых странах для создания искусственного активного

иммунитета используют убитые вакцины.

Методы микробиологической диагностики ротавирусной инфекции.

Основным методом микробиологической диагностики является метод

иммуноиндикации ротавирусных антигенов в фекалиях больных. Для этого

могут быть использованы ИФА, коагглютинация, РПГА и др.

Типичная морфология вирионов (“колесо со спицами”) послужила

основанием для внедрения в диагностику инфекции метода прямой

электронной микроскопии фильтрата фекалий.

В качестве ресроспективного метода диагностики возможно проведение

серологического исследования с использованием РСК, ИФА и дпругих

реакций иммунитета.

На современном этапе в практику внедряются методы генетического

анализа для диагностики ротавирусной инфекции

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                           «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология        Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №32          1. Строение и функции нормальной микрофлоры.       2. Реакция связывания комплемента (РСК) Механизмы реакции.                 Компоненты реакции.        3. P. aeruginosa. Характеристика возбудителя. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика.      4. Боррелиозы. Возбудители. Микробиологическая диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

3. Морфологические и тинкториальные свойства: Pseudomonasaeruginosa относится к семейству Pseudomonadaceae. Грам «-», прямые палочки, расположенные одиночно, попарно или в виде коротких цепочек. Подвижны. Спор не образуют, имеют пили (фимбрии). При определенных условиях могут продуцировать капсулоподобную внеклеточную слизь полисахаридной природы. Культуральные свойства: облигатные аэробы, которые хорошо растут на простых питательных средах. Для выделения чистой культуры применяют селективные или дифференциально-диагностические питательные среды с добавлением антисептиков. На жидкой питательной среде бактерии образуют характерную серовато-серебристую пленку на поверхности. Колонии гладкие округлые, суховатые или слизистые. Характерным биологическим признаком бактерий вида P. aeruginosaявляется способность синтезировать водорастворимые пигменты (пиоцианин сине-зеленого цвета), окрашивающие в соответствующий цвет повязки больных или питательные среды при их культивировании. Биохимические свойства:низкая сахаролитическая активность: не ферментирует глюкозу и другие углеводы. Псевдомонады способны только окислять глюкозу. Восстанавливает нитраты в нитриты, обладает протеолитической активностью: разжижает желатину. Синегнойная палочка имеет каталазу и цитохромоксидазу. Многие штаммы синегнойной палочки продуцируют бактериоцины — протеины, обладающие бактерицидными свойствами. Антигенные свойства:О- и Н-антигены. Липополисахарид клеточной стенки является типо- или группо-специфическим термостабильным О-антигеном, на основе которого проводят серотипирование штаммов. Термолабильный жгутиковый Н-антиген бывает двух типов и обладает протективным действием. На поверхности клеток палочки обнаружены антигены пилей. Факторы патогенности: 1.факторы адгезии и колонизации: пили(фимбрии), экстрацеллюлярная слизь, гликолипопротеид – защищает бактерии от фагоцитоза. 2. токсины: эндотоксин – развитие лихорадки; экзотоксин А – цитотоксин, вызывает нарушения клеточного метаболизма; экзоэнзим S; лейкоцидин – токсическое действие на гранулоциты крови. 3.ферменты агрессии: гемолизины (термолабильная фосфолипаза С и термостабильный гликолипид); нейроминидаза; эластаза. 84

Резистентность: условия почти полного отсутствия источников питания; сохраняется в воде. Чувствительна к высушиванию, высокая устойчивость к антибиотикам. Эпидемиология: источник: больной. Механизмы заражения: контактный, респираторный, кровяной, фекально – оральный. Патогенез: проникают через поврежденные ткани. Засевают рану или ожоговую поверхность. Размножаются. Локальные процессы (инфекция мочевыводящих путей, кожи, респираторного тракта). Бактериемия. Сепсис. Клиника: раневые инфекции, ожоговую болезнь, менингиты, инфекции мочевыводящих путей, кожи, заболевания глаз, сепсис. Иммунитет.В сыворотке крови здоровых и переболевших - антитоксические и антибактериальные антитела, однако эти антитела типоспецифические и их роль в защите от повторных заболеваний мало изучена. Микробиологическая диагностика. Материал для исследования: кровь, гной и раневое отделяемое, моча, мокрота. Бактериоскопия – нет, отсутствие морф. и тинктор. особенностей. Основной метод диагностики - бактериологическое исследование клинического материала, позволяет не только идентифицировать возбудитель, но и определить чувствительность бактерий к антимикробным препаратам. При идентификации учитывают рост на агаре, положительный цитохромоксидазный тест, выявление термофильности (рост при 42С). Для внутривидовой идентификации бактерий применяют серотипирование. Серологический метод исследования направлен на обнаружение специфических антител к антигенам палочки (обычно экзотоксину А и ЛПС) с помощью РСК, РПГА. Лечение: антибиотики (цефалоспорины, β-лактамы, аминогликозиды). Тяжелые формы – плазма из крови, иммунизированной поливалентной корпускулярной синегнойной вакциной. Для местного лечения: антисинегнойный гетерологичный иммуноглобулин. Для лечения гнойных инфекций кожи, ожогов – синегнойный бактериофаг. Профилактика: специфическая – стерилизация, дезинфекция, антисептика. Контроль за обсемененностью внешней среды. Неспецифическая– иммуномодуляторы. Пассивная специфическая иммунизация гипериммунной плазмой. Для создания активного иммунитета–вакцины(поливалентная корпускулярная синегнойная вакцина,стафило–протейно-синегнойная вакцина.

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                          «Саратовский государственный медицинский университет   им. В.И. Разумовского                                           Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                  Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология         Лечебное дело 060101.65               Форма обучения       очная                                                                                                         ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №33              1. Молекулярно-генетические методы диагностики. ПЦР: цель, компоненты, этапы реакции. ДНК-чипы.       2. РИФ; реакция латекс агглютинации.      3. Пневмонии. Внебольничные и госпитальные. Возбудители. Микробиологическая диагностика. Возбудители атипичных пневмоний. Микробиологическая диагностика.      4. Классификация микозов              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

3.  

4. Микозы - это грибковые заболевания. Они составляют большую группу заболеваний кожного покрова. Возбудителем микоза является патогенный грибок.

Существует большая классификация микозов, которая проводится по различным признакам - по роду и виду грибка, вызвавшего болезнь, по глубине его нахождения в кожном покрове, месту расположения. На основании этого выделяют следующие виды микозов.

Первую группу составляют кератомикозы, ярким представителем которой является разноцветный лишай. К кератомикозам также относятся грибковые заболевания, когда зоной поражения является только роговой слой кожи, а воспалительной реакции не наблюдается.

Вторым видом микозов являются дерматофитии. Это, прежде всего, эпидерматофития, которая располагается в паховой области, эпидерматофития стоп ног, фавус и так далее.

Третий вид - это кандидоз. Кандидозом называется заболевание слизистых оболочек и органов человека, возбудителем которого является грибок Candida. Этот грибок является условно-патогенным, то есть в определенном количестве допустимо его присутствие в организме здорового человека. Это связано с тем, что грибок Candida очень распространен во вне. Идеальной температурой для их разрастания является 21-27 градусов. Но они вполне могут существовать и размножаться и при температуре 37 градусов. Глубина поражения напрямую зависит от места расположения и может быть самой разной. Когда зоной поражения становится слизистая оболочка влагалища, то грибок попадает во все слои эпителия, в том числе и базальный. Во рту грибок Candida поражает только верхние клетки.

Четвертая группа - это глубокие микозы. В их числе бластомикоз нескольких подтипов, хромомикоз и другие. Эти заболевания, как правило, встречаются в Южной Америке, Африке и Соединенных Штатах. Инфекция попадает в организм через микротравмы кожного покрова - трещины, царапины. Внешние проявления могут отличаться - на коже возникают бугорки либо узлы, которые со временем распадаются, и на их месте остаются язвы. Они появляются не только на поверхности, но и поражают более глубокие слои эпидермиса, подкожную клетчатку, а также мышцы и даже кости, внутренние органы. Эти процессы происходят на фоне общего ухудшения самочувствия больного, иногда даже возможна смерть больного.

Пятая группа объединяет псевдомикозы - эритразма, а также актиномикоз. Вначале эти болезни относили к числу грибковых заболеваний, но впоследствии было выяснено, что их источником является не грибок, а микроорганизм, являющийся чем-то срелдним между грибами и бактериями. 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                             «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                   Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология        Лечебное дело 060101.65                   Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №34              1. Грибы: строение, особенности биологии.                      2. ИФА для иммуноиндикации.      3.Бактериальные менингиты. Этиология. Микробиологическая диагностика.      4.Вирусы-возбудители ОРВИ. Метапневмовирусы. Бокавирусы. Характеристика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

4. Таксономия и классификация: РНК-содержащие вирусы. I семейство — Paramyxoviridae включает вирусы парагриппа человека (5 серотипов) и респираторно-синтициальный вирус (PC); II семейство — Picomaviridae включает 7 серотипов энтеровирусов Коксаки и ECHO, поражающих дыхательные пути, и 120 серотипов риновирусов; III семейство — Reoviridae включает 3 серотипа, вызывающих заболевания респираторного и желудочно-кишечного трактов; IV семейство — Coronaviridae включает 3 серотипа, также поражающих дыхательный и желудочно-кишечный тракты. ДНК-содержащие вирусы.V семейство — Adenoviridae. Представители этого семейства поражают глаза, кишечник, мочевой пузырь, 3 типа аденовирусов вызывают ОРВИ. Структура:. Средние размеры, сферическую, палочковидную или нитевидную формы. Большая часть возбудителей ОРВИ содержит однонитчатую РНК, кроме реовирусов, обладающих двунитчатой РНК, и ДНК-содержащих аденовирусов. Некоторые из них окружены суперкапсидом. Антигенная структура: сложная. У вирусов каждого рода есть общие антигены; вирусы имеют и типоспецифические антигены, по которым можно проводить идентификацию возбудителей с определением серотипа. В состав каждой группы вирусов ОРВИ входит различное количество серотипов и серовариантов. Большинство вирусов ОРВИ обладает гемагглютинируюшей способностью. РТГА основана на блокировании активности гемагглютининов вируса специфическими антителами. 88

Культивирование: Оптимальная модель для культивирования— культуры клеток. Для каждой группы вирусов подобраны наиболее чувствительные клетки (для аденовирусов —эмбриональные клетки почек; для коронавирусов — эмбриональные клетки и клетки трахеи). В зараженных клетках вирусы вызывают ЦПЭ( цитопатический эффект). Культуры клеток используют также при идентификации возбудителей с цитолитической активностью (например, аденовирусов). Для этого применяют так на-зываемую реакцию биологической нейтрализации вирусов в культуре клеток (РБН или РН вирусов). В ее основе — нейтрализация цитолитического действия вирусов типоспецифическми антителами. Иммунитет: вируснейтрализующие специфические IgA (обеспечивают местный иммунитет) и клеточный иммунитет. Местная выработка а-интерферона, появление которого в носовом отделяемом приводит к значительному снижению количества вирусов. Важной особенностью ОРВИ является формирование вторичного иммунодефицита. Постинфекционный иммунитет - нестойкий, непродолжительный, типоспецифический. Большое число серотипов и разнообразие вирусов – высокая частота повторных заболеваний. Микробиологическая диагностика.Материал для исследования носоглоточная слизь, мазки-отпечатки и смывы из зева и носа. Экспресс-диагностика.Обнаруживают вирусные антигены в инфицированных клетках. Применяют РИФ (прямой и непрямой методы) с использованием меченных флюорохромами специфических антител, а также ИФА. Для труднокультивируемых вирусов используют генетический метод (ПЦР). Вирусологический метод.Индикацию вирусов в зараженных лабораторных моделях проводят по ЦПЭ, а также РГА и гемадсорбции (для вирусов с гемагглютинирующей активностью), по образованию включений (внутриядерные включения при аденовирусной инфекции, цитоплазматические включения в околоядерной зоне при реовирусной инфекции и т. п.), а также по образованию «бляшек», и «цветной пробе». Идентифицируют вирусы по антигенной структуре в РСК, РПГА, ИФА, РТГА, РБН вирусов. Серологический метод.Противовирусные антитела исследуют в парных сыворотках больного, полученных с интервалом в 10 дней. Диагноз ставят при увеличении титра антител как минимум в 4 раза. При этом определяется уровень IgG в таких реакциях, как РБН вирусов, РСК, РПГА, РТГА. Лечение: эффективного этиотропного - нет; неспецифическое – а-интерферон, оксолин (глазные капли), при вторичной бактериальной инфекции – антибиотики. Основное лечение – симптоматическое/патогенетическое. Антигистаминные препараты. Профилактика: неспецифическая – противоэпидемич. мероприятия. Специфической – нет. Для профилактики аденовирусов – пероральные живые тривалентные вакцины.

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                                            Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)                    Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология         Лечебное дело 060101.65                 Форма обучения       очная                                                                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №35               1.Структурные особенности наследственного аппарата бактерий. Плазмиды бактерий. Определение, основные свойства, классификация плазмид.       2. Иммунопрофилактика инфекционных болезней.      3.Кандидоз. Возбудители. Лабораторная диагностика.      4. Ортомиксовирусы. Грипп. Возбудитель. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.            Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1. Структурные особенности наследственного вещества бактерий.  Плазмиды бактерий: определение, основные свойства, виды плазмид

Важное место в генетике бактерий занимают плазмиды – дополнительные, внехромосомные элементы наследственности. Плазмида, как и хромосома, представлена кольцевой молекулой двунитчатой ДНК, но ее размеры значительно меньше хромосомы. Плазмида содержит структурные гены, кодирующие тот или иной признак, гены автономной репликации, is-последовательности. У некоторых плазмид есть гены, ответственные за ее трансмиссивность (перенос, передачу). Такие плазмиды называют трансмиссивными (конъюгативными). Плазмиды – дополнительные, внехромосомные элементы наследственности. Плазмида, как и хромосома, представлена кольцевой молекулой двунитчатой ДНК, но ее размеры значительно меньше хромосомы. Плазмида содержит структурные гены, кодирующие тот или иной признак, гены автономной репликации, is-последовательности. У некоторых плазмид есть гены, ответственные за ее трансмиссивность (перенос, передачу). Такие плазмиды называют трансмиссивными (конъюгативными). Основные свойства плазмид: 1. гены плазмид несут не обязательную для клетки информацию, а лишь сообщают ей селективные преимущества; без плазмид клетка существовать может, а без хромосомы нет; 2. плазмидная ДНК имеет значительно меньшую молекулярную массу, чем хромосомная; 3. плазмиды способны к автономной репликации или их репликация находится под ослабленным контролем хромосомы; 4. для плазмид с низкой молекулярной массой характерно явление амплификации (многокопийности); 5. некоторые плазмиды (F, R-факторы) способны находиться как в автономии, штаммы, у которых F-фактор интегрирован с хромосомой, - Hfr-штаммы; 6. молекула ДНК плазмид более подвержена воздействию физических и  химических агентов, чем хромосомы; частота плазмидных мутаций выше, чем хромосомных; 7. некоторые физические В(УФ, СВЧ и др.) и химические (акридиловые красители) агенты вызывают элиминацию (удаление, потеря) плазмид; 8. плазмиды могут содержать tra-гены и самостоятельно передаваться в процессе конъюгации, это конъюгативные плазмиды; частота передачи плазмидных генов выше, чем хромосомных; трансмиссивность (передача, перенос) плазмид может быть связана и с переносом их в клетки умеренными трансдуцирующими фагами; 9. в клетке могут находиться несколько разных плазмид, но некоторые плазмиды несовместимы между собой; по этому признаку различают группы несовметимости плазмид. Плазмиды могут детерминировать разные свойства бактерий. Различают: 1. R-плазмиды – кодируют лекарственную устойчивость; 2. F-плазмида – определяет пол бактерий; 3. Col-плазмиды – детерминируют синтез бактериоцинов; 4. Hly-плазмиды – кодируют синтез гемоливинов; 5. Ent-плазмида – детерминирует синтез энтеротоксина; 6. Плазмиды биодеградации – обуславливают расщепление сложных ароматических и других соединений, например, нефти, парафина, ПЛВ и др. Плазмиды играют важную роль в процессах рекомбинации (обмена генетической информации) у бактерий.

2. Иммунопрофилактика и иммунотерапия являются разделами иммунологии, которые изучают и разрабатывают способы и методы специфической профилактики, лечения и диагностики инфекционных и неинфекционных болезней с помощью иммунобиологических препаратов, оказывающих влияние на функцию иммунной системы, или действие которых основано на иммунологических принципах. Иммунопрофилактика направлена на создание активного или пассивного иммунитета к возбудителю инфекционной болезни, его антигену с целью предупреждения возможного заболевания путем формирования невосприимчивости к ним организма. Иммунотерапия направлена на лечение уже развившейся болезни, в основе которой лежит нарушение функции иммунной системы. Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются, когда необходимо: а)сформировать, создать специфический иммунитет, активизировать деятельность иммунной системы; б) подавить активность звеньев иммунной системы; в)нормализовать работу иммунной системы. Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются в профилактике и лечении инфекционных болезней, аллергий, иммунопатологических состояний, в онкологии, трансплантологии, при первичных и вторичных иммунодефицитах. В лечении токсинемических инфекций (ботулизм, столбняк) значение имеет серотерапия, т.е. применение антитоксических сывороток, и иммуноглобулин. В терапии онкологических болезней применяются иммуноцитокины. Для всего этого – иммунобиологические препараты.

3. Кандидоз — одна из разновидностей грибковой инфекции, вызывается микроскопическими дрожжеподобными грибами рода Candida. Всех представителей данного рода относят к условно-патогенным. Лабораторная диагностика вагинальных кандидозов. Культуральное исследование должно включать не только выделение и видовую идентификацию возбудителя вагинального кандидоза, но и определение чувствительности выделеных штаммов к противогрибковым препаратам. Посев целесообразно производить по следующей схеме: — пользуясь постоянно стандартной методикой посева, вращая тампон, засеять материал на чашку с хромогенной средой «CANDICHROM II», при просмотре результатов посева необходимо подсчитать число КОЕ грибов различных видов (количественный анализ). Использование хромогенной селективной среды «CANDICHROM II» для первичного посева позволяет проводить прямую идентификацию основного возбудителя C. albicans и выделять другие виды дрожжевых грибов (рост бактерий ингибируется смесью антибиотиков). Другие виды грибов рода Candida, а также болезнетворные дрожжевые грибы других родов возможно достоверно идентифицировать до вида с помощью тест-системы «Elichrom FUNGI». Для определения чувствительности к распространенным противогрибковым препаратам(флуконазол, итраконазол, амфотерицин В, вориконазол, флуцитозин (5-флюороцитозин)) целесообразно использовать тест-систему «FUNGIFAST AFG». С учетом вероятности развития вторичной устойчивости к азоловым препаратам у грибов рода Candida, важно проводить тестирование чувствительности у выделенных штаммов и перед повторным назначением лечения.

4. Ортомиксовирусы. Грипп. Возбудитель.

Семейство ортомиксовирусов - это РНК-овые вирусы со спиральным типом симметрии нуклеокапсида, имеющие суперкапсидную оболочку, содержащую липиды, в связи с чем они чувствительны к эфиру. Белки суперкапсидной оболочки имеют сродство к муцину. К этому семейству относится вирус гриппа. У него одноцепочечная фрагментированная РНК, состоящая из 8 фрагментов, что обуславливает дрейф генов и большую антигенную вариабельность вируса. РНК представлена “минус-нитью”, поэтому у вируса есть особый геномный белок - РНК- зависимая РНК полимераза, которая нужна для построения реплекативной формой РНК “плюс-нити”, выполняющей функцию и-РНК.  Форма вириона вариабельна, чаще сферическая (могут быть нитевые формы), размеры 80-120 нм. Капсидная оболочка построена из простых белков, способных к самосборке.  Вирус гриппа хорошо размножается в культурах тканей и курином эмбрионе (амниотической и аллонтоисной оболочках). Из культур тканей оптимальной для репродукции вируса является культура клеток почек эмбриона человека. Цитопатическое действие выражено слабо и не во всех культурах тканей.  Грипп - это острая респираторная вирусная инфекция, имеющая тенденции к распространению в человеческой популяции в виде эпидемий с характерной сезонностью и даже пандемий. Инкубационный период короткий - 1-2 суток. Возможны очень тяжелые формы гриппа (“токсические”) с развитием отека легкого при нарушении проницаемости сосудов под действием нейраминидазы.  Иммунитет переболевших вариантспецифический. Материалом для исследования чаще всего служит носоглоточный и бронхиальный смывы, иногда кровь, и могут быть использованы следующие методы: вирусологический - из исследуемого материала вирус выделяют при заражении куриного эмбриона и культуры ткани почек эмбрионов человека с последующей идентификацией в РТГА сероваров и в РСК типов вируса гриппа; иммуноиндикация - антигены вируса обнаруживают в исследуемом материале - носоглоточном, бронхиальном смывах - с помощью РТГА и ИФА или РИФ в мазках-отпечатках из эпителиальных клеток слизистой оболочки носоглотки; серологический - методом РТГА, РСК, ИФА определяют наличие инфекционных антител в парных сыворотках больного по нарастанию их титра. Иммунопрофилактика. Разработаны средства активной и пассивной иммунопрофилактики гриппа. Активная иммунопрофилактика проводится живыми, убитыми и химическими гриппозными вакцинами. Предпочтение отдают живым вакцинам, т.к. они активируют не только гуморальный, но и клеточный иммунный ответ,

синтез интерферона, а также обеспечивают развитие механизма вирусной интерференции.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                         Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)             Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология   Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 36          1.Типы взаимодействия фага с клеткой, их характеристика.                      2. Реакции иммунитета. Простые и сложные реакции иммунитета, их характеристика.      3. Ботулизм. Возбудитель, факторы вирулентности. Патогенез, клиника. Микробиологическая диагностика, терапия.      4.Оппортунистические микозы. Возбудители. Лабораторная диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

1. Типы взаимодействия фага с клеткой, их характеристика.

 

По характеру взаимодействия с клеткой бактерии бактериофа­ги делятся на вирулентные и умеренные. Вирулентные фаги всег­да лизируют клетку бактерии. Умеренные фаги могут вызвать лизис клетки бактерии, но могут перейти и в неинфекционную форму. В этом случае молекула ДНК фага прикрепляется к ДНК бактерии и передается с нею дочерним клеткам. Фаг, существую­щий в такой форме, называется профагом. Сравнительно недавно стало известно, что включение вирусной ДНК в бактериальную происходит путем кроссинговера между хромосомами бактерии и вируса. Хромосома вируса принимает кольцевую форму и при­крепляется к определенному локусу хромосомы бактерии. Затем хромосомы бактерии и вируса разрываются, концы их соединя­ются крест-накрест и профаг оказывается включенным в хромо­сому клетки хозяина. В этом случае профаг является как бы частью ДНК бактерии и вместе с ней реплицируется. Клетки бактерии, имеющие в своей хромосоме профаг, называются лизогенными, а явление совместного существования ДНК бактерии и профага называется лизогенией. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЯВЛЕНИЙ БАКТЕРИОФАГИИ: 1. Фагопрофилактика инфекционных болезней с помощью поливалентных и видовых фагов. 2. Фаготерапия инфекционных болезней с помощью поливалентных и видовых фагов. 3. Фагодиагностика: а) определение вида бактерий на основе чувствительности к видовым фагам; б) фаготипирование – внутривидовая дифференцировка бактерий на основе чувствительности к типовым фагам, имеет значение для выявления источника заболевания. 4. Фагоиндикация – обнаружение фага в исследуемом материале является косвенным подтверждением наличия в нем одноименных бактерий (может служить методом диагностики некоторых инфекционных заболеваний). 5. Генная инженерия – создание клеток с новыми свойствами с помощью геномов фагов. 1-4 – это направления использования вирулентных фагов; в генной инженерии в качестве векторов генетического материала для создания клеток с новыми свойствами используют умеренные фаги. Их называют транслуцирующими.

2. Реакции иммунитета – это взаимодействие антигена с продуктами иммунного ответа. В любой реакции иммунитета выделяют две фазы:

1) специфическую – обусловлена взаимодействием антигена с антителом и образованием комплекса АГ – АТ;

2) неспецифическую.

Все реакции иммунитета делятся на:

1) простые; участвуют два компонента (антиген и антитело);

2) сложные; участвуют три компонента и более (антиген, антитело, комплемент и т. д.).

 

3. Ботулизм. Возбудитель, факторы вирулентности. Патогенез, клиника. Микробиологическая диагностика, серотерапия.

Заболевание, вызываемое C.botulinum, по патогенезу и клинической картине отличается от других пищевых токсикозов и описывается как самостоятельная нозологическая форма - ботулизм. Возбудитель ботулизма относится к семейству Bacillaceae, роду Clostridium, виду C.botulinum. Возбудитель ботулизма - это крупные палочки, образующие субтерминальные споры. Подвижны, перитрихи. Капсулы не имеют. Грамположительны. Облигатные анаэробы. На кровяном агаре образуют средней величины прозрачные, окруженные зоной гемолиза колонии. В высоком столбике сахарного агара колонии имеют вид пушинок или зерен чечевицы. C.botulinum обладают выраженной биохимической активностью. Возбудитель ботулизма имеет ряд целлюлярных и экстрацеллюлярных антигенов. Последние представлены антигенами экзотоксина. Фактором вирулентности C.botulinum является продукция экзотоксина. Ботулизм - сапронозная или зоонозная инфекция. C.botulinum широко распространены в природе; их обнаруживают в организме различных животных, рыб, ракообразных, в почве и воде. Благодаря образованию спор C.botulinum длительно сохраняется во внешней среде. Из почвы и воды он может попадать в пищевые продукты и при несоблюдении технологии приготовления пищевых продуктов размножаться в них и выделять экзотоксин. Экзотоксин C.botulinum - самый сильный из всех биологических ядов. Действие экзотоксина обусловлено блокированием освобождения ацетилхолина или его образования в синапсах и нейромышечных соединениях, в результате чего развиваются параличи. Ботулизм - острая инфекция, характеризующаяся тяжелой интоксикацией,

с преимущественным поражением ЦНС. Развиваются зрительные расстройства, нарушения координации глазных мышц, диплопия, затруднение глотания и расстройство речи. Признаки бульбарного паралича прогрессируют, и наступает смерть от паралича дыхательных мышц или остановки сердца. Постинфекционный иммунитет вариантспецифический. Основным методом микробиологической диагностики является обнаружение экзотоксина в исследуемом материале с помощью методов иммуноиндикации и постановка биологической пробы на белых мышах (реакции токсиннейтрализации). Для лечения обязательно используют антитоксическую противоботулинистическую сыворотку. Специфическая профилактика не применяется

4. Микозы — болезни, вызываемые паразитическими грибами. Виды грибковых заболеваний.

·                    Дерматофития — кожные заболевания, вызываемые грибами Trichophyton и Microsporum.

·                    Кандидоз — вызывается Candida albicans.

·                    Онихомикоз — грибковое заболевание ногтей, вызывается дерматофитами.

·                    Пёстрый (отрубевидный, разноцветный) лишай — характеризуется образованием чешуек, вызывается Malassezia furfur.

·                    Чёрный лишай — на ладонях и подошвах образует коричневые или чёрные пятна, вызывается Exophiala werneckii.

·                    Чёрная пьедра — колонизирует волос, вызывается Piedraia hortae.

·                    Белая пьедра — микоз волос головы, усов, бороды, вызывается Trichosporon beigelii.

·                    Споротрихоз

·                    Черный язык — на языке образуется черный налет, вызывается грибком (Black hairy tongue)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                         Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)             Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология   Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 37          1.Правила забора, хранения и транспортировки материала для проведения бактериологического исследования при кишечных инфекциях.                      2.Ферменты агрессии и защиты бактерий. Характеристика, методы  определения.                           3. Антибиотикоассоциированные диареи. Возбудители. Clostridium difficile. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика.      4.Нокардиоз. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1. Правило забора, хранения и транспортировки материала для проведения бактериологического исследования при различных инфекционных заболеваниях.

Достоверность результатов бактериологических анализов, проводимых микробиологической лабораторией, в огромной степени зависит от качества забора и транспортировки клинического материала перед постановкой тестов. При оценке диагностической значимости бактериологического исследования необходимо прежде всего помнить о неравнозначности положительного и отрицательного результатов. Если обнаружение патогенных микроорганизмов в исследуемом материале однозначно говорит о его присутствии в организме больного в момент исследования (если, конечно, исключить случайную контаминацию пробы персоналом), то отрицательный результат ещё не свидетельствует об их отсутствии. Причины, по которым возбудитель не удается выделить от больного тем или иным инфекционным заболеванием многообразны. Среди них следует отметить неравномерность распределения микроорганизмов в общей массе исследуемого материала; неравномерность выделения возбудителей из организма больного по времени. В связи с этим вероятность обнаружения патогенных микроорганизмов резко возрастает по мере увеличения кратности обследования и увеличения числа исследованных видов материала. Таким образом отрицательный результат бактериологического исследования, особенно однократного, ещё не является достаточным основанием для исключения данного вида инфекционного заболевания. С другой стороны и факт обнаружения патогенного микроорганизма, вне связи с конкретными обстоятельствами, не всегда является достаточным основанием для постановки конкретного диагноза. Это связано с широким распространением при ряде нозологических форм бактерионосительства. Значимость факта обнаружения патогенного микроорганизма во многом определяется видом исследуемого материала. Например, обнаружение возбудителей брюшного тифа в крови, в соскобе из розеол, в моче, имеет значительно большую диагностическую ценность, чем их выделение из испражнений или желчи. В последних двух случаях это может быть на фоне брюшнотифозного носительства. Материал для микробиологического исследования. Качество и значимость микробиологического исследования зависит в первую очередь от правильного выбора вида исследуемого материала, соблюдения правил его забора и транспортировки. Выбор вида материала для бактериологического исследования зависит от локализации и этапа патогенеза инфекционного процесса. Для результативности исследования, при заболеваниях, вызванных микроорганизмами, необходимо соблюдать основные правила: 1. Материал собирают в достаточном количестве для полноценного исследования; 2. Материал должен соответствовать этапу патогенеза заболевания; 3. Материал забирают с соблюдением правил асептики; стерильным инструментом и в стерильную емкость (инструменты и емкости не должны содержать на своих поверхностях, даже в остаточных количествах, дезинфицирующие вещества); 4. Материал необходимо забирать до начала антибиотикотерапии, или через 12-24 часа после последнего введения препарата; 5. Материал необходимо транспортировать в сроки, обеспечивающие сохранение жизнедеятельности микроорганизмов, соблюдая температурный режим поддерживающий их активность.

2. Для осуществления колонизации и инвазии многие бактерии выделяют

ферменты агрессии и защиты. Это:

1)нуклеазы;

2)протеазы, действие которых, в первую очередь, направлено на

разрушение антител;

3)лецитовителлаза − лецитиназа, разрушает клеточные мембраны;

4)плазмокоагулаза − способствует образованию фибриновых барьеров;

5)антифагин − липополисахарид, оказывающий токсическое действие на

фагоциты;

6)фибринолизин − протеолитический фермент, который растворяет

сгустки фибрина;

7)гиалуронидаза − фермент, гидролизующий гиалуроновую кислоту −

основной компонент соединительной ткани;

8)нейраминидаза − отщепляет от различных гликопротеидов,

гликолипидов, полисахаридов сиаловую (нейраминовую) кислоту, повышая

проницаемость различных тканей.

Три последних фермента облегчают распространение микроорганизмов

в тканях организма.

3. Антибиотико-ассоциированная диарея – это три или более эпизодов неоформленного стула в течение двух или более последовательных дней, развившихся на фоне применения антибактериальных средств. Клиническая картина. Симптомокомплекс, развившийся на фоне антибиотикотерапии, может варьировать от незначительного преходящего интестинального дискомфорта до тяжелых форм диареи и псевдомембранозного колита, который характеризуется водной диареей, лихорадкой, лейкоцитозом и формированием псевдомембран, обнаруживаемых в кале и при колоноскопии. В тяжелых случаях псевдомембранозный колит осложняется токсическим мегаколоном, перфорацией и шоком. Диагностика: анамнез, анализ кала (при тяжелой или стойкой диарее с целью обнаружения токсинов А или В), цитотоксиновый метод («золотой стандарт», недостаток – длительный период ожидания результатов исследования), иммуноферментный анализ (обладает высокой специфичностью, ложноотрицательные результаты фиксируются в 10–20% случаев), посев Clostridium difficile (недостаток – данный метод не позволяет дифференцировать непатогенные и патогенные штаммы). Лечение. При антибиотико-ассоциированной диарее легкой и средней степени тяжести: применяется регидратация, отменяются назначенный антибиотик (назначенные антибиотики) или производят замену антибиотика. В некоторых случаях при отмене антибиотика в течение 3 суток отмечается полный регресс симптоматики, если ее развитие было связанно с инфекцией Clostridium difficile. При антибиотико-ассоциированной диарее вызванной Clostridium difficile тяжелой степени применяют перорально метронидазол 250 мг 4 раза в сутки или ванкомицина 125 мг 4 раза в стуки в течение 10 дней. Как правило, диарея исчезает через 2–3 дня. В основном метранидазол используют в качестве препарата первой линии, а ванкомицин остается в качестве резерва для случаев тяжелой диареи, непереносимости метронидазола, неэффективности метронидазола или беременности. При любой степени тяжести антибиотико-ассоциированной диареи возможно применение пробиотиков (линекс, бифиформ). 

 

Clostridium difficile. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика.

Clostridium difficile в настоящее время признается в качестве одного из наиболее частых (15-25%), но не единственного возбудителя  антибиотикассоциированных диарей (ААД), колита, псевдомембранозного  колита (ПМК), в том числе нозокомиальных диарей (НД). Clostridium difficile Грамм +, спорообразующие, облигатно анаэробные  бактерии. Факторами патогенности являются экзотоксины (энтеротоксин и цитотоксин). Эпидемиологические штаммы как правило продуцируют оба вида токсинов. Кроме токсинов Clostridium difficile вырабатывает ряд ферментов: гиалорунидазу, гепариназу, коллагеназу и протеазу. Инфицирование Clostridium difficile может осуществляться как экзогенным, так и эндогенным путями. Контактный путь передачи Clostridium difficile через руки медперсонала является, вероятно, одним из наиболее значимых механизмов распространения внутрибольничной инфекции. Предполагается, что Clostridium difficile может участвовать в патогенезе так называемых неспецифических воспалительных заболеваний кишечника (болезнь Крона, неспецифический язвенный колит), непроходимости и стенозе толстой кишки, синдрома внезапной смерти у детей.

 

 

4. Нокардиоз. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика.

Нокардии — семейство актиномицетов. Аэробы. Неподвижны. Возбудители нокардиоза. Надежный диагноз нокардиоза возможен только выделением причинного агента из патматериала, включая мокроту, бронхиальные смывы, экссудат, гной, цереброспинальную жидкость, кровь, мочу и материалы аутопсии или биопсии. Хотя патогенные нокардии довольно устойчивы к внешним воздействиям, материалы для исследования должны быть транспортированы в лабораторию быстро, потому что нокардии, которые растут медленно, обычно зарастают контаминирующими бактериями. Охлаждение не желательно, потому что некоторые виды Nocardia не переносят низкие температуры.  При окрашивании, например, по Граму или серебряной импрегнацией, микроскопическое исследование мокроты, гноя или образцов ткани может обнаружить нитевидные ветвящиеся бактерии. Микроскопия нокардий не имеет различий с ферментирующими и аэробными актиномицетами. Спецификация возможна только культуральными методами, и, в перспективе, - молекулярными (ПЦР).  Для крови, цереброспинальной жидкости и эмпиемного экссудата для выделения Nocardia spp. подходит любая общая среда инкубирования при температуре 36+-1° C. Твердые питательные среды должны быть прозрачными, типа мозгового - сердечного агара, так, чтобы рост можно было наблюдать микроскопически на ранних стадиях. Для исследования патматериала, обычно содержащего врожденную микрофлору слизистых оболочек (например, мокроты, бронхиального секрета, мочи, материала аутопсии) должны быть использованы селективные среды, с целью уменьшить риск зарастания контаминирующими микроорганизмами медленнорастущей нокардии. Идентификация нокардий до вида требует хемотаксономических, углеродных и гидролизных тестов. Надежная идентификация N. asteroides sensu stricto, N. farcinica и N. nova особенно трудна, потому что они разделяются на много фенотипических признаков. Различия в чувствительности к антибиотикам может облегчать распознавание этих разновидностей.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                                         «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского                         Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»                             кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии       Специальность (шифр)             Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология   Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная                                                        ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 38           1.Правила забора, хранения и транспортировки материала для проведения бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях.                      2.Дисбактериоз. Методы микробиологической диагностики.        3.Кандидоз. Возбудители. Классификация. Методы микробиологической диагностики.      4.Легионеллез. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика.              Зав. кафедрой       Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб

 

 

1. . Правило забора, хранения и транспортировки материала для проведения бактериологического исследования при различных инфекционных заболеваниях.

Достоверность результатов бактериологических анализов, проводимых микробиологической лабораторией, в огромной степени зависит от качества забора и транспортировки клинического материала перед постановкой тестов. При оценке диагностической значимости бактериологического исследования необходимо прежде всего помнить о неравнозначности положительного и отрицательного результатов. Если обнаружение патогенных микроорганизмов в исследуемом материале однозначно говорит о его присутствии в организме больного в момент исследования (если, конечно, исключить случайную контаминацию пробы персоналом), то отрицательный результат ещё не свидетельствует об их отсутствии. Причины, по которым возбудитель не удается выделить от больного тем или иным инфекционным заболеванием многообразны. Среди них следует отметить неравномерность распределения микроорганизмов в общей массе исследуемого материала; неравномерность выделения возбудителей из организма больного по времени. В связи с этим вероятность обнаружения патогенных микроорганизмов резко возрастает по мере увеличения кратности обследования и увеличения числа исследованных видов материала. Таким образом отрицательный результат бактериологического исследования, особенно однократного, ещё не является достаточным основанием для исключения данного вида инфекционного заболевания. С другой стороны и факт обнаружения патогенного микроорганизма, вне связи с конкретными обстоятельствами, не всегда является достаточным основанием для постановки конкретного диагноза. Это связано с широким распространением при ряде нозологических форм бактерионосительства. Значимость факта обнаружения патогенного микроорганизма во многом определяется видом исследуемого материала. Например, обнаружение возбудителей брюшного тифа в крови, в соскобе из розеол, в моче, имеет значительно большую диагностическую ценность, чем их выделение из испражнений или желчи. В последних двух случаях это может быть на фоне брюшнотифозного носительства. Материал для микробиологического исследования. Качество и значимость микробиологического исследования зависит в первую очередь от правильного выбора вида исследуемого материала, соблюдения правил его забора и транспортировки. Выбор вида материала для бактериологического исследования зависит от локализации и этапа патогенеза инфекционного процесса. Для результативности исследования, при заболеваниях, вызванных микроорганизмами, необходимо соблюдать основные правила: 1. Материал собирают в достаточном количестве для полноценного исследования; 2. Материал должен соответствовать этапу патогенеза заболевания; 3. Материал забирают с соблюдением правил асептики; стерильным инструментом и в стерильную емкость (инструменты и емкости не должны содержать на своих поверхностях, даже в остаточных количествах, дезинфицирующие вещества); 4. Материал необходимо забирать до начала антибиотикотерапии, или через 12-24 часа после последнего введения препарата; 5. Материал необходимо транспортировать в сроки, обеспечивающие сохранение жизнедеятельности микроорганизмов, соблюдая температурный режим поддерживающий их активность.

 

2. Нарушение нормальной микрофлоры. Методы изучения. Препараты для коррекции, их характеристика

Дисбаланс нормальной микрофлоры - это любые количественные или качественные  изменения типичной для данного биотопа нормофлоры человека, возникающие в  результате воздействия на макро- и/или микроорганизм различных факторов экзогенного  и эндогенного характера.  Микробиологическими показателями дисбактериоза служат:  1. Снижение численности одного или нескольких постоянных видов.  2. Потеря бактериями тех или иных признаков (E.coli lac") или приобретение  новых (E.coli Н1у+).  3. Повышение численности добавочных или транзиторных видов.  4. Появление новых, не свойственных данному биотопу видов.  5. Ослабление антагонистической активности нормальной микрофлоры.    Вне зависимости от возрастной группы к развитию дисбактериоза ведут:  - нерациональная антибиотикотерапия;  - длительная гормонотерапия или лечение нестероидными противовоспалительными  препаратами;  - оперативные вмешательства;  - стрессорные воздействия;  - воздействие радиации, облучения;  - иммуносупрессивная терапия при трансплантации органов и тканей;  - применение ряда наркологических, местно анестезирующих, рвотных, слабительных,  отхаркивающих, желчегонных и других средств, которые изменяя моторику слизистых,  нарушают образование муцина;  - потенциальными дисбиотическими агентами могут быть некоторые психротропные,  антигистаминные препараты, нитраты, гормоны;  - воздействие химических веществ (промышленные яды, пестициды);  - нерациональное питание;  - острые и хронические заболевания (дизентерия, сахарный диабет).  Дисбактериоз различных биотопов имеет различные клинические проявления.  1.Дисбактериоз кишечника может проявляться в виде диареи, неспецифического колита,  синдрома малой сорбции, дуоденита, язвенной болезни желудка, гастрита, гастроэнтерита,  хронических запоров.  2.Дисбактериоз органов дыхания чаще протекает в форме нарушений со стороны  дыхательных путей, бронхитов, бронхиолитов, хронических, заболеваний легких.  3.Основными клиническими проявлениями дисбактериоза ротовой  полости являются гингивиты, пародонтит, стоматит, кариес. 4.Дисбактериоз мочеполовой системы женщин протекает как вагиноз.   Наиболее логичной выглядит заместительная терапия живыми бактериями, населяющими  толстый кишечник. Препараты, изготовленные на их основе, получили название  эубиотики или эубиотики. К ним относятся, например, колибактерин, лактобактерин,  бифидобактерин, мутафлор, нормофлор, бифилакт, бификол и др

 

3. Кандидоз — одна из разновидностей грибковой инфекции, вызывается микроскопическими дрожжеподобными грибами рода Candida. Всех представителей данного рода относят к условно-патогенным. Лабораторная диагностика вагинальных кандидозов. Культуральное исследование должно включать не только выделение и видовую идентификацию возбудителя вагинального кандидоза, но и определение чувствительности выделеных штаммов к противогрибковым препаратам. Посев целесообразно производить по следующей схеме: — пользуясь постоянно стандартной методикой посева, вращая тампон, засеять материал на чашку с хромогенной средой «CANDICHROM II», при просмотре результатов посева необходимо подсчитать число КОЕ грибов различных видов (количественный анализ). Использование хромогенной селективной среды «CANDICHROM II» для первичного посева позволяет проводить прямую идентификацию основного возбудителя C. albicans и выделять другие виды дрожжевых грибов (рост бактерий ингибируется смесью антибиотиков). Другие виды грибов рода Candida, а также болезнетворные дрожжевые грибы других родов возможно достоверно идентифицировать до вида с помощью тест-системы «Elichrom FUNGI». Для определения чувствительности к распространенным противогрибковым препаратам(флуконазол, итраконазол, амфотерицин В, вориконазол, флуцитозин (5-флюороцитозин)) целесообразно использовать тест-систему «FUNGIFAST AFG». С учетом вероятности развития вторичной устойчивости к азоловым препаратам у грибов рода Candida, важно проводить тестирование чувствительности у выделенных штаммов и перед повторным назначением лечения.

 

4. Легионеллез. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика.

Легионеллёз — сапронозное острое инфекционное заболевание, обусловленное различными видами микроорганизмов, относящихся к роду Legionella. Заболевание протекает, как правило, с выраженной лихорадкой, общей интоксикацией, поражением легких, центральной нервной системы, органов пищеварения, возможно развитие синдрома полиорганной недостаточности. Диагностика.  ОАК: нейтрофильный лейкоцитоз с левым сдвигом, тенденция к тромбоцитопении. ОАМ: токсическая альбуминурия, гематурия, цилиндрурия, может быть лейкоцитурия, олигоурия, анурия. Биохимические исследования: повышение активности трансаминаз, повышение мочевины и креатинина, появление СРБ, может быть повышение фибриногена и билирубина. В аспирате из нижних дыхательных путей выявляется большое количество гранулоцитов и альвеолярных макрофагов. Серологические методы: Материал: Мокрота, промывные воды бронхов, плевральный экссудат, кровь. Широкое применение находят: реакция микроагглютинации и непрямой иммунофлюоресценции — АТ появляются в сыворотке с 7 дня болезни, титр нарастает на 2-3 неделе заболевания. Диагностическим считается нарастание титра в 4 и более раза, а при однократном исследовании титр не менее 1:128. Наиболее эффективна реакция прямой иммунофлюоресценции и ПЦР. Бактериологический метод сложен и проводится в специализированных лабораториях

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

           Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                              

          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского           

             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

                            кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии

      Специальность (шифр)             Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология

  Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная

 

 

                                                   ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 39 

 

 

     1.Бета-лактамные антибиотики. Защищенные бета-лактамы.

                     2.Серодиагностика инфекционных заболеваний.

     3.Стафилококки. HRSA, MRSE.

     4. Атипичные пневмонии. Возбудители. Микробиологическая характеристика. Лабораторная диагностика.

 

 

 

     Зав. кафедрой 

     Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб 

 

   

 

1. Бета-лактамные антибиотики (β-лактамные антибиотики, β-лактамы) — группа антибиотиков, которые объединяет наличие в структуре β-лактамного кольца.

В бета-лактамам относятся подгруппы пенициллинов, цефалоспоринов, карбапенемов и монобактамов. Сходство химической структуры предопределяет одинаковый механизм действия всех β-лактамов (нарушение синтеза клеточной стенки бактерий), а также перекрёстную аллергию к ним у некоторых пациентов.

Пенициллины, цефалоспорины и монобактамы чувствительны к гидролизующему действию особых ферментов — β-лактамаз, вырабатываемых рядом бактерий. Карбапенемы характеризуются значительно более высокой устойчивостью к β-лактамазам.

С учётом высокой клинической эффективности и низкой токсичности β-лактамные антибиотики составляют основу антимикробной химиотерапии на современном этапе, занимая ведущее место при лечении большинства инфекций.

 

2. Серодиагностика

(от лат. serum — сыворотка и Диагностика)

        метод распознавания заболеваний человека, животных и растений, основанный на способности антител (См. Антитела) сыворотки крови специфически реагировать с соответствующими антигенами (См. Антигены). В медицине применяется для диагностики, в том числе экспресс-методами (иммунолюминесценция), инфекционных и некоторых неинфекционных заболеваний. К С. относятся также определение антигенов в биологических жидкостях (крови, моче и т. п.) и тканях при помощи реакций связывания Комплемента, торможения пассивной гемагглютинации (См. Гемагглютинация) и т. п., определение вида бактерий и вирусов, выделенных от больных, и установление видовой принадлежности белков и групп крови человека при помощи специфических сывороток. Особая разновидность С. — диагностика заболеваний путём регистрации характерных изменений сыворотки крови при воздействии на нее определенными неспецифическими реактивами (например, осадочные реакции с липидами при сифилисе, желатинизация сыворотки под воздействием формальдегида при лейшманиозе и т. п.)

 

3. Таксономия: относятся к отделу Firmicutes, семейству Мicrococcacae, роду Staphylococcus. К данному роду относятся 3 вида: S.aureus, S.epidermidis и S.saprophyticus. Морфологические свойства: Все виды стафилококков представляют собой округлые клетки. В мазке располагаются не-симметричными гроздьями. Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана, связанных с ним тейхоевых кислот, протеин А. Грамположительны. Спор не образуют, жгутиков не имеют. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Могут образовывать L-формы. Культуральные свойства: Стафилококки — факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые колонии с различным пигментом, не имеющим таксономического значения. Могут расти на агаре с высоким содержанием NaCl. Обладают сахаролитичес- кими и протеолитическими ферментами. Стафилококки могут вырабатывать гемолизины, фибринолизин, фосфатазу, лактамазу, бактериоцины, энтеротоксины, коагулазу. Стафилококки пластичны, быстро приобретают устойчивость к антибактериальным препаратам. Существенную роль в этом играют плазмиды, передающиеся с помощью трансдуцирующих фагов от одной клетки к другой. R-плазмиды детерминируют устойчивость к одному или нескольким антибиотикам, за счет продукции в-лактамазы. Антигенная структура. Около 30 антигенов, представляющих собой белки, полисахариды и тейхоевые кислоты. В составе клеточной стенки стафилококка содержится протеин А, который может прочно связываться с Fc-фрагментом молекулы иммуноглобулина, при этом Fab-фрагмент остается свободным и может соединяться со специфическим антигеном. Чувствительность к бактериофагам (фаготип) обусловлена поверхностными рецепторами. Многие штаммы стафилококков явля-ются лизогенными(образование некоторых токсинов происходит с участием профага). Факторы патогенности: Условно – патогенные. Микрокапсула защищает от фагоцитоза, способствует адгезии микробов; компоненты клеточной стенки – стимулируют развитие воспалительных процессов. Ферменты агрессии: каталаза – защищает бактерии от действия фагоцитов, в-лактамаза – разрушает молекулы антибиотиков. Резистентность. Устойчивость в окружающей среде и чувствительность к дезинфектантам обычная. Патогенез. Источником инфекции стафилококков - человек и некоторые виды животных (больные или носители). Механизмы передачи — респираторный, контактно-бытовой, алиментарный. Иммунитет: Постинфекционный – клеточно-гуморальный, нестойкий, ненажряженный. Клиника. Около 120 клинических форм проявления, которые имеют местный, системный или генерализованный характер. К ним относятся гнойно-воспалительные болезни кожи и мягких тканей (фурункулы, абсцессы), поражения глаз, уха, носоглотки, урогенитального тракта, пищеварительной системы (интоксикации). Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной, кровь, моча, мокрота, испражнения. Бактериоскопический метод: из исследуемого материала (кроме крови) готовят мазки, окрашивают по Граму. Наличие грам «+» гроздевидных кокков, располагающихся в виде скоплений. Бактериологический метод: Материал засевают петлей на чашки с кровяным и желточно-солевым агаром для получения изолированных колоний. Посевы инкубируют при 37С в течении суток. На следующий день исследуют выросшие колонии на обеих средах. На кровяном агаре отмечают наличие или отсутствие гемолиза. На ЖСА S. aureus образует золотистые круглые выпуклые непрозрачные колонии. Вокруг колоний стафилококков, обладающих лецитиназной активностью, образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком. Для окончательного установления вида стафилококка 2—3 колонии пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром для получения чистых культур с последующим определением их дифференциальных признаков. S.aureus – «+»: образование плазмокоагулазы, летициназы. Ферментация:глк, миннита, образование а-токсина. Для установления источника госпитальной инфекции выделяют чистые культуры стафилококка от больных и бактерионо-сителей, после чего проводят их фаготипирование с помощью набора типовых стафилофагов. Фаги разводят до титра, указан-ного на этикетке. Каждую из исследуемых культур засевают на питательный агар в чашку Петри газоном, высушивают, а затем петлей каплю соответствующего фага наносят на квадраты (по числу фагов, входящих в набор), предварительно размеченные карандашом на дне чашки Петри. Посевы инкубируют при 37 °С. Результаты оценивают на следующий день по наличию лизиса культуры. Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр анти-а-токсина в сыворотке крови больных. Определяют титр АТ к риботейхоевой кислоте( компонент клеточной стенки). Лечение и профилактика. Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к в-лактамазе). В случае тяжелых стафилококковых инфекций, не поддающихся лечению антибиотиками, может быть использована антитоксическая противостафилококковая плазма или иммуноглобулин, иммунизированный адсорбированным стафилококковым анатоксином. Выявление, лечение больных; проведение планового обследования медперсонала, вакцинация стафилококковым анатоксином. Стафилококковый анатоксин: получают из нативного анатоксина путем осаждения трихлоруксусной кислотой и адсорбцией на гидрате оксида алюминия. Стафилококковая вакцина: взвесь коагулазоположительных стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих заболеваний. Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержит стафилококковый анатоксин. Готовят из человеч. крови, с высоким содержанием антител. Применяется для специфического лечения.

4. Атипичные (интерстициальные) пневмонии характеризуются отсутствием

выраженных характерных рентгенологических изменений. Вместо инфильтрата

обнаруживается поражение интерстициальной ткани легких с усилением

легочного рисунка. Течение таких пневмоний может быть различным − от

легкого, стертого до тяжелого с выраженной интоксикацией. Кашель с

минимальным отделением мокроты в течение трех или более суток, отсутствие

или слабо выраженный лейкоцитоз.

Основными возбудителями атипичных пневмоний являются микоплазмы

(M.pneumoniae), хламидии (C.pneumoniae, C.trachomatis, C.psittaci), легионеллы

(L.pneumophila), риккетсии (Coxiella burnetii).

 

Аспирационные пневмонии возникает на фоне энцефалопатий, тяжелых

травм, психической заторможенности, цереброваскулярных заболеваний и

других неврологических нарушений, алкоголизма, ослабляющих естественные

механизмы защиты дыхательных путей.

Основными возбудителями внебольничных аспирационных пневмоний

являются облигатные неклостридиальные анаэробные бактерии, чаще

бактероиды.

У стационарных больных аспирационные пневмонии чаще вызываются

синегнойной палочкой и золотистым стафилококком.

Для этиологии аспирационных пневмоний (как внебольничных, так и

госпитальных) характерно участие неклостридиальных облигатных анаэробов в

чистом виде или в сочетании с аэробной грамотрицательной микрофлорой. Эти

микроорганизмы вызывают, как правило, тяжелую и рано возникающую

деструкцию легочной ткани (абсцесс, гангренозный абсцесс).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

           Государственное образовательное учреждение    высшего профессионального образования                              

          «Саратовский государственный медицинский университет  им. В.И. Разумовского           

             Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

                            кафедра    микробиологии, вирусологии, иммунологии

      Специальность (шифр)             Дисциплина: микробиология, вирусология и  иммунология

  Лечебное дело 060101.65             Форма обучения       очная

 

 

                                                   ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №40 

 

 

     1.Антибиотики – ингибиторы синтеза белка.

                     2. Иммуноиндикация.

     3. Антибиотикоассоциированные диреи. Возбудители.

     4. Эпидемический сыпной тиф. Возбудитель. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

 

 

 

     Зав. кафедрой 

     Профессор     _____________________________________           Г.М. Шуб                                

   

 

1.      Антибиотики — химиотерапевтические вещества, продуцируемые микроорганизмами, животными клетками, растениями, а также их производные и синтетические продукты, которые обладают избирательной способностью угнетать и задерживать рост микроорганизмов, а также подавлять развитие злокачественных новообразований. За тот период, который прошел со времени открытия П.Эрлиха, было получено более 10 000 различных антибиотиков, поэтому важной проблемой являлась систематизация этих препаратов. В настоящее время существуют различные классификации антибиотиков, однако ни одна из них не является общепринятой.

антибиотики, нарушающие синтез белка; это наиболее многочисленная группа препаратов. Представителями этой группы являются аминогликозиды, тетрациклины, макроли-ды, левомицетин, вызывающие нарушение синтеза белка на разных уровнях;

2. Иммуноиндикация − метод диагностики, имеющий целью обнаружение

в исследуемом материале (от больного или в объектах внешней среды)

микробных (или иных) антигенов. Этот тип реакций можно представить в виде

следующего равенства − хАГ + АТ=результат.

Стандартным диагностическим препаратом, т.е. известным компонентом

реакций, содержащим антитела, при реализации этого метода являются

иммунные (полученные на специализированных производствах путем

иммунизации животных соответствующим антигеном) сыворотки

(агглютинирующие, преципитирующие и т.п.).

Известные антитела для этой группы реакций могут быть адсорбированы

на тех или иных носителях (эритроциты, частицы латекса, клетки

стафилококков). В этом случае такие стандартные диагностические препараты

называются, соответственно, эритроцитарными (латексными,

коагглютинирующими − КоА) антительными диагностикумами.

Для целей иммуноиндикации широко применяются реакции иммунитета

с мечеными компонентами. Это методы иммунолюминесцентного,

радиоиммунного, иммуноферментного анализа и ряд других иммунологических

методик.

3. Антибиотикоассоциированные диареи. Возбудители.

Антибиотико-ассоциированная диарея – это три или более эпизодов неоформленного стула в течение двух или более последовательных дней, развившихся на фоне применения антибактериальных средств. Клиническая картина. Симптомокомплекс, развившийся на фоне антибиотикотерапии, может варьировать от незначительного преходящего интестинального дискомфорта до тяжелых форм диареи и псевдомембранозного колита, который характеризуется водной диареей, лихорадкой, лейкоцитозом и формированием псевдомембран, обнаруживаемых в кале и при колоноскопии. В тяжелых случаях псевдомембранозный колит осложняется токсическим мегаколоном, перфорацией и шоком. Диагностика: анамнез, анализ кала (при тяжелой или стойкой диарее с целью обнаружения токсинов А или В), цитотоксиновый метод («золотой стандарт», недостаток – длительный период ожидания результатов исследования), иммуноферментный анализ (обладает высокой специфичностью, ложноотрицательные результаты фиксируются в 10–20% случаев), посев Clostridium difficile (недостаток – данный метод не позволяет дифференцировать непатогенные и патогенные штаммы). Лечение. При антибиотико-ассоциированной диарее легкой и средней степени тяжести: применяется регидратация, отменяются назначенный антибиотик (назначенные антибиотики) или производят замену антибиотика. В некоторых случаях при отмене антибиотика в течение 3 суток отмечается полный регресс симптоматики, если ее развитие было связанно с инфекцией Clostridium difficile. При антибиотико-ассоциированной диарее вызванной Clostridium difficile тяжелой степени применяют перорально метронидазол 250 мг 4 раза в сутки или ванкомицина 125 мг 4 раза в стуки в течение 10 дней. Как правило, диарея исчезает через 2–3 дня. В основном метранидазол используют в качестве препарата первой линии, а ванкомицин остается в качестве резерва для случаев тяжелой диареи, непереносимости метронидазола, неэффективности метронидазола или беременности. При любой степени тяжести антибиотико-ассоциированной диареи возможно применение пробиотиков (линекс, бифиформ). 

82. Clostridium difficile. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика.

Clostridium difficile в настоящее время признается в качестве одного из наиболее частых (15-25%), но не единственного возбудителя  антибиотикассоциированных диарей (ААД), колита, псевдомембранозного  колита (ПМК), в том числе нозокомиальных диарей (НД). Clostridium difficile Грамм +, спорообразующие, облигатно анаэробные  бактерии. Факторами патогенности являются экзотоксины (энтеротоксин и цитотоксин). Эпидемиологические штаммы как правило продуцируют оба вида токсинов. Кроме токсинов Clostridium difficile вырабатывает ряд ферментов: гиалорунидазу, гепариназу, коллагеназу и протеазу. Инфицирование Clostridium difficile может осуществляться как экзогенным, так и эндогенным путями. Контактный путь передачи Clostridium difficile через руки медперсонала является, вероятно, одним из наиболее значимых механизмов распространения внутрибольничной инфекции. Предполагается, что Clostridium difficile может участвовать в патогенезе так называемых неспецифических воспалительных заболеваний кишечника (болезнь Крона, неспецифический язвенный колит), непроходимости и стенозе толстой кишки, синдрома внезапной смерти у детей.

4. эпедим сыпной тиф

Морфология и биологические свойства. Возбудитель сыпного тифа — риккетсии Провачека — обнаружены Риккетсом в 1909 г. и Провачеком в 1911 г. Они сходны с другими риккетсиями, имеют вид палочек или диплококков, окрашиваются по Романовскому. Эти микроорганизмы культивируют в желточном мешке куриного эмбриона, интраназально заражают мышей и вводят с помощью микроклизм вшам. Риккетсии размножаются в эндотелиальных клетках сосудов человека и в эпителиальных клетках кишечника вшей.

Токсин риккетсий Провачека тесно связан с телом клетки, термолабилен. Обнаружен О-антиген, общий с другими риккетсиями, полисахаридной природы, термостабильный, обладающий иммуногенными свойствами. Имеется специфический видовой антиген белковой природы, термолабильный.

Устойчивость. Во внешней среде риккетсии малоустойчивы: гибнут при 50°С через 5—15 мин (сухой жар), а при 100°С — за 30 с (текучий пар).

Патогенность. В естественных условиях животные сыпным тифом не болеют. Экспериментально удается вызвать заболевание у обезьян и морских свинок. У морских свинок при внутрибрюшинном заражении болезнь протекает легко и заканчивается выздоровлением. Заражение белых мышей приводит к развитию пневмонии, от которой они в течение нескольких дней погибают.

Патогенез и клиника. В основе патогенеза сыпного тифа лежит действие риккетсий Провачека и их токсинов на кровеносную и центральную нервную систему (развитие васкулитов, парез кровеносных сосудов). Инкубационный период продолжается в среднем 10—14 дней. Заболевание начинается остро, характеризуется сильной головной болью, постоянно высокой температурой и появлением на 4—5-й день болезни розеолезно-петехиальной сыпи. Сыпь держится до 2 нед и в тяжелых случаях приобретает геморрагический характер с появлением новых петехий. В течение 2-й недели заболевания у больного наблюдаются затемнение сознания, бред, двигательное беспокойство.

При тяжелом поражении сосудистой системы понижается давление и уменьшается диурез. В конце 2-й недели температура снижается, сыпь исчезает, сознание проясняется. Быстро наступает выздоровление.

Человек приобретает длительный и стойкий иммунитет. В последние годы накоплены данные о сохранении риккетсий в организме в течение многих лет. Как полагают, они могут вызывать повторное заболевание сыпным тифом через 40—50 лет. Эта форма болезни получила название болезни Брилла. Клинически заболевание протекает более легко.

Источником инфекции при сыпном тифе является больной человек, в крови которого на протяжении всей болезни циркулируют риккетсии. Переносчик — головная й платяная вши. 

Микробиологическая диагностика. Основным методом лабораторной диагностики сыпного тифа являются серо-логические реакций: агглютинации, связывания комплемента и непрямой гемагглютинации. Реакция агглютинации со специфическим диагностикумом из риккетсий Провачека высокочувствительна и становится положительной на 3—5-й день. Диагностическим титром антител считают разведение сыворотки 1 : 100—1 : 160. Антитела исчезают в течение года после заболевания. РСК бывает положительной с 7—8-го дня болезни; титр антител максимальный к 12—14-му дню, а затем наблюдается мед¬ленное снижение. Небольшое количество комплемент- связывающих антител обнаруживают долгие годы. РНГА становится положительной на 7—8-й день заболевания. Диагностическим считают титр антител 1 : 160 — І : 200 при условии его дальнейшего нарастания при повторной постановке РНГА.

Профилактика и лечение. Основные меры профилактики: обязательная и ранняя госпитализация больных, наблюдение за соприкасающимися с ними в течение 21 дня с обязательной термометрией, санитарная обработка окружающих и дезинсекция помещений и одежды. Большое значение имеет борьба со вшивостью среди населения.
Для активной иммунизации существуют вакцины из живых или убитых риккетсий Провачека. В СССР используют убитую вакцину Кронтовской — Маевского, полученную из легких белых мышей, зараженных риккетсиями: ее вводят подкожно 3 раза по 0,5—1 мл с интервалом 5 дней. Иммунитет сохраняется 6—8 мес. За рубежом применяют убитую вакцину Кокса, приготовленную из желточных мешков куриных эмбрионов, зараженных риккетсиями.

В последние годы используют живую вакцину, приготовленную П. Ф. Здродовским и его сотрудниками из авирулентного вакцинного штамма «Мадрид Е».

Лечение сыпного тифа проводят антибиотиками: левомицетином, тетрациклином и др.