Билет 1

1. Медицинская микробиология и еѐ место в современной медицине

 Предмет и задачи микробиологии. 

Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами.

Медицинская микробиология и еѐ место в современной медицине.

Медицинская микробиология тесно связана со всеми медицинскими дисциплинами (инфектологией, терапией, педиатрией, хирургией, фтизиатрией, гигиеной, фармакологией и др.). Значительно возросла роль микробиологии, вирусологии и иммунологии в решении многих проблем здравоохранения. Цель медицинской микробиологии – глубокое изучение структуры и важнейших биологических свойств патогенных микробов, взаимоотношения их с организмом человека в определенных условиях природной и социальной среды, совершенствование методов микробиологической диагностики, разработка новых, более эффективных лечебных и профилактических препаратов, решение такой важной проблемы, как ликвидация и предупреждение инфекционных болезней.

2. Инфекционные болезни, их особенности, периоды течения. Классификация инфекционных болезней

. Инфекционная болезнь –

крайняя степень проявления инфекции, ее частный случай. Есть инфекции,

которые протекают не в виде инфекционной болезни: бактерионосительство,

вакцинальный процесс.

II. Инфекционные болезни отличаются от всех других болезней,

поражающих человека:  имеют своего возбудителя – это микробные агенты;  передаются от больного к здоровому;  инфекционные болезни имеют общие симптомы, благодаря которым врачи распознают эти болезни среди других (лихорадка, симптомы общей интоксикации – головная боль, миалгии, вялость, адинамия, апатия); Инфекционные болезни имеют строго циклическое течение. Различают следующие периоды инфекционной болезни: 1. Инкубационный период – от момента попадания в организм до первых неспецифических симптомов заболевания. 2. Продромальный период характеризуется появлением первых неспецифических симптомов – повышение температуры, вялость, слабость, головная боль. 3. Период разгара – все основные специфические клинические

симптомы заболевания достаточно выражены. 4. Период исхода – может быть различным: летальный исход, выздоровление. Выздоровление может быть полным (и клиническое, и микробиологическое) и неполным (только клиническое). При неполном выздоровлении формируется носительство.

Пути и механизмы передачи инфекции

 артифициальный (искусственный).  воздушно-капельный;  фекально-оральный;  контактный (прямой/непрямой);  трансмиссивный. трансплацентарный или в родах (от матери). Артифициальный –. Существуют различные подходы к классификации инфекционных болезней:  по этиологическому принципу: бактериальные, вирусные, грибковые, протозойные, прионные;  по происхождению: экзогенная, эндогенная (оппортунистическая);  по локализации: местная и генерализованная;  по числу возбудителей: моноинфекция и смешанная инфекция (микст);  по источнику заражения: антропонозная, зоонозная, сапронозная.  

3. Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний, их характеристика.

Микробиологические (бактериологические, микологические, вирусологические) методы основаны на выделении чистой культуры возбудителя и ее последующей идентификации на основании морфологических, культуральных, биохимических, антигенных (серологических) и других признаков. Располагая чистой культурой бактерий, можно определить их родовую и видовую принадлежность, факторы патогенности, а также чувствительность к антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам.

Микологические исследования проводят при диагностике кандидозов путем определения нарастания количества клеток дрожжеподобных грибов рода Candida, а также глубоких микозов.

Вирусологический метод является наиболее достоверным в диагностике вирусных инфекций. Однако его трудоемкость, связанная с приготовлением культуры клеток, обработкой исследуемого материала, а также со сравнительно частым получением отрицательных результатов, ограничивают применение данного метода. Кроме того, он требует затраты сравнительно большого времени  

 

 

 

 

БИЛЕТ 2

1 . Бактерии. Определение. Ультраструктура бактериальной клетки . Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Принципы классификации бактерий по Берджи. 

Бактерии – одноклеточные микроорганизмы ,лишенные структ оформленного ядра,относящ к прокариотам. Бактерии относятся к растениям. В основном одноклеточные,лишенные хлорофилла. Размеры бактерий от 0,1-0,3 до 10-15 мкм. В зависимости от формы клеток все бактерии делятся на кокки, палочки и извитые формы.

Для изучения морфологии бактерий используются различные виды

Микроскопии: Темнопольный микроскоп .Микроскопию в темном поле зрения используют для исследования подвижности бактерий, выявления возбудителей сифилиса, лептоспироза, возвратного тифа. Фазовоконтрастна микроскопия  способ микроскопического исследования прозрачных, не поглощающих света обьектов.

Люминесцентная. Этот метод позволяет наблюдать первичную или вторичную люминесценцию (свечение) микроорганизмов, клеток, тканей и отдельных их структур. Люминесцентную микроскопию широко применяют для выявления антигенов и антител 

Электронная микроскопия. Для изучения строения микроорганизмов на субклеточном и молекулярном уровнях, а также для исследования структуры и архитектоники вирусов используют электронный микроскоп

Ультраструктура бактерий изучается с помощью электронно-микроскопических и микрохимических исследований.

Основные морфологические структуры бактериальной клетки.

Снаружи клетка окружена клеточной стенкой, к ней прилегает ЦПМ

(плазмолемма). Она ограничивает цитоплазму, в которой располагаются: ядерный аппарат, рибосомы и различного рода включения. Помимо этих обязательных структур ряд бактерий образуют споры. Подвижные бактерии передвигаются с помощью жгутиков. Некоторые бактерии могут образовывать капсулу. Большинство бактерий на поверхности клеточной стенки несут ворсинки (по-другому их называютфимбрии или пили).

Клеточная стенка - это упругое ригидное образование, которое покрывает клетку снаружи. Клеточная стенка выполняет чрезвычайно важные функции:

- придает клетке определенную форму и размеры;

-выполняет защитную функцию;

-является стабилизатором осмотического давления;

- участвует в процессах питания и размножения;

- в клеточной стенке располагается основной О-АГ (соматический);

-с клеточной стенкой связана способность к продукции эндотоксина.

В 1885 г. датский ученый Грам предложил свой способ окраски

бактерий, и согласно этому способу все бактерии делятся на Грам+ и Грам- . В дальнейшем было установлено, что различное отношение к окраске по Граму является важным таксономическим признаком, с которым коррелируют основные биологические свойства бактерий. Различное отношение к окраске по Граму (тинкториальные свойства) связано с разным качественным и количественным составом их клеточной стенки. Бактерии могут потерять клеточную стенку (полностью или частично), но если клетки поместить в соответствующие осмотические условия, то они

могут сохранить свою жизнеспособность. Такие формы бактерий называются протопласты и сферопласты. Существует еще одна форма бактерий с дефектной клеточной стенкой – L-формы. L-формы, в отличие от протопластов и сферопластов, способны к

размножению. L –формы, разных видов бактерий морфологически не различимы. Некоторые L -формы могут реверсировать в исходный вид. 

Значение ЦПМ:

- выполняет функцию митохондрий;

- в ней локализованы ферменты, осуществляющие перенос электронов.

- через нее осуществляется транспорт веществ;

- участвует в биосинтезе ряда биополимеров, и в экскреции ряда

веществ;

- к ней прикрепляется бактериальная ДНК.

ЦПМ ограничивает цитоплазму бактерий, которая выглядит как

гранулярная структура. Эти гранулы – многочисленные рибосомы 70-го S-типа. В цитоплазме располагается ядерный аппарат или нуклеоид. У большинства бактерий ядерный аппарат представлен в виде кольцевой двойной нити ДНК. Одна нить обязательно прикреплена к ЦПМ. В ДНК клетки закодирована вся жизненно необходимая информация. У большинства бактерий есть еще один вид ДНК – это плазмиды. Они несут необязательную информацию для клетки. Кроме того, в цитоплазме имеются различного рода

включения. Это пластический и энергетический материал клетки.

Необязательные компоненты бактериальных клеток. Подвижные бактерии передвигаются с помощью жгутиков. Жгутики – это белковые структуры, состоящие из специфического белка флагелина. Этот белок относится к сократительным белкам типа миозина. На поверхности ряда бактерий обнаружены белковые образования – ворсинки (фимбрии, пили). Наиболее изучены ворсинки общего типа и F- пили. Ряд патогенных бактерий, попадая в условия макроорганизма способны образовывать капсулу. Она предохраняет клетку от действия защитных сил макроорганизма (фагоцитоз, действие АТ, действие АБ).

Группы бактерий, которые образуют капсулу не только в организме, но и на питательных средах, называются истинно капсульными бактериями.

Спора - это клетка в состоянии анабиоза. Споры бактерий образуются в неблагоприятных условиях внешней среды. Одна бактериальная клетка образует только одну спору, т.е. спора служит для сохранения вида.

2.  Патогенность, вирулентность бактерий, факторы вирулентности. Экзо- и эндотоксин.

Патогенность – способность микроорганизма проникать в организм и

размножаться там, вызывая инфекцию. Для патогенных бактерий характерны

нозологическая специфичность и органотропность. Патогенность - видовой

признак, качественный – стойкий, генетически детерминированный. 

Вирулентность – это свойство патогенных и условно-патогенных м/о проникать в организм, размножаться в нем и подавлять защитные силы организма, вызывая инфекционную болезнь. Вирулентность – признак индивидуальный штаммовый. Это весьма нестабильный признак. При этом ее изменение идет как в естественных, так и в лабораторных условиях. Единицы измерения – это количество микробов, вызывающих тот или иной биологический эффект при заражении экспериментальных животных. Различают единицы измерения DCL, DLM, LD50.

Факторы вирулентности

1. Структурные компоненты бактериальной клетки:

 капсула;

 пили;

 пептидогликан клеточной стенки;

 белки наружной мембраны;

 ЛПС Грам- бактерий.

2. Секретируемые факторы:

 бактериоцины;

 ферменты «агрессии и защиты» (лецитовителлаза, фибринолизин,

гиалуронидаза, нейраминидаза);

 ферменты метаболизма бактерий (уреаза, каталаза и др.);

 факторы персистенции бактерий. 

Вирулентность реализуется через 4 последовательно сменяющих друг друга

процесса: адгезия → колонизация → инвазия → образование БАВ.

Адгезия- прикрепление микроба 

Колонизация – заселение определенной экологической ниши микробами.

Колонизации способствует участие бактериальных протеаз, продукция

бактерицинов и др.

Инвазия – проникновение возбудителя внутрь клеток. 

Эндотоксины - это липополисахариды, они термостабильны, продуцируются, как правило, грамотрицательными бактериями, обладают общетоксическим действием, являются слабыми антигенами, не переходят в анатоксин. 

Экзотоксины - это белки, они термолабильны, продуцируются, как правило, грамположительными бактериями, обладают специфичностью действия, сильные антигены, при специальной обработке переходят в анатоксины. 

4. Острые кишечные инфекции. Характеристика острых кишечных инфекций, пищевых токсикоинфекций, пищевых токсикозов. 

ОКИ – большая группа этиологически полиморфных заболеваний, возбудители которой принадлежат к различным группам микроорганизмов (простейшие, грибы, бактерии, вирусы). Все заболевания объединены в одну группу на основании эпидемиологического признака – пути распространения и входных ворот. Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются различные условно-патогенные бактерии: представители семейств Enterobacteriaceae (рода: Escherichia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter и др.), Vibrionaceae (рода: Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas), Bacillaceae (рода: Bacillus, Clostridium), Streptococcaceae (род Enterococcus). Патогенез пищевых токсикоинфекций обусловлен одновременным попаданием в организм и микробов, и их токсинов, накопившихся в пищевом продукте. Клинически они характеризуются симптомами гастроэнтерита и нарушением водно-солевого обмена. Пищевые токсикозы вызываются экзотоксином бактерий, который образовался и накопился при размножении возбудителя в пищевых продуктах, при этом самих бактерий в них может и не быть. Однако, следует признать, что это деление весьма условно. Микробиологическая диагностика основана на обнаружении экзотоксина в исследуемом материале методами иммуноиндикации и постановке биологической пробы на белых мышах (реакция токсиннейтрализации). Для лечения используют антитоксическую противоботулинистическую  сыворотку.   

БИЛЕТ 3

3. L-формы бактерий, роль в инфекционной патологии. 

Существует еще одна форма бактерий с дефектной клеточной стенкой – L-формы. Lформы, в отличие от протопластов и сферопластов, способны к размножению. L –формы, разных видов бактерий морфологически не различимы. Некоторые L -формы могут реверсировать в исходный вид. Есть стабильные и нестабильные. Играют роль в патогенезе заболеваний –туберкулез, сифилис

3.  Внутрибольничные инфекции: определение; self-, cross-, enviromental-инфекции.

Внутрибольничные инфекции называют еще нозокомиальными, или госпитальными инфекциями. Наиболее восприимчивыми к внутрибольничным инфекциям являются пациенты хирургических (92%) и урологических отделений, а также родовспомогательных учреждений.  Наиболее частыми возбудителями внутрибольничных инфекций являются: – грамположительные кокки:Staphylococcusaureus, Staphylococcusepidermidis, Streptococcuspyogenes и Enterococcusfaecalis; – грамотрицательные (аэробные и факультативно-анаэробные) палочки: Pseudomonasaeruginosa, Klebsiellapneumoniae, Рroteusmirabilis, Proteusvulgaris, Escherichiacoli, Serratiamarcescens, Salmonellatyphimurium; – грамположительные и грамотрицательные, чаще анаэробные палочки (например, Clostridiumdifficile, Bacteroidesfragilis, Fusobacteriummortiforum); – дрожжеподобные грибы. Основными путями передачи внутрибольничных инфекций являются воздушнокапельный и контактно-бытовой, однако помимо них могут быть и специфические пути передачи - инструментальный, имплантационный, ангиогенный (постинфузионный, посткатетеризационный). Основной метод диагностики внутрибольничных инфекций бактериологический. Основным направлением борьбы с внутрибольничными инфекциями является их неспецифическая профилактика.

Self-infections -(эндогенная инфекции)- инфекции, источником возбудителей является сам больной 

Cross-infections – (перекрестное инфецирование)- источником возбудителя послужил другой человек-пациент или персонал ЛПУ

 Environmental infections- источником возбудителя послужила больничная среда, это кишечные инфекции и инф дыхательных путей 

3.  Общая характеристика энтеробактерий. Эшерихиозы: характеристика возбудителей, патовары, микробиологическая диагностика. 

Enterobacteriaceae - это семейство включает многочисленных представителей. Биологические свойства. Все энтеробактерии - палочки средней величины с закругленными концами, расположенные беспорядочно, аспорогенны, капсулообразование непостоянно. Одни энтеробактерии подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, другие неподвижны. По типу получения энергии являются факультативными анаэробами. Грамотрицательны. Культуральные свойства. Все энтеробактерии не требовательны к питательным средам. На МПА образуют однотипные колонии средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, бесцветные. На МПБ – равномерное помутнение. Для выделения энтеробактерий использую дифференциально-диагностические среды. Биохимические

свойства общие для всего семейства:- расщепляют глюкозу до кислоты или до кислоты и газа; - редуцируют нитраты в нитриты; - каталаза +, оксидаза -, OF-тест +/+ (окисление и ферментация).

Антигенное строение. Все энтеробактерии имеют О-антиген и К-антиген, Подвижные представители  имеют Н-антиген.  Факторы патогенности энтеробактерий делят на 4 группы: 1. Факторы, определяющие взаимодействие бактерий с эпителием  соответствующих экологических ниш и колонизацию зоны первичного инфицирования.  В настоящее время полагают, что сигналы, генерируемые при  адгезивных взаимодействиях, могут напрямую вызывать диарею.  2. Факторы, обеспечивающие устойчивость бактерий к факторам защиты  макроорганизма и способность размножаться in vivo 3. Факторы, индуцирующие синтез цитокинов и медиаторов воспаления, ассоциирующихся с иммунопатологией - бактериальные модулины. 4. Токсины и токсические продукты, вызывающие патологические  изменения в органах и тканях макроорганизма. Различают четыре типа токсинов: - энтеротоксины;- токсины, нарушающие цитоскелет клетки; - токсины, вызывающие гибель клетки – токсин Шига и шигоподобные токсины, а также энтерогемолизины; - токсины, влияющие на нервную систему кишечника посредством  освобождения нейромедиаторов-трансмиттеров, влияющих на гладкую мускулатуру кишечника.

Морфологические свойства E. coli в основном соответствуют характеристике семейства, однако кишечная палочка капсулу не образует, в большинстве подвижны. Представители вида E. coli по своим патогенным возможностям подразделяются на условно-патогенные и патогенные (диареегенные). Условно-патогенные E. coli входят в состав нормальной микрофлоры организма человека

Условно-патогенные E. coli в настоящее время делят на 3 патовара:

1. MENEC – менингиальные кишечные палочки, вызывают

менингиты;

2. SEРEC – септицемические кишечные палочки, вызывают сепсис;

3. UPEC – уропатогенные кишечные палочки, вызывают уретриты.

1. Патогенные E. coli вызывают экзогенные коли-инфекции

(эшерихиозы).

Диареегенные E. coli по биологическим делятся на 6 патоваров:

1. ETEC – энтеротоксигенные кишечные палочки;

2. EIEC – энтероинвазивные кишечные палочки;

3. EPEC – энтеропатогенные кишечные палочки;

4. EHEC – энтерогеморагические кишечные палочки;

5. EaggEC – энтероагрегативные кишечные палочки;

6. DAEC – диффузноприкрепляющиеся кишечные палочки.

Патовары E. coli отличаются по своим биологическим свойствам и факторам вирулентности, что находит отражение в патогенезе и клинике вызываемых заболеваний.   

БИЛЕТ 4 5. Споры, капсулы у бактерий, некультивируемые формы бактерий. Методы изучения. 

Ряд патогенных бактерий, попадая в условия макроорганизма способны образовывать капсулу. Она предохраняет клетку от действия защитных сил макроорганизма (фагоцитоз, действие АТ, действие АБ). Группы бактерий, которые образуют капсулу не только в организме, но и на питательных средах, называются истинно капсульными бактериями.

Спора - это клетка в состоянии анабиоза. Споры бактерий образуются в неблагоприятных условиях внешней среды. Одна бактериальная клетка образует только одну спору, т.е. спора служит для сохранения вида.

Некультивируемыми (НФ) называют такие формы микроорганизмов, которые в ответ на действие неблагоприятных факторов прекращают рост на питательных средах, но сохраняют жизнеспособность, а при улучшений условий культивирования возобновляют пролиферацию. 

34.   Источники и пути передачи возбудителей инфекционных болезней. 

Пути и механизмы передачи инфекции

Существует три основных варианта передачи возбудителя человеку:

 горизонтальный;

 вертикальный;

 артифициальный (искусственный).

Горизонтальный путь включает:

 воздушно-капельный;

 фекально-оральный;

 контактный (прямой/непрямой);

 трансмиссивный.

Вертикальный – трансплацентарный или в родах (от матери).

Артифициальный – передача возбудителя при врачебных манипуляциях. 

64. Бактериальная дизентерия: характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика. 

Род Shigella. Представители этого рода являются возбудителями бактериальной дизентерии. Морфологические свойства шигелл в основном соответствуют характеристике семейства, однако они капсулу не образует, неподвижны. Биохимические свойства. Первые сутки все шигеллы лактозоотрицательные, углеводы ферментируют только до кислоты. Международная классификация шигелл основана на биохимических свойствах и антигенном строении. В антигенном отношении однородны. Факторы вирулентности: 1) Шигеллы обладают тропизмом к эпителиальным клеткам толстой кишки; 2) а) основной фактор вирулентности – способность к инвазии и внутриэпителиальному паразитированию. Способность к инвазии определяется наличием у них БНМ, синтез которых кодируется плазмидой. Попав в толстую кишку, шигеллы преодолевают слизистый барьер и, лизировав гликокаликс, прикрепляются к рецепторам мембраны колоноцитов. Если они вирулентные, то у них имеются БНМ, которые побуждают мембрану колоноцитов к интернализации (захвату) возбудителя, в результате чего шигеллы оказываются внутри клеток в составе вакуоли, стенки которой образованы мембраной клетки. Затем шигеллы начинают размножаться и вырабатывают вещество – контактный гемолизин, под действием которого разрушается мембрана вакуоли и клетки. Шигеллы попадают в межклеточное пространство и начинаются последующие циклы их репродукции (поражаются другие клетки). При дизентерии процесс идет горизонтально, и, как правило, шигеллы за приделы слизистой не проникают. Размножение шигелл сопровождается гибелью клеток. Это приводит к образованию язв, окруженных перифокальным воспалением. Эти язвы являются характерным паталого-анатомическим субстратом при дизентерии и хорошо видны при ректороманоскопии. Формирование язв приводит к появлению в фекалиях крови и слизи. б) Все шигеллы продуцируют эндотоксин, который оказывает на организм общетоксическое действие. в) Доказано, что все виды шигелл могут продуцировать экзотоксин, но постоянно экзотоксин продуцирует шигелла Григорьева-Шига – токсин Шига. Этот токсин оказывает на организм нейротоксическое, цитотоксическое и энтеротоксическое действие. Дизентерия, вызванная шигеллами Григорьева-Шига, протекает тяжело, летальность составляет 10 %. У всех других шигелл синтез экзотоксина обычно репрессирован, а у шигелл ГригорьеваШига дерепрессирован. г) Все шигеллы продуцируют бактриоцины, поэтому после перенесенной дизентерии всегда развивается дисбактериоз. Эпидемиология, патогенез и клиника. Дизентерия – антропоноз, источником является больной человек, путь распространения – фекально-оральный. Все шигеллы патогенные, но заболевания вызывают только вирулентные штаммы (имеющие БНМ). Попав в организм, они минуют желудок, тонкую кишку и поражают колоноциты. Дизентерия – общее инфекционное заболевание, когда на фоне общей интоксикации появляются поражения кишечника: частый жидкий стул (до 40 раз в сутки), тенезмы, в фекалиях примеси крови и слизи. МБД. 1) бактериологическое исследование 2) иммуноиндикация 3) ПЦР Специфическая профилактика – не разработана. Этиотропная терапия. В тяжелых и средней тяжести случаях назначают антибиотики, нитрофураны (фурозолидон), фторхинолоны. Для лечения кишечных инфекций применяют левомицетин, тетрациклин, ампициллин.  

 

 

 

 

 

 

БИЛЕТ 5 6. Особенности метаболизма у бактерий, методы его изучения. Конститутивные и индуцибельные ферменты бактерий

Как и все живые существа, бактерии обладают обменом веществ,

который складывается из единства и борьбы двух противоположных процессов: катаболизма и анаболизма.

Особенности метаболизма бактерий:

- все обменные процессы протекают интенсивно;

- процессы распада веществ преобладают над процессами синтеза.

Изучение метаболизма бактерий является необходимым этапом

бактериологического исследования и, наряду с другими свойствами, используется для идентификации бактерий.

Методы изучения метаболизма бактерий:

- определение продуктов метаболизма, которые накапливаются в

питательной среде;

- определение продуктов метаболизма, которые накапливаются в самой бактериальной клетке.

Обмен веществ у бактерий может протекать только с помощью

ферментов. У бактерий обнаружено более 1000 ферментов.

Ферменты бактерий по локализации делятся на:

- экзоферменты, которые выделяются во внешнюю среду;

- эндоферменты – работают в клетке.

По продукции различают ферменты:

- конститутивные- ферменты ,синтез которых не зависит от наличия субстрата в среде

- индуцибельные- ферменты ,синтез которых зависит от наличия субстрата в среде 

35. Противомикробная резистентность. Механизмы неспецифической противомикробной резистентности.

Противомикробная резистентность (ПМР) – это одно из проявлений общей физиологической реактивности – способность макроорганизма отвечать на микробный

агент. Наименьший уровень ПМР у новорожденных и пожилых людей. ПМР слагается из многочисленных тканевых и гуморальных механизмов.

Неспецифические механизмы ПМР.

1. Кожно-слизистые барьеры. 

Кожа и слизистые оболочки обладают выраженной антимикробной

активностью – бактерицидное действие, которое обеспечивается:

- нормальной микрофлорой, основной функцией которой является

колонизационная резистентность;

- секретами потовых и сальных желез;

2. Подкожно-жировая клетчатка (ПЖК)

Здесь микроорганизмы сталкиваются со следующими механизмами защиты:

- воспаление;

- фагоцитоз.

Если микроорганизмы повреждают тканевые барьеры, они попадают в 

3. лимфатическую систему – барьерная функция лимфоцитов.

Если микробам удается преодолеть этот барьер, они попадают в

4. кровь, которая обладает выраженной бактерицидной активностью.

Изучение бактерицидных свойств крови показало, что кровь содержит целый ряд факторов:

- α-лизин (алексин, комплемент). 

- β-лизин. Обладает более узкой биологической активностью:

- лизоцим.

- пропердиновая система – система противовирусных и

противоопухолевых белков.

- интерферон. 

В крови действуют не только гуморальные, но и тканевые механизмы – это функция нейтрофилов (фагоцитоз), барьерная функция эндотелия кровеносных сосудов. Поэтому внутренняя среда организма и биологические жидкости в норме стерильны.

Неспецифические механизмы достаточно надежны, но тем не менее имеют ряд существенных недостатков:

- эти механизмы неспецифичны; они в одинаковой степени

активны и в отношении патогенных и услвно-патогенных и

сапрофитных микроорганизмов.

- они однообразны: всегда действуют одинаково.

- их необучаемость – одинаково действуют при первой и

повторной встрече с микроорганизмом, а между тем за 70-80 лет

жизни организм человек повторно сталкивается со многими

микробами. Это ограничивает их эффективность.

- м/о – это легко изменяющиеся организмы, в том числе и по своим

факторам вирулентности.

65. Брюшной тиф и паратифы: характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика. 

Брюшной тиф, паратиф А и паратиф В вызывают серовары сальмонелл, строго адаптированные к паразитизму в организме человека - S.typhi, S.paratyphi A и S.paratyphi B. Существенные патогенетические особенности инфекционного процесса, вызванного этими сальмонеллами, служат основанием для выделения самостоятельной нозологической формы - тифо-паратифозное заболевание (брюшной тиф, паратифы А и В). По признаку патогенности все сальмонеллы делят на две группы: 1) сальмонеллы патогенные только для человека (S. typhi, S.paratyphi А и В). Они вызывают самостоятельные тифопаратифозные заболевания (ТПЗ). Диагноз ставится по результатам иммуноидентификации. ТПЗ – антропоноз, источником инфекции является больной или носитель. 2) сальмонеллы, патогенные для человека и животных – они вызывают сальмонеллезы. В патогенезе ТПЗ различают ряд последовательных фаз, каждой из которых соответствует свой клинический период: 1. Фаза внедрения – сальмонеллы, попав в организм, минуя желудок, попадают в тонкий кишечник и прикрепляются к рецепторам мембран энтероцитов, затем проникают внутрь клеток, но в них не размножаются, а проходят через них транзитом и попадают в собственный слой слизистой оболочки кишки, а затем в лимфотический аппарат тонкого кишечника (пееровы бляшки, солитарные фолликулы). 2. Фаза первичной локализации сальмонелл – основным фактором вирулентности сальмонелл является их способность размножаться в макрофагах. Поэтому они размножаются в лимфатическом аппарате тонкого кишечника, частично гибнут, в результате чего выделяется эндотоксин, который выделяется в кровь, что приводит к эндотоксинемии. В этот период происходит сенсибилизация лимфатического аппарата тонкого кишечника. На этой фазе процесс может закончиться, и заболевание не возникает. Дальнейшая судьба зависит от вирулентности сальмонелл и состояния макроорганизма. Если сальмонеллы вирулентны, то они прорывают лимфатический барьер и поступают в кровь. 3. Фаза бактеремии – с током крови сальмонеллы разносятся ко всем органам. 4. Фаза вторичной локализации (паренхиматозной диффузии)5. Выделительно-аллергическая фаза – сальмонеллы

выделяются с мочой, желчью и т.д. С желчью они вновь попадают в тонкий кишечник, где происходит повторный контакт сальмонелл с сенсибилизированными лимфатическим аппаратом тонкого кишечника. Это приводит к развитию аллергических реакций, что проявляется в возникновении многочисленных язв на стенке кишечника, их прободении и кровотечении.  Клинически брюшной тиф и паратифы не различимы. Заболевание развивается остро, протекает тяжело с выраженными симптомами общей интоксикации. Опасными осложнениями брюшного тифа, связанными с развитием язвенных поражений, являются прободения язв и кишечные кровотечения. После перенесенного заболевания вырабатывается прочный и продолжительный иммунитет. Кроме перечисленных методов возможно использование иммуноиндикации и ПЦР. Основным методом диагностики носительства является бактериологическое исследование фекалий и желчи. Применяется также РПГА с эритроцитарным брюшнотифозным Vi-диагностикумом. Для этиотропного лечения используют антибиотики или другие химиотерапевтические препараты. Специфическая профилактика осуществляется убитой или химической вакциной. Для экстренной профилактики в очагах может быть применен бактериофаг.  

 

 

 

 

БИЛЕТ 6 7. Питание бактерий, механизмы питания, системы секреции. 

По типу питания, т.е. в зависимости от характера источника получения углерода и азота микроорганизмы делятся на аутотрофы и гетеротрофы. Аутотрофы используют неорганические вещества, а гетеротрофы – органические. В свою очередь, гетеротрофы делятся на паратрофов

(источник питательных веществ – объекты живой природы) и метатрофы (источник питательных веществ – органические вещества неживой природы). Прототрофы – это микроорганизмы, способные самостоятельно синтезировать все необходимые органические соединения.

Ауксотрофы – это микроорганизмы, не способные самостоятельно синтезировать необходимые соединения; они получают их в готовом виде из окружающей среды или организма хозяина.

Питание бактерий.

Под питанием мы понимаем процесс поступления в клетку

питательных веществ и выделение продуктов метаболизма.

Особенности этого процесса:

- бактериальные клетки лишены специальных органов для захвата и переваривания пищи. Поступление питательных веществ у них происходит путем всасывания через всю поверхность.

Различают 2 механизма поступления питательных веществ в клетку:

- активный транспорт осуществляют особые белки-переносчики, он

осуществляется при затрате энергии и идет против градиента

концентрации;

- пассивный транспорт – это простая и облегченная диффузия. 

36. Иммунитет, его функции. Виды иммунитета. Механизмы врождённого иммунитета. 

Иммунитет - это способ защиты генетического постоянства внутренней среды организма от веществ или тел, несущих на себе отпечаток чужеродной генетической информации в нем самом или попадающих в него извне.  

Общебиологическое значение иммунитета состоит : 

в надзоре за генетическим постоянством внутренней среды организма, распознавании "своего и чужого", 

охране генетической чистоты вида на протяжении жизни индивидуума. 

Для реализации этой важной функции в ходе эволюционного развития сформировалась специализированная система (комплекс) органов и тканей - иммунная система, которая представлена центральными и периферическими органами. Это такая же функционально значимая система организма человека, как пищеварительная, сердечно-сосудистая, дыхательная и другие.

Виды инфекционного иммунитета:

1) антибактериальный;

2) антитоксический;

3) противовирусный;

4) противогрибковый;

5) антипротозойный.

Первая фаза защиты человека от инфекции, называемая врожденный иммунитет, включает

1. Механический барьер в виде эпителиальной поверхности, защищающей человека от проникновения микроорганизмов. Бактерии, которые прошли через этот барьер, встречаются с двумя следующими линиями защиты.

2.Комплемент. Бактерии активируют альтернативным путем комплемент, который находится в плазме и может опсонизировать или разрушать бактерии.

3. Нейтрофилы. Макрофаги. Бактерии поглощаются макрофагами, имеющими на поверхности рецепторы, общие для всех бактерий (например, к липополисахариду – СД14). После связывания бактерий с рецепторами макрофагов, происходит инициирование

синтеза цитокинов макрофагами, а бактерии поглощаются макрофагами и перевариваются ими.

4.NK-клетки. Вирусинфицированные клетки разрушаются NK-лимфоцитами (естественными киллерами).

Активация комплемента альтернативным путем и захват микроорганизмов тканевыми макрофагами имеют место в ранние часы после инфицирования. Далее включаются механизмы адаптивной защиты – гуморальный и клеточно-опосредованнный иммунный ответ.

66. Кишечные иерсиниозы: характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика. 

род Yersinia

Внутри рода по биохимическим свойствам выделяют 11 видов. Патогенной для человека является Y. рestis (включена в это семейство по данным

геносистематики). Y. pseudotuberculosis, Y, enterocolitica – вызывают кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез.

Иерсиниозы – сапронозы. Специфическая профилактика иерсиниозов не разработана.

Этиотропная терапия: антибиотики.  

 

 

 

 

БИЛЕТ 7

8. Белковый и углеводный обмен у бактерий, методы изучения.

Углеводный обмен.

Сложные углеводы внешней среды могут расщепить только те бактерии, которые выделяют ряд экзоферментов (полисахаридазы, олигосахаридазы). Внутрь клетки может поступить только глюкоза. Ее судьба двояка. Меньшая ее часть идет на синтез собственных полисахаридов клетки, а большая – подвергается дальнейшему расщеплению. Оно может идти двумя путями:

- В аэробных условиях образуются конечные продукты углекислый газ и

вода, и процесс называется «горением».

- В анаэробные условиях образуются самые различные промежуточные

продукты, и процесс называется «брожение».

Способность бактерий расщеплять углеводы обозначается как сахаролитическая активность.

Белковый обмен.

Во внешней среде содержатся сложные белки. Их расщепляют только те бактерии, которые выделяют ферменты протеазы. Расщепление белков идет до пептонов. Большинство бактерий способны расщепить пептоны до аминокислот. В бактериальную клетку могут проникнуть только аминокислоты. В клетке большая часть аминокислот идет на синтез собственных белков, а меньшая часть подвергается дальнейшему расщеплению, которое идет путем дезаминирования и декарбоксилирования. Если расщепление белка идет в аэробных условиях, процесс называется тление; если в анаэробных условиях - гниение. Способность бактерий расщеплять белки обозначается, как протеолитическая активность. Способность бактерий расщеплять пептоны

обозначается как пептолитическая активность. Способность бактерий расщеплять сложные вещества до простых получила название ферментативная или биохимическая активность.

37. Понятие адаптивный иммунитет. Его особенности, механизмы адаптивного иммунитета. 

Адаптивный иммунитет - специфический. Материальные носители адаптивного иммунитета - лимфоциты. Уникальное и отличительное свойство лимфоцитов как множества клеток - способность распознавать почти неограниченное (1018) разнообразие молекулярных объектов - антигенов. Лимфоциты характеризуются экспрессией Тклеточных (TCR) или В-клеточных (BCR) рецепторов, распознающих только одну антигенную детерминанту либо небольшое число структурно очень близких детерминант, и поэтому, в отличие от PRR, обладающих высокой специфичностью 

Адаптивный (приобретённый) иммунитет формируется в течение жизни индивидуума. Активно приобретённый иммунитет - состояние невосприимчивости к инфекции после перенесённого инфекционного заболевания или после вакцинации (сам организм вырабатывает соответствующие антитела). Пассивно приобретённый иммунитет - состояние невосприимчивости к инфекции в результате поступления в организм уже готовых антител от матери или в результате инъекции (сам организм эти антитела не вырабатывает).

67. Кампилобактериоз: характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика. Хеликобактериоз.

 Возбудители кампилобактериоза относятся к семейству Spirillaceae, роду Campylobacter. Кампилобактеры имеют характерную s-образную форму с одним или более витком. Подвижны. Клетки имеют по одному полярному жгутику на одном или обоих концах. Спор, капсул не образуют. Грамотрицательны. Микроаэрофилы, рост возможен при концентрации О2 не выше 3-6%. Очень требовательны к питательным средам. Для культивирования используют сердечно-мозговой или шоколадный агар. Однако, даже на этих высокопитательных средах видимый рост появляется на 6 сутки. Колонии круглые, мелкие, гладкие, выпуклые, блестящие. Имеют О- и Н- антигены. Они обладают выраженной инвазивной активностью и способны к внутриклеточному размножению. Продуцируют эндотоксин и энтеротоксин. Кампилобактериоз относится к сапронозам. Кампилобактеры широко распространены среди животных и птиц; средой их обитания

является вода. Заболевание человека, при которых в роли этиологического агента выступают кампилобактеры, делятся на 4 группы: − диарреи (энтероколиты); − генерализованные и/или локализованные внекишечные формы инфекции; − перинатальные инфекции; − заболевания ротовой полости. Наиболее частыми возбудителями диарреи являются C.coli, C.jejuni. Внекишечные формы кампилобактериозов обычно развиваются как осложнения кишечной, но могут возникать и как самостоятельное заболевание. Иммунитет не достаточно изучен. Основными методами микробиологической диагностикикампилобактериозов являются методы иммуноиндикации и молекулярно - генетические. Для этиотропной терапии используют антибиотики. Специфическая профилактика не разработана. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 8

9. Особенности дыхательного аппарата бактерий. Типы окислительновосстановительных процессов у бактерий, классификация бактерий по типу получения энергии. 

Особенности дыхательного аппарата бактерий:

- бактерии лишены митохондрий, их функцию выполняет ЦПМ и ее инвагинации - мезосомы, на которых локализуются специальные дыхательные ферменты;

- у бактерий могут отмечаться значительные колебания в качественном и количественном составе ферментов, образующих дыхательную цепь;

- у бактерий тонкие процессы регуляции дыхания затруднены, т.к. их дыхательный аппарат соприкасается как с внешней средой, так и с цитоплазмой.

Все окислительно-восстановительные процессы у бактерий делятся на 2 группы в зависимости от характера конечного акцептора водорода (Н). Если конечным акцептором водорода выступает кислород (может быть свободным и связанным), то этот тип носит название дыхание. Если органическое соединение - брожение.

В зависимости от типа получения энергии все бактерии делятся на:

- аэробы;

- факультативные анаэробы;

- облигатные анаэробы.

У всех перечисленных групп окислительно-восстановительные процессы происходят в дыхательном аппарате. Ферменты дегидрогеназы отщепляют водород от субстрата, передают его на НАД. НАД превращается в восстановленную форму, передает водород на НАДФ и затем на систему ФАД. Следующий этап – система цитохромов. Их функции – отщепление электрона от водорода и превращение водорода в протон. Этот окислительный процесс сопровождается выделением энергии. Параллельно идет процесс окислительного фосфорилирования, в ходе которого выделенная энергия аккумулируется в

макроэргических фосфатных связях типа АТФ. Последнее звено ЦПЭ у аэробов – цитохромоксидаза, которая передает электрон на молекулярный кислород и активирует его: в результате он получает способность соединяться с протоном с образованием воды. Т.о. аэробные бактерии получают энергию путем дыхания, причем в качестве конечного акцептора водорода они требуют наличия молекулярного кислорода.

Подавляющее большинство патогенных бактерий относится к факультативным анаэробам. Они, в зависимости от условий внешней среды (наличие или отсутствие кислорода), могут получать энергию и путем дыхания, и путем брожения. Подобная гибкость энергодающих процессов характерна только для бактерий. В качестве конечного акцептора кислорода некоторые бактерии могут

использовать не свободные молекулы кислорода, а находящиеся в составе окисных соединений. У таких бактерий отсутствует фермент цитохромоксидаза.

Облигатно-анаэробные бактерии получают энергию только путем брожения. У них отсутствует и система цитохромов, и цитохромоксидаза. Окислительное фосфорилирование осуществляется на уровне субстрата. В ряде случаев водород может передаваться системой флавиновых ферментов не на субстрат, а на молекулярный кислород с образованием перекиси водорода. У них отсутствует фермент каталаза, поэтому перекись водорода накапливается и оказывает на бактерии токсическое действие.

38. Иммунная система человека, её функции. Органы иммунной системы. 

Иммунная система – «барьер», который создают органы для совместной защиты организма от заболеваний.

Защитная. Активизируется сразу при обнаружении «чужака». К очагу заражения устремляются лимфоциты. Они блокируют и уничтожают вредителя, а затем выводят его из организма.

Иммунная память. Один раз определив болезнетворные бактерии, клетки-защитники маркируют их и в следующий раз сразу уничтожают их, не тратя времени на идентификацию.

  К центральным (первичным) органам иммунной системы относятся: тимус (вилочковая железа), красный костный мозг. У птиц сумка (бурса) Фабрициуса, здесь происходит лимфопоэз  иммунокомпетентных клеток: Т- и В-лимфоцитов.       

 Функции центральных органов: органы рождения, созревания, размножения и  дифференцировки клеток иммунной системы.  Периферические (вторичные) органы: селезёнка, лимфоузлы (функция биосита), миндалины(6шт.), лимфа, пейеровы бляшки кишечника, пластинчатые тельца в аппендиксе, лимфоциты крови. Здесь происходит иммуннопоэз (пролиферация и вторичная  дифференцировка  под влиянием антигенов).

68. Антибиотикоассоциированная диарея. Возбудители. Clostridium difficille. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика

Симптомокомплекс, развившийся на фоне антибиотикотерапии, может варьировать от незначительного преходящего интестинального дискомфорта до тяжелых форм диареи и

псевдомембранозного колита, который характеризуется водной диареей, лихорадкой, лейкоцитозом и формированием псевдомембран, обнаруживаемых в кале и при колоноскопии. В тяжелых случаях псевдомембранозный колит осложняется токсическим мегаколоном, перфорацией и шоком. Диагностика: анамнез, анализ кала (при тяжелой или стойкой диарее с целью обнаружения токсинов А или В), цитотоксиновый метод («золотой стандарт», недостаток – длительный период ожидания результатов исследования), иммуноферментный анализ (обладает высокой специфичностью, ложноотрицательные результаты фиксируются в 10–20% случаев), посев Clostridium difficile (недостаток – данный метод не позволяет дифференцировать непатогенные и патогенные штаммы). Лечение. При антибиотико-ассоциированной диарее легкой и средней степени тяжести: применяется регидратация, отменяются назначенный антибиотик (назначенные антибиотики) или производят замену антибиотика. В некоторых случаях при отмене антибиотика в течение 3 суток отмечается полный регресс симптоматики, если ее развитие было связанно с инфекцией Clostridium difficile. При антибиотико-ассоциированной диарее вызванной Clostridium difficile тяжелой степени применяют перорально метронидазол 250 мг 4 раза в сутки или ванкомицина 125 мг 4 раза в стуки в течение 10 дней. Как правило, диарея исчезает через 2–3 дня. В основном метранидазол используют в качестве препарата первой линии, а ванкомицин остается в качестве резерва для случаев тяжелой диареи, непереносимости метронидазола, неэффективности метронидазола или беременности. При любой степени тяжести антибиотико-ассоциированной диареи возможно применение пробиотиков (линекс, бифиформ). 

Clostridium difficile. Роль в патологии. Микробиологическая диагностика. 

Clostridium difficile в настоящее время признается в качестве одного из наиболее частых (15-25%), но не единственного возбудителя  антибиотикассоциированных диарей (ААД), колита, псевдомембранозного  колита (ПМК), в том числе нозокомиальных диарей (НД). Clostridium difficile Грамм +, спорообразующие, облигатно анаэробные  бактерии. Факторами патогенности являются экзотоксины (энтеротоксин и цитотоксин). Эпидемиологические штаммы как правило продуцируют оба вида токсинов. Кроме токсинов Clostridium difficile вырабатывает ряд ферментов: гиалорунидазу, гепариназу, коллагеназу и протеазу. Инфицирование Clostridium difficile может осуществляться как экзогенным, так и эндогенным путями. Контактный путь передачи Clostridium difficile через руки медперсонала является, вероятно, одним из наиболее значимых механизмов распространения внутрибольничной инфекции. Предполагается, что Clostridium difficile может участвовать в патогенезе так называемых неспецифических воспалительных заболеваний кишечника (болезнь Крона, неспецифический язвенный колит), непроходимости и стенозе толстой кишки, синдрома внезапной смерти у детей. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 9

10. Рост и размножение бактерий, фазы развития бактерий в жидкой питательной среде. Современные представления о колониях бактерий.

Рост и размножение бактерий

Рост – это необратимое увеличение массы клеток без изменения их числа в популяции. Бактерии нуждаются в определенных источниках питания и энергии, и все это они получают из искусственных питательных

сред. Требования к питательным средам:

- питательность;

- определенный рН среды;

- изотоничность;

- определенный окислительно-восстановительный потенциал или

редокс-потенциал;

- прозрачность;

- стерильность. 

Для культивирования бактерий необходимо соблюдать определенный температурный режим. По температурному оптимуму роста выделяют три

основные группы микроорганизмов:

- психрофилы;

- мезофиллы;

- термофилы.

Размножение бактерий - это увеличение числа клеток в популяции микроорганизмов. Размножение у бактерий осуществляется путем бинарного деления, у ветвящихся форм – путем дробления, почкования. Кроме того, у бактерий обнаружен аналог полового размножения. Колония бактерий – потомство одной бактериальной клетки на плотной питательной среде. В результате размножения бактерий на питательных средах формируется культура бактерий – это видимое глазом скопление бактерий. Колонии разных видов могут существенно отличаться друг от друга, поэтому изучение культуральных свойств является необходимым этапом бактериологического исследования.

При размножении на жидких питательных средах популяция бактерий проходит ряд последовательных фаз.

1. Lag фаза (фаза покоя). Продолжительность 3-4 часа. Начинается она с момента помещения бактерий в свежую питательную среду. За это время бактерии приспосабливаются, привыкают к новой питательной среде и растут.

2. log - фаза. Это фаза интенсивного размножения бактерий. Она продолжается 18-20 часов. Время генерации (время между делением 1 бактериальной клетки) является величиной постоянной.

3. Максимальная стационарная фаза. Начинается процесс отмирания бактерий, однако количество погибших бактерий равно количеству вновь появившихся. В эту фазу отмечается максимальная концентрация бактерий.

4. Фаза отмирания. Отмирание бактерий связано с истощением запаса питательных веществ в среде и накоплением токсических продуктов метаболизма. Ее продолжительность различна. 

39. Клетки, участвующие в реализации адаптивного иммунном ответа. Понятие "иммунокомпетентные клетки". Их классификация. 

иммунный ответ - это совокупность процессов, происходящих в иммунной системе в ответ на введение антигена. Клетки, участвующие в иммунном ответе (Т- и В-лимфоциты и макрофаги), называются иммунокомпетентными.  Иммунный ответ может быть: 

первичным (при первой встрече с антигеном), 

вторичным (при повторной встрече с антигеном). 

При этом выраженность первичного иммунного ответа достигает максимума к 7-8-му дню, сохраняется в течение 2 недель, а затем снижается. Вторичный иммунный ответ развивается быстрее и достигает большей (в 3-4 раза) интенсивности.  По типу взаимодействия клеток и образовавшихся клеток-эффекторов (по конечному результату) принято различать три типа иммунного ответа: 

гуморальный иммунный ответ, 

клеточный иммунный ответ, 

иммунологическую толерантность.

Иммунокомпетентные клетки - клетки, способные специфически распознавать антиген и отвечать на него иммунной реакцией. Такими клетками являются Т- и В-лимфоциты (тимусзависимые и костномозговые лимфоциты), которые под влиянием чужеродных агентов дифференцируются в сенсибилизированный лимфоцит и плазматическую клетку.Т-лимфоциты – это сложная по составу группа клеток, которая происходит от полипотентной стволовой клетки костного мозга, а созревает и дифференцируется в тимусе из предшественников. Т-лимфоциты разделяются на две субпопуляции: иммунорегуляторы и эффекторы. Задачу регуляции иммунного ответа выполняют Т-хелперы. Эффекторную функцияю осуществляют Т-киллеры и естественные киллеры. В орагнизме Т-лимфоциты обеспечивают клеточные формы иммунного ответа, определяют силу и продолжительность иммунной реакции.B-лимфоциты – преимущественно эффекторные иммунокомпетентные клетки. Зрелые В-лимфоциты и их потомки – плазматические клетки являются антителопродуцентами. Их основными продуктами являются иммуноглобулины. Влимфоциты участвуют в формировании гуморального иммунитета, В-клеточной иммунологической памяти и гиперчувствительности немедленного типа.

Макрофаги - клетки соединительной ткани, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков клеток и других чужеродных для организма частиц.

Роль макрофагов в иммунитете исключительно важна - они обеспечивают фагоцитоз, переработку и представление антигена T-клеткам.

69. Гнойно-воспалительные заболевания. Особенности. Возбудители.  Принципы лабораторной диагностики заболеваний, вызванных условно-патогенными бактериями. 

Гнойно-воспалительные заболевания - это большая группа этиологически полиморфных заболеваний, возбудители которых принадлежат к различным систематическим группам бактерий. На сегодня насчитывают свыше 5 тыс. возбудителей, которые вызывают ГВЗ.

Из них на 1-м месте стоят гноеродные (пиогенные) коки. На их долю приходится 70-80 % всех ГВЗ. Наиболее часто ГВЗ вызывают представители следующийх семейств: Staphylococcaceae, Streptococcaceae, Neisseriaceae.

2-е место занимает большая группа Грам отрицательных факультативно- анаэробных палочек (ГОБ). Из этой большой группы наибольшее значение имеют представители семейств Enterobacteriaceae (все условно-патогенные представители этого семейства), Pseudomonadaceae, Acinetobacter spp. Следующая большая группа возбудителей ГВЗ - это облигатные анаэробные бактерии. Здесь различают 2 подгруппы: клостридиальные анаэробы и неклостридиальные анаэробы.

В настоящее время ГВЗ вызывают, как правило, ассоциации различных видов микроорганизмов и наиболее часто это облигатные анаэробы и аэробы или облигатные анаэробы и факультативные анаэробы. Все ГВЗ могут протекать с самой различной клинической картиной ( от локальных местных форм до генерализованных). Возбудители ГВЗ в основном являются условно-патогенными бактериями и могут входить или входят в состав нормальной микрофлоры организма человека. Следовательно, они могут вызывать заболевания при снижении иммунологической реактивности макроорганизма. И поэтому большинство ГВЗ являются эндогенными инфекциями.  Один и тот же возбудитель может вызывать самые различные клинические проявления. И напротив, одинаковые по клинике заболевания могут быть вызваны самыми различными возбудителями.

Особенности микробиологической диагностики.

При ГВЗ основным методом микробиологической диагностики являетсятбактериологическое исследование.

Материал может быть различный и зависит от клиники заболевания. Поскольку большинство возбудителей ГВЗ являются условно- патогенными и входят в состав нормальной микрофлоры, то в каждом конкретном случае необходимо определить критерии этиологической значимости:

- если микроорганизм выделяется из стерильных в норме тканей (кровь, ликвор, моча в мочевом пузыре) или материал берется из замкнутого абсцесса путем пункции, в этом случае выделенный микроорганизм является возбудителем.

- если же на исследования направляется материал из нестерильных биотопов, то выделенный микроорганизм считается возбудителем, если его кол-во составляет 10*5 и более КОЕ на миллилитр или грамм.

- если выделяется ассоциация микроорганизмов, то необходимо определить этиологическое значение каждого ассоцианта.

- определение наличия антител к предполагаемому возбудителю. 

Этиотропная терапия ГВЗ осуществляется в основном антибиотиками при обязательном определении антибиотикочувствительности микроорганизмов. 

 

 

 

 

 

БИЛЕТ 10

11. Бактериальные биопленки. Строение. “Quorum sensing”-механизмы.

В настоящее время нормальную микрофлору рассматривают как самостоятельный  экстракорпоральный орган. Он имеет характерное анатомическое строение (биопленка) и  ему присущи определенные функции. Микроорганизмы, составляющие нормальную микрофлору, образуют четкую морфологическую структуру - биопленку, толщина которой колеблется от 0,1 до 0,5 мм. Биопленка представляет собой полисахаридный каркас, состоящий из микробных полисахаридов и муцина, который продуцирует клетки макроорганизма. В каркасе  иммобилизованы микроколонии бактерий - представителей нормальной микрофлоры,  которые могут располагаться в несколько слоев.  Так, в биопленке покрывающей кожу, микроколонии располагаются в 1-2 слоя; а в биопленке толстого кишечника в 500-1000 слоев. Устойчивость бактерий к воздействию  неблагоприятных факторов внутри биопленки в десятки и сотни раз выше по сравнению с  неиммобилизованными клетками. В состав нормальной микрофлоры входят как  анаэробные, так и аэробные бактерии. Соотношение анаэробов и аэробов в большинстве  биоценозов составляет 10:1.

Понятие “Quorumsensing”. 

Понятие quorumsensing - «чувство кворума» - быстрый способ общения микроорганизмов друг с другом посредством сигнальных молекул. 

40.  Лимфоциты. Поверхностные молекулы лимфоцитов. Функции лимфоцитов в иммунном ответе.

Лимфоциты — одни из основных клеток иммунной системы из группы лейкоцитов. Они отвечают за приобретённый иммунитет, так как могут распознавать возбудителей инфекции внутри или вне клеток, в тканях или в крови. Во время развития лимфоцитов на их поверхности появляются рецепторы для антигенов - чужеродных молекул. Рецепторы представляют из себя как бы «отпечаток» чужеродной молекулы. При этом одна клетка может содержать рецепторы только для одного вида антигенов. На этапе развития лимфоциты проходят отбор: остаются только значимые с точки зрения защиты организма, а также те, которые не несут угрозы собственным тканям организма. Параллельно с этим процессом лимфоциты разделяются на группы, способные выполнять ту или иную функцию защиты. Существуют разные виды лимфоцитов, например: B-лимфоциты, Tлимфоциты и большой гранулярный лимфоцит (БГЛ) . B-лимфоциты противодействуют

внеклеточным возбудителям, образуя специфические молекулы — антитела, которые способны связывать антигены. У T-лимоцитов множество задач. Одна из них — это регуляция с помощью специальных белков (цитокинов) активации B-лимфоцитов для образования антител; а также регуляция активации фагоцитов для более эффективного разрушения микроорганизмов. Эту задачу выполняет группа T-хэлперов. Ещё одна задача T-клеток - это разрушение инфицированных вирусами клеток организма. За это отвечают T-киллеры.

70. Стафилококковая инфекция. Характеристика возбудителей. MRSA, MRSE

Таксономия: относятся к отделу Firmicutes, семейству Мicrococcacae, роду Staphylococcus. К данному роду относятся 3 вида: S.aureus, S.epidermidis и S.saprophyticus. Морфологические свойства: Все виды стафилококков представляют собой округлые клетки. В мазке располагаются не-симметричными гроздьями. Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана, связанных с ним тейхоевых кислот, протеин А. Грамположительны. Спор не образуют, жгутиков не имеют. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Могут образовывать L-формы. Культуральные свойства: Стафилококки — факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые колонии с различным пигментом, не имеющим таксономического значения. Могут расти на агаре с высоким содержанием NaCl. Обладают сахаролитичес- кими и протеолитическими ферментами. Стафилококки могут вырабатывать гемолизины, фибринолизин, фосфатазу, лактамазу, бактериоцины, энтеротоксины, коагулазу. Стафилококки пластичны, быстро приобретают устойчивость к антибактериальным препаратам. Существенную роль в этом играют плазмиды, передающиеся с помощью трансдуцирующих фагов от одной клетки к другой. R-плазмиды детерминируют устойчивость к одному или нескольким антибиотикам, за счет продукции в-лактамазы. Антигенная структура. Около 30 антигенов, представляющих собой белки, полисахариды и тейхоевые кислоты. В составе клеточной стенки стафилококка содержится протеин А, который может прочно связываться с Fc-фрагментом молекулы иммуноглобулина, при этом Fab-фрагмент остается свободным и может соединяться со специфическим антигеном. Чувствительность к бактериофагам (фаготип) обусловлена поверхностными рецепторами. Многие штаммы стафилококков явля-ются лизогенными(образование некоторых токсинов происходит с участием профага). Факторы патогенности: Условно – патогенные. Микрокапсула защищает от фагоцитоза, способствует адгезии микробов; компоненты клеточной стенки – стимулируют развитие воспалительных процессов. Ферменты агрессии: каталаза – защищает бактерии от действия фагоцитов, в-лактамаза – разрушает молекулы антибиотиков. Резистентность. Устойчивость в окружающей среде и чувствительность к дезинфектантам обычная. Патогенез. Источником инфекции стафилококков - человек и некоторые виды животных (больные или носители). Механизмы передачи — респираторный, контактно-бытовой, алиментарный. Иммунитет: Постинфекционный – клеточно-гуморальный, нестойкий, ненажряженный. Клиника. Около 120 клинических форм проявления, которые имеют местный, системный или генерализованный характер. К ним относятся гнойновоспалительные болезни кожи и мягких тканей (фурункулы, абсцессы), поражения глаз, уха, носоглотки, урогенитального тракта, пищеварительной системы (интоксикации). Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной, кровь, моча,

мокрота, испражнения. Бактериоскопический метод: из исследуемого материала (кроме крови) готовят мазки, окрашивают по Граму. Наличие грам «+» гроздевидных кокков, располагающихся в виде скоплений. Бактериологический метод: Материал засевают петлей на чашки с кровяным и желточно-солевым агаром для получения изолированных колоний. Посевы инкубируют при 37С в течении суток. На следующий день исследуют выросшие колонии на обеих средах. На кровяном агаре отмечают наличие или отсутствие гемолиза. На ЖСА S. aureus образует золотистые круглые выпуклые непрозрачные колонии. Вокруг колоний стафилококков, обладающих лецитиназной активностью, образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком. Для окончательного установления вида стафилококка 2—3 колонии пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром для получения чистых культур с последующим определением их дифференциальных признаков. S.aureus – «+»: образование плазмокоагулазы, летициназы. Ферментация:глк, миннита, образование а-токсина. Для установления источника госпитальной инфекции выделяют чистые культуры стафилококка от больных и бактерионо-сителей, после чего проводят их фаготипирование с помощью набора типовых стафилофагов. Фаги разводят до титра, указан-ного на этикетке. Каждую из исследуемых культур засевают на питательный агар в чашку Петри газоном, высушивают, а затем петлей каплю соответствующего фага наносят на квадраты (по числу фагов, входящих в набор), предварительно размеченные карандашом на дне чашки Петри. Посевы инкубируют при 37 °С. Результаты оценивают на следующий день по наличию лизиса культуры. Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр анти-а-токсина в сыворотке крови больных. Определяют титр АТ к риботейхоевой кислоте( компонент клеточной стенки). Лечение и профилактика. Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к влактамазе). В случае тяжелых стафилококковых инфекций, не поддающихся лечению антибиотиками, может быть использована антитоксическая противостафилококковая плазма или иммуноглобулин, иммунизированный адсорбированным стафилококковым анатоксином. Выявление, лечение больных; проведение планового обследования медперсонала, вакцинация стафилококковым анатоксином. Стафилококковый анатоксин: получают из нативного анатоксина путем осаждения трихлоруксусной кислотой и адсорбцией на гидрате оксида алюминия. Стафилококковая вакцина: взвесь коагулазоположительных стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих заболеваний. Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержит стафилококковый анатоксин. Готовят из человеч. крови, с высоким содержанием антител. Применяется для специфического лечения. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 11

12. Бактериологическое исследование. Основные биологические свойства бактерий, определяемые в ходе бактериологического исследования и методы их изучения.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ - совокупность методов, применяемых для обнаружения и установления природы бактерий, выделенных от больных, бактерионосителей или из объектов окружающей среды.

1. Основные биологические свойства бактерий и методы их изучения: 1)морфологические св-ва (изучают с помощью микроскопа); 2)тинкториальные св-ва (изучают при окраске по Граму); 3)культуральные св-ва (макро- и микроскопически изучают свойства колоний, выращенных на плотной питательной среде и характер роста на жидкой питательной среде и на скошенном агаре, используемом ка среда накопления ); 4)сахаролитические свойства (изучают с помощью посевов в среды Гисса (полужидкие среды, содержащие один из углеводов и индикатор, реагирующий на продукты распада этого углевода, возникающие под сахаролитическим действием бактерий); протеолитические св-ва (изучают при посеве бактерий на желатин или лакмусовое молоко); пептолитические св-ва (изучают при посеве на мясо-пептонный бульон с помощью индикаторных полосок, вставленных под пробку пробирки, изменяющих цвет под действием летучих продуктов распада пептонов - индола, сероводорода, аммиака); Сахаролитические, протеолитические и пептолитические свойства - это биохимические или ферментативные свойства. 5)антигенные свойства (изучают в реакциях агглютинации или преципитации с помощью диагностических агглютинирующих или преципитирующих сывороток); 6)токсигенные свойства (изучают в реакции преципитации в геле с помощью антитоксических преципитирующих сывороток или с помощью биологических проб на лабораторных животных); наличие факторов вирулентности - с помощью специальных методик изучают наличие ферментов агрессии и защиты; 7)чувствительность к антибиотикам (методом индикаторных дисков или методом серийных разведений). 

41. Понятие "лимфопоэз" и "иммунопоэз". Этапы развития Т-лимфоцитов. Строение их антигенраспознающих рецепторов.

К центральным органам иммунной системы относят:

• красный костный мозг;

• тимус (вилочковую железу);

• лимфоидный аппарат кишечника (у млекопитающих — функциональный аналог сумки (бурсы) Фабрициуса у птиц).

В этих органах происходит первичная дифференцировка иммунокомпетентных клеток — Т- и В-лимфоцитов (лимфопоэз). 

В периферических органах иммунной системы под влиянием антигенов происходят пролиферация и вторичная дифференцировка лимфоцитов (иммунопоэз).

Основная задача T-лимфоцитов - распознавание чужеродных или изменённых собственных антигенов в составе комплекса с молекулами MHC. Если на поверхности своих клеток будут представлены чужеродные или изменённые свои молекулы, T-лимфоцит запускает их уничтожение.

• В отличие от B-лимфоцитов, T-лимфоциты не продуцируют растворимых форм антигенраспознающих молекул. Более того, большинство T-лимфоцитов не способны распознавать и связывать растворимые антигены.

• Для того чтобы T-лимфоцит «обратил на антиген своё внимание», другие клетки должны каким-то образом «пропустить» антиген через себя и выставить его на своей мембране в комплексе с MHC-I или MHC-II. Это и есть феномен презентации антигена T-лимфоциту. Распознавание такого комплекса T-лимфоцитом - двойное распознавание, или MHCрестрикция T-лимфоцитов.

Антигенраспознающие рецепторы Т-лимфоцитов 

На мембране Т-лимфоцитов имеются особые белковые молекулы, которые выполняют функцию распознавания и связывания антигенов – Т-клеточные рецепторы (ТКР). Они имеют один активный центр и отличаются по своему строению от молекул иммуноглобулинов. Молекула ТКР закреплена в клеточной мембране, состоит из двух цепей – альфа и бета, соединенных дисульфидной связью. Каждая цепь имеет по 2 домена – константный и вариабельный. Активный центр образуется вариабельными доменами альфа и бета – цепей. Гены ТКР построены аналогично генам тяжелых цепей иммуноглобулинов – состоят из фрагментов VDJC. Разнообразие специфичности активных центров ТКР также обеспечивается процессами рекомбинации вариабельных фрагментов генов альфа- и бета-цепей. Количество возможных вариантов конфигурации активных центров ТКР достигает 3х107. Эта цифра отражает количество клонов Т-лимфоцитов, способных распознавать3х107различных антигенных детерминант. 

71. Стрептококки. Характеристика возбудителей.  Клинические формы инфекций, вызванных пиогенным стрептококком. Инвазивные формы стрептококков. Пневмококковая инфекция. 

Стрептококки – клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку. Сарцины – располагаются в виде «пакетов» из 8 и более кокков.Стафилококки – кокки, расположенные в виде грозди винограда в результате деления в разных плоскостях. Палочковидные  бактерии. Форма палочковидная, концы клетки могут быть заостренными, закругленными, обрубленными, расщепленными, расширенными. Палочки могут быть правильной и неправильной формы, в том числе ветвящиеся, например у актиномицетов. По характеру расположения клеток в мазках выделяют:   Монобактерии – расположены отдельными клетками. Диплобактерии – расположены по две клетки. Стрептобактериии – после деления образуют цепочки клеток.  Палочковидные бактерии могут образовывать споры: бациллы и клостридии. Извитые  бактерии. Форма   - изогнутое тело в один или несколько оборотов. Вибрионы – изогнутость тела не превышает одного оборота. Спирохеты – изгибы тела в один или несколько оборотов. Для изучения их морфологии пользуются микроскопией.  1. Световая иммерсионная микроскопия – микроскопия в проходящем свете с использованием иммерсионного объектива и иммерсионного масла. Слой масла, введенный между объектом и фронтальной линзой объектива повышает разрешающую способность микроскопа 2. Темнопольная микроскопия: основана на явлениях рассеяния света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости частиц (например, взвеси бактерий). 3. Фазовоконтрастная микроскопия: основана на изменении фазы колебания световой волны при прохождении через объект, повышает контрастность

объекта. 4. Люминисцентная микроскопия: основана на спонтанной или наведенной специальными красителями фотолюминисценции (свечение в УФ-лучах). 5. Электронная микроскопия: основана на использовании для контрастирование объекта не светового потока, а потока электронов. Электронные микроскопы имеют большую РСМ, чем оптические, т.к. λ волны пробега электронов намного короче λ волны светового потока . Электронная микроскопия позволяет изучать ультраструктуру бактериальной клетки и мельчайшие микроорганизмы-вирусы. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 12

12. Санитарно-микробиологическое исследование воды, воздуха

42. Понятие "лимфопоэз" и "иммунопоэз". Этапы развития В-лимфоцитов. Строение их антигенраспознающих рецепторов.

В этих органах происходит первичная дифференцировка иммунокомпетентных клеток — Т- и В-лимфоцитов (лимфопоэз). 

В периферических органах иммунной системы под влиянием антигенов происходят пролиферация и вторичная дифференцировка лимфоцитов (иммунопоэз).

Антигенраспознающие рецепторы В-лимфоцитов

Антигенраспознающие рецепторы В-лимфоцитов представляют собой мономеры IgM. - т.н. мембранныйIgM. На поверхности В-лимфоцита находится около 200 000 молекул рецепторов. МембранныйIgMспособен специфически связываться как с растворимыми антигенами, так и с антигенами, расположенными на поверхности бактериальных клеток и вирусных частиц, также с антигенами, которые презентируют дендритные клетки и макрофаги.

Развитие В-лимфоцитов в течение всего постэмбрионального периода протекает в костном мозге. Под воздействием клеточного костномозгового микроокружения и гуморальных факторов костного мозга из стволовой лимфоидной клетки формируются В-лимфоциты

       Ранние этапы развития В-лимфоцитов зависят от прямого контактного взаимодействия со стромальными элементами. Более поздние этапы развития В-лимфоцитов протекают под воздействием гуморальных факторов костного мозга. Взаимодействие наиболее ранних предшественников В-клеток (ранних про-В-лимфоцитов) со стромальными элементами осуществляется с помощью поверхностных адгезивных молекул CD44, c-kit и SCF. В результате этих контактов происходит усиление пролиферации В-лимфоцитов и переход их на следующую стадию развития – поздних про-В-клеток. На поверхности поздних про-Вклеток экспрессируется рецептор к ИЛ-7. Под влиянием ИЛ-7, продуцируемого стромальными элементами, про-В-лимфоциты пролиферируют и дифференцируются в ранние пре-В-клетки, характеризующиеся наличием в их цитоплазме m-полипептидной цепи иммуноглобулина. Эти клетки имеют морфологию крупных лимфоидных клеток. В дальнейшем эти клетки трансформируются в малые пре-В-лимфоциты, у некоторых из которых в цитоплазме помимо m-тяжелой полипептидной цепи выявляются легкие цепи

иммуноглобулинов. На следующей стадии развития В-лимфоцитов происходит экспрессия поверхностных мономерных иммуноглобулинов М. Эти структуры и являются антигенраспознающими рецепторами В-клеток. Антигенная специфичность рецепторов генетически детерминирована. На последующем этапе развития В-лимфоцитов происходит ориентация клеток на синтез антител определенного класса. Появляются В-лимфоциты, которые экспрессируют наряду с IgМ молекулы класса IgA или IgG.

       Далее происходит экспрессия на клетках IgD. С экспрессией на лимфоцитах иммуноглобулинов D завершается этап антиген-независимого созревания В-клеток. Таким образом, на зрелых В-лимфоцитах поверхностные Ig-молекулы могут быть представлены следующими классами: 1) IgM, IgD; 2) IgM, IgA, IgD; 3) IgM, IgG, IgD. При этом все иммуноглобулины, представленные на одной В-клетке, имеют одинаковый идиотип, так как кодируются одними и теми же генами VH и VL.

       Экспрессия молекул ГКГ на В-лимфоцитах наблюдается, начиная со стадии про-Вклеток. Эти антигены экспрессированы на всех зрелых В-клетках. Рецепторы к СЗ компоненту комплемента (RC3b) и Fc- фрагменту Ig(RFc) впервые обнаруживаются в небольшом количестве на незрелых В-клетках. На зрелых клетках эти молекулы имеют большую плотность и легко выявляются. Количество этих рецепторов на зрелых клетках составляет около 105 молекул.

       Зрелые В-лимфоциты характеризуются наличием поверхностного IgD, высокой плотностью рецепторов к СЗ компоненту комплемента и Fc- фрагменту Ig, способностью трансформироваться в бластные формы под влиянием В-митогенов (ЛПС, PWM) и способностью трансформироваться под влиянием антигенов в антителообразующие клетки. 

72. Гонококковая инфекция. Характеристика  возбудителя, микробиологическая диагностика  гонореи.

Микробиологическая диагностика. Исследуют отделяемое уретры, влагалища, шейки матки, при бленнорее — гнойные выделения конъюнктивы глаза. При хронической гонорее исследуют также мочу. Основной метод лабораторной диагностики — микроскопия исследуемого материала. Наличие характерной триады признаков дает основание поставить лабораторный диагноз гонореи. Однако однократное обследование больных иногда бывает недостаточным. Для улучшения диагностики больным, у которых не обнаружен гонококк, рекомендуют проводить провокацию (инъекция гоновакцины, смазывание очагов поражения 1% люголевским раствором на глицерине), а затем ежедневно 3—7 дней бактериологическое исследование отделяемого из очагов поражения. В случае хронического течения инфекции, а также при острой гонорее, леченной антибиотиками, микроскопический метод может не дать положительных результатов, поэтому прибегают к микробиологическому исследованию патологического материала. Производят посев на свежеприготовленный сывороточный, кровяной или асцит-агар. Наряду с этим, начиная с 3-й недели заболевания, проводят серологическое исследование: ставят реакцию связывания комплемента (реакция Борде — Жангу) с сывороткой крови больного и гонококковым антигеном. Иногда прибегают к постановке кожно

аллергической пробы с гонококковой вакциной. Однако эта реакция может быть положительной в течение многих лет после перенесенного заболевания. 

Профилактика и лечение. Профилактика сводится к санитарно-просветительной работе среди населения, своевременному выявлению и лечению больных. Специфическая профилактика не осуществляется. Для профилактики бленнореи новорожденным в конъюнктивальный мешок вводят по 1—2 капли 30% раствора альбуцида.

Морфология и биологические свойства. Гонококки напоминают кофейные зерна или бобы. Это парные кокки, обращенные друг к другу вогнутыми сторонами. Размер их в среднем 0,7X1,3 мкм. В гнойном отделяемом располагаются в цитоплазме лейкоцитов, сохраняя там жизнеспособность (явление незавершенного фагоцитоза). В чистой культуре имеют вид круглых или бобовидных кокков, разных по величине, расположенных беспорядочно. Хорошо красятся всеми анилиновыми красками. Грамотрицательны. Внутриклеточное расположение, бобовидная форма и грамотрицательная окраска составляют характерную триаду свойств, которыми гонококки отличаются от других диплококков. Однако под действием лекарственных средств и при хроническом течении болезни они могут изменяться: наряду с грамотрицательными встречаются грамположительные гонококки неправильной формы, разной величины. При этом могут образовываться L-формы гонококка. Они обычно шаровидной формы и разных размеров: наряду с крупными встречаются очень мелкие. Спор, не образуют, неподвижны. В патологическом материале вокруг гонококка образуется слизистое капсулоподобное вещество. Аэробы. К питательным средам очень требовательны. Растут на средах, содержащих нативный человеческий белок (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость), при рН 7,2— 7,4, с обязательным добавлением витаминов. Обязательное условие культивирования — достаточная влажность Среды И присутствие СО,2. Рост происходит в пределах 30—39°С при оптимуме 37°С. На асцит-агаре колонии мелкие (1—2 мм), напоминающие капельки росы; иногда образуются дочерние колонии. На асцитическом бульоне дают слабое помутнение, образуют пленку, которая оседает на дно пробирки. Из углеводов разлагают только глюкозу. На кровяном агаре гемолиза не дают. Экзотоксина гонококки не образуют. При разрушении клетки выделяют эндотоксин, введение которого внутрибрюшинно белым мышам вызывает их гибель.

 

 

 

 

БИЛЕТ 13

13. Нормальная микрофлора тела человека. Строение, состав, основные функции.

Нормальная микрофлора – совокупность множества микробиоценозов характеризующихся определенным составом и занимающих тот или иной биотоп в организме.

Кожа и слизистая оболочка покрыты биопленкой, т.е. микроорганизмы, составляющие нормальную микрофлору, образуют четкую морфологическую структуру. Биопленка видна на электронной микрофотографии, толщина ее от 0,1 до 0,5 мм. Она представлена полисахаридным каркасом (матрикс) из микробных полисахаридов и муцина, продуцируемого клетками макроорганизма. В этом каркасе расположены микроколонии клеток нормальной микрофлоры. Они могут располагатся в 1-2 слоя (кожа), а в

толстом кишечнике 500-1000 слоев. Дистальный отдел кишечника человека представляет собой огромный биореактор, в котором присутствуют более 100 триллионов

преимущественно анаэробных микроорганизмов - бактерий, архебактерий и эукариотических организмов.

Суммарное количество видов, присутствующих в этом отделе пищеварительного тракта, по расчетным данным, полученным на основе анализа бактериальных рибосомальных РНК (16SrRNA) генов, может превышать 7000, из которых в настоящее время культивируют не более 800 видов. В фекалиях человека выявлено также порядка 1200 вирусных генотипов.

II. В любом биоценозе различают:

- постоянную, или автохтонную микрофлору

- транзиторную, или аллохтонную.

В естественных условиях, вероятно, нет ни одного биохимического процесса, ни одной функции живых организмов, которые осуществлялись бы без прямого или косвенного участия симбиотических микроорганизмов. В этой 

Основные функции микрофлоры пищеварительного тракта.

- морфокинетическое действие;

- регуляция газового состава полостей;

- участие в водно-солевом обмене;

- участие в формировании иммунологической толерантности к пищевым и

микробным антигенам;

- участие в метаболизме белков, жиров и углеводов;

- участие в обеспечении эукариотических клеток пищеварительного тракта

энергией;

- участие в кишечно-печеночной рециркуляции различных макромолекул;

- продукция разнообразных биологически активных соединений;

- иммуногенная роль;

- участие в колонизационной резистентности;

- участие в обеспечении гомеостаза симбиотических взаимоотношений

прокариотических и прокариото-эукариотических клеток;

- модуляция функции цитохромов р450 в печени и продукция р450 – схожих

цитохромов;

- детоксикация экзогенных и эндогенных токсических субстанций и

соединений;

- мутагенная/антимутагенная активность;

- регуляция поведенческих реакций, в том числе аппетита, сна, настроения,

циркадных циклов;

- хранилище генетического материала;

- регуляция репликации и фенотипической экспрессии генов

прокариотических и эукариотических клеток;

- регуляция запрограммированной гибели эукариотических клеток (апоптоза) 

43. Понятие "популяции" и "субпопуляции" лимфоцитов. Субпопуляции Т-лимфоцитов. 

Периферические Т-клетки подразделяются на различные субпопуляции, значительный прогресс изучения которых произошел с помощью техники моноклональных антител. 

Т-хелперы (помощники, индукторы) – запрограммированы индуцировать размножение и (или) дифференцировку клеток других типов. Например, они индуцируют секрецию антител В-лимфоцитами и стимулируют моноциты, тучные клетки и предшественники Ткиллеров к участию в клеточных иммунных реакциях. Т-хелперы активируют эффекторные, а Т-индукторы – регуляторные клетки, хотя различие между ними оказывается искусственным. Эта субпопуляция активируется антигенами, ассоциируемыми с продуктами генов МНС класса II – молекулами класса II, представленными преимущественно на поверхности В-клеток и макрофагов.

73. Менингококковая инфекция. Характеристика возбудителя. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции. Менингококковое бактерионосительство. Методы его выявления.

Менингококки - это диплококки, в мазках из материала, взятого от больного, имеют вид кофейных зерен. Спор не образуют, жгутиков не имеют, в организме образуют капсулу (исключение менингококки группы В). Грамотрицательны. Строгие аэробы. Требовательны к питательным средам. Растут только на средах с добавлением сыворотки. На сывороточном агареколонии нежные, прозрачные, средней величины. В сывороточном бульоне - помутнение и осадок на дне. Биохимическая активность невелика, ее изучение используется для дифференциации менингококков от других представителей рода. Менингококки крайне неустойчивы во внешней среде, что следует учитывать при доставке материала. У менингококков выделяют 4 группы антигенов. По капсульному полисахаридному антигену их делят на группы, которые обозначаются заглавными буквами латинского алфавита (А, В, С и т.д.). Большинство выделяемых в настоящее время штаммов относится к группам А, В, Y. К факторам вирулентности менингококков относят их способность к адгезии и колонизации клеток, инвазии и продукцию токсических и

аллергенных факторов. Важным компонентом вирулентности менингококков являются капсульные полисахаридные антигены, защищающие их от фагоцитоза, а также продукция ферментов агрессии и защиты. Подавление менингококками фагоцитов способствует их распространению в организме и генерализации инфекционного процесса. Менингококковая инфекция - антропоноз. Источником инфекции является больной или бактерионоситель. Основной путь передачи - воздушно- капельный. Клиническими формами проявления менингококковой инфекции могут быть: назофарингит, эпидемический цереброспинальный менингит, менингококцемия, менингококковый эндокардит. Для диагностики используются различные методы исследования: бактериоскопические (мазок из осадка спинномозговой жидкости при эпидемическом цереброспинальном менингите), бактериологические, методы иммуноиндикации, серодиагностики.

 

 

 

 

БИЛЕТ 14

14. Понятие «дисбактериоз»,  методы изучения. Препараты для коррекции дисбактериоза. Экоантибиотики. Понятие «эпигеномика».

Дисбаланс нормальной микрофлоры - это любые количественные или качественные  изменения типичной для данного биотопа нормофлоры человека, возникающие в  результате воздействия на макро- и/или микроорганизм различных факторов экзогенного  и эндогенного характера.  Микробиологическими показателями дисбактериоза служат:  1. Снижение численности одного или нескольких постоянных видов.  2. Потеря бактериями тех или иных признаков (E.coli lac") или приобретение  новых (E.coli Н1у+).  3. Повышение численности добавочных или транзиторных видов.  4. Появление новых, не свойственных данному биотопу видов.  5. Ослабление антагонистической активности нормальной микрофлоры.    Вне зависимости от возрастной группы к развитию дисбактериоза ведут:  - нерациональная антибиотикотерапия;  - длительная гормонотерапия или лечение нестероидными противовоспалительными  препаратами;  - оперативные вмешательства;  - стрессорные воздействия;  - воздействие радиации, облучения;  - иммуносупрессивная терапия при трансплантации органов и тканей;  - применение ряда наркологических, местно анестезирующих, рвотных, слабительных,  отхаркивающих, желчегонных и других средств, которые изменяя моторику слизистых,  нарушают образование муцина;  - потенциальными дисбиотическими агентами могут быть некоторые психротропные,  антигистаминные препараты, нитраты, гормоны;  - воздействие химических веществ (промышленные яды, пестициды);  - нерациональное питание;  - острые и хронические заболевания (дизентерия, сахарный диабет).  Дисбактериоз различных биотопов имеет различные клинические проявления.  1.Дисбактериоз кишечника может проявляться в виде диареи, неспецифического колита,  синдрома малой сорбции, дуоденита, язвенной болезни желудка, гастрита, гастроэнтерита,  хронических запоров.  2.Дисбактериоз органов дыхания чаще протекает в форме нарушений со стороны  дыхательных путей, бронхитов, бронхиолитов, хронических, заболеваний легких.  3.Основными клиническими проявлениями дисбактериоза ротовой  полости являются гингивиты, пародонтит, стоматит, кариес. 4.Дисбактериоз мочеполовой системы женщин протекает как вагиноз.   Наиболее логичной выглядит заместительная терапия живыми бактериями, населяющими  толстый кишечник. Препараты, изготовленные на их основе, получили название  эубиотики или эубиотики. К ним

относятся, например, колибактерин, лактобактерин,  бифидобактерин, мутафлор, нормофлор, бифилакт, бификол и др

44. Понятие "популяции" и "субпопуляции" лимфоцитов. Субпопуляции Влимфоцитов.

Все В-лимфоциты обладают рядом общих свойств: они продуцируют антитела и иммуноглобулин (Ig), экспрессируют антиген-распознающий Ig-рецептор (B-Cell Receptor — BCR) и поверхностные маркеры CD 19 и CD45 (В220). Вместе с тем можно выделить несколько субпопуляций В-клеток, различающихся по происхождению, дифференцировке, фенотипу и функциональным свойствам. Выделяют 3 основные субпопуляции В-клеток (табл.1). Одна из них рассмотрена выше — В2-клетки (иногда их называют обычными Вклетками), локализующиеся преимущественно в селезенке, костном мозгу, лимфоузлах, пейеровых бляшках и отдельных фолликулах лимфоидной ткани кишечника. Гистологическая единица, являющаяся местом сосредоточения В2-клеток — лимфоидный фолликул. Эти клетки составляют подавляющеебольшинство циркулирующих Влимфоцитов и играют основную роль в гуморальном иммунном ответе. Две другие субпопуляции — В1- и В-клетки маргинальной зоны (MZВ-клетки). Большинство данных о различных субпопуляциях В-лимфоцитов получено на мышах. Сведения о субпопуляцияхВ-клеток человека крайне скудны. В1-клетки локализуются преимущественно в серозных полостях — брюшной и плевральной. Небольшое количество В1-лимфоцитов, преиму- щественно клетки, секретирующие антитела, выявляют в селезенке, где на их долю приходится 1–5% от числа В-клеток. Некоторые В1-клетки миг- рируют (через сальник) в слизистую оболочку кишечника и брыжеечные лимфоузлы (до 50% IgA-продуцентов в лимфоидной ткани кишечника — В1-клетки). В лимфатических узлах у мыши они отсутствуют. Выделяют2 субпопуляции В1-клеток. Основной дифференциальный признак при этом — экспрессия мембранной молекулы СD5 (известной как один из маркеров Т-клеток). В1а-клетки одновременно несут на поверхности молекулы IgM и CD5. CD5 отсутствует на всех остальных В-лимфоцитах, в том числе на В1b-клетках, в остальном очень схожих с В1а-клетками. Для В1-клеток характерен ≪активированный фенотип≫, что проявляется в экспрессии на их поверхности костимулирующих молекул СD80 и СD86. Это свойство обеспечивает способность В1-лимфоцитов выполнять функции АПК. B1а- и B1b-клетки экспрессируют BCR, содержащий мембранную форму IgM. Известны исключения: описано переключение IgM на IgA в lamina propria кишечника. Перестроенные V-гены мембранного IgM В1а-клеток не содержат N-вставок (т.е. в их перестройке не участвует фермент TdT). Разнообразие V-генов В1-клеток существенно ниже, чем у В2-клеток. Это связано с различиями в условиях развития: В1а-клетки в онтогенезе появляются раньше других субпопуляций — еще до рождения. Они развиваются в печени плода при участии IL-5 и IL-10 из клеток-предшественников, отличных от таковых у обычных В-клеток. Еще в эмбриональном периоде В1-клетки мигрируют в серозные полости, где они существуют в течение всей жизни организма. В1-клетки способны к самоподдержанию путем очень медленной пролиферации, восполняющей убыль клеток, погибающих по механизму апоптоза. В1b-клетки также развиваются в печени эмбрионов, а после рождения — в костном мозгу из других клеток-предшественников. B1b-лимфоциты расселяются на периферии несколько позже В1а-клеток — непосредственно перед рождением и сразу после него. При перестройке V-генов в B1b-клетках формируется

некоторое количество N-вставок. B1b-клетки также мигрируют в серозные полости и сохраняются там путем самоподдержания. Обе разновидности В1-клеток могут дифференцироваться в антителооб разующие клетки без стимуляции антигеном.  

74. Неклостридиальная анаэробная инфекция. Характеристика возбудителей. Методы культивирования анаэробов. 

– острая анаэробная хирургическая инфекция, сопровождающаяся гнилостным распадом тканей (гниение – процесс анаэробного окис­ления белкового субстрата). Этиология. Наибольшее клиническое значение в развитии гни­лостной инфекции имеют следующие группы анаэробных микроорга­низмов. 1. Грамотрицательные палочки: Bacteroides (B.fragilis, B.me­laninogenicus, ovatus, distasonis, vulgatus и др.), Fusobacterium. 2. Грамположительные палочки: Propionibacterium, Eubacterium, Bifidobacterium, Actinomyces. 3. Грамположительные кокки: Peptococcus, Peptostreptococсus. 4. Грамотрицательные кокки: Veilonella Кроме того, в развитии гнилостной инфекции могут принимать участие условно-патогенные анаэробы: кишечная палочка, протей. В патогенезе гнилостной инфекции, наряду с ассоциациями анаэробов, особое место занимает симбиоз анаэробов с аэробами. Микробные ассоциации при гнилостной инфекции – это не простая совокупность, поскольку многие эти процессы возникают и развиваются только в том случае, если присутствует каждый из участников ассоциации. При этом не только аэробы могут создавать оптимальные условия для анаэробов, возможен и обратный эффект. Подавляющее большинство анаэробных инфекционных процессов-полимикробы. Исходя из этого, положительный результат лечения может быть достигнут только при воздействии на анаэробную и аэробную инфекцию. Более того, некоторые виды гнилостной инфекции можно предупредить или лечить, воздействуя прежде всего на аэробную часть микробной популяции, которая создает условия для размно­жения анаэробов. Наиболее частая локализация гнилостной инфекции: 1. Поражение мягких тканей 2. Заболевания брюшины 3. Заболевания легких Характерные клинические симптомы при гнилостной инфекции 1. Наиболее частым симптомом анаэробной неклостридиальной инфекции является гнилостный запах экссудата, возникающий вследствие анаэробного окисления белковых субстратов. При этом образуются дурно пахнущие вещества:аммиак, индол, скатол, лету­чие сернистые соединения (сероводород, метилмеркаптан, диметил­сульфид). Поэтому зловонный запах экссудата всегда указывает на его анаэробное происхождение. Однако не все анаэробы образуют вещества, обладающие зло­вонным запахом. Интенсивный зловонный запах наблюдается чаще при наличии строгих анаэробов. Неприятный запах экссудата может быть при факультативных анаэробах. И, наконец, возможны ассоциации анаэробов и аэробов, когда экссудат существенного запаха не имеет. Следовательно, отсутствие гнилостного запаха не может служзить основанием для снятия  диагноза анаэробной неклостри­диальной инфекции. 2. Вторым признаком анаэробной инфекции является гнилостный характер экссудата. Очаги поражения содержат бесструктивный детрит, но при сопутствующей аэробной флоре может быть примесь гноя. Указанные очаги окружены мертвыми тканями серого или темного цвета. Кожа над очагами распада тканей коричневого или черного цвета. 3. Третий признак – цвет экссудата. Обычно он имеет серо­зеленый, коричневый или геморрагический характер. Цвет экссудата зависит от распада тканей и пигментообразующей способности некоторых анаэробов. 4. Четвертый

признак анаэробной инфекции – газообразование. При анаэробном метаболизме образуются плохо растворимые в воде газы: азот, водород, метан, сероводород и др. Поэтому при пора­жении мягких тканей наблюдается эмфизема (накопление газа в виде пузырьков), которая клинически определяется как крепитация. Однако не все анаэробы в равной степени вызывают газообразова­ние, поэтому при ранних стадиях и определенных ассоциациях кре­питация может отсутствовать. В этих случаях газ может быть выявлен рентгенологически или во время оперативного вмеша­тельства. Гнойники внутренних органов, содержащие газ, диаг­ностируются рентгенологически или с помощью ультразвукового исследования. 5. Для эндогенных очагов анаэробной неклостридиальной инфек­ции характерным является близость расположения к местам естест­венного обитания (пищеварительный тракт, ротовая полость, дыха­тельные пути, промежность и половые органы). 

 

 

 

 

БИЛЕТ 15

15. Ядерный аппарат бактерий и его особенности. Плазмиды бактерий.

Ядерный аппарат. У прокариотов нет оформленного ядра – его аналог  нуклеоид, он имеет фибриллярную структуру и не ограничено от цитоплазмы ядерной  мембраной, не имеет основных белков – гистонов, не содержит хромосом, не делится  митозом. В нем содержится двунитевая молекула ДНК, а также небольшое количество  РНК и белков. Молекула ДНК представляет собой замкнутую кольцевую структуру, в которой закодирована почти вся наследственная информация клетки, т.е. геном  клетки. ДНК часто обозначается как хромосома

Плазмиды - это ДНК, которые имеют кольцевую природу. Плазмиды в клетке могут находиться в одном из двух альтернативных состояний: в свободном или

интегрированном с хромосомой. В плазмидах закодирована дополнительная генетическая информация, которая не является жизненно необходимой для клетки, но наличие этой информации сообщает ей определенные селективные преимущества. В состав плазмид входят:

-структурные гены;

-гены, отвечающие за собственную репликацию плазмиды.

Некоторые плазмиды имеют гены, обеспечивающие трансмиссивность плазмиды - tra-гены.

По кодируемому признаку различают:

- R плазмиды- кодируют лекарственную устойчивость бактерий;

- F (sex) плазмиды - определяют способность клетки быть донором генетической

информации;

- Col плазмида - кодирует синтез бактериоцинов;

- плазмиды, отвечающие за синтез факторов вирулентности (Ent-, Hly-) и другие плазмиды.

45.  Антигены. Понятие, функции, строение молекулы антигена. Классификация антигенов бактерий.

Антигенами называют вещества, или тела, несущие на себе отпечаток чужеродной генетической информации. Это те самые вещества, то “чужое”, против которого “работает” иммунная система. Любые клетки (ткани, органы) не собственного организма (не свои) являются для его иммунной системы комплексом антигенов. Даже некоторые собственные ткани (хрусталик глаза) являются антигенами. Это так называемые “забарьерные ткани”. В норме они не контактируют с внутренней средой организма. Химическая природа антигенов различна. Это могут быть белки, полипептиды, нуклеопротеиды, липопротеиды, гликопротеиды,

полисахариды, липиды высокой плотности и даже нуклеиновые кислоты. Антигены делят на сильные (вызывают выраженный иммунный ответ) и

слабые , при введении которых интенсивность иммунного ответа невелика. Сильные антигены имеют белковую природу. Антигены обладают двумя свойствами. Во-первых, они способны индуцировать развитие иммунного ответа. Это свойство называют антигенностью, или антигенным действием. Во-вторых, они способны взаимодействовать с продуктами иммунного ответа, индуцированного аналогичным антигеном. Это свойство называют

специфичностью, или антигенной функцией. Некоторые (обычно небелковые) антигены не способны индуцировать

развитие иммунного ответа, т.е. не обладают антигенностью, но могут вступать во взаимодействие с продуктами иммунного ответа. Их называют неполоценными антигенами, или гаптенами. Многие простые вещества и лекарственные средства являются гаптенами. При попадании в организм они  конъюгируют с белками хозяина или другими носителями и приобретают свойства полноценных антигенов. Для того, чтобы вещество проявляло свойства антигена, оно должно обладать рядом признаков. Это макромолекулярность (молекулярная масса

более 10 тысяч дальтон), сложность строения, жесткость структуры, способность переходить в растворенное или коллоидное стостояние и, главное, чужеродность.

Молекула любого антигена состоит из двух функционально различных частей. Первая - детерминантная группа, на долю которой приходится 2-3% поверхности молекулы антигена. Она определяет чужеродность антигена, делает его именно этим антигеном, отличает его от других. Остальная часть молекулы антигена называется проводниковой. При ее отделении от детерминантной группы она не проявляет антигенного действия, но сохраняет способность реагировать с гомологичными антителами, т.е. превращается в гаптен. С проводниковой частью связаны все остальные признаки антигенности (макромолекулярность, сложность строения, жесткость структуры, растворимость, способность переходить в коллоидное состояние. Любой микроорганизм (бактерии, грибы, вирусы) представляет собой комплекс антигенов. По специфичности они делятся на:

перекрестнореагирующие (гетероантигены). Это антигены общие с антигенами тканей и органов человека. Они имеются у многих микроорганизмов и рассматриваются как важный фактор вирулентности и пусковой механизм развития аутоиммунных процессов. группоспецифические - общие у микроорганизмов одного рода или семейства; видоспецифические - общие у разных штаммов одного вида; вариантспецифические (типоспецифические) - встречающиеся у отдельных штаммов внутри вида. По наличию тех или иных вариантспецифических антигенов микроорганизмы внутри вида делят на серовары - варианты по антигенному строению.

По локализации в клетке антигены бактерий делятся на целлюлярные (связанные с клеткой) и экстрацеллюлярные (не связанные с клеткой). Среди

целлюлярных антигенов основными являются соматический - О-антиген (глюкцидолипоидо-полипептидный комплекс), жгутиковый - Н-антиген (белок), поверхностные - капсульные - К-антиген, fi-антиген. По

чувствительности к температуре К-антигены делят на A-, B-, L- M- антигены Экстрацеллюлярные антигены - это продукты, секретируемые

бактериями во внешнюю среду, в том числе экзотоксины, ферменты агрессии

и защиты и другие факторы вирулентности.  

75. Анаэробная клостридиальная раневая инфекция. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика  и терапия.

Эти бактерии относятся к семейству Bacillaceae.

Клостридии - это палочки средней величины или крупные, с

закругленными, прямыми или заостренными концами, полиморфны. В мазкахрасполагаются попарно или короткими цепочками. Большинство видов  подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков. Образуют овальные или сферические эндоспоры, диаметр которых превышает ширину клеток. Отдельные виды (C.perfringens) образуют капсулу. Грамположительны. Облигатные анаэробы. Обладают сахаролитической и протеолитической активностью. Обитают в кишечном тракте млекопитающих, птиц и человека, откуда попадают в окружающую природную среду. Патогенные виды образуют сильные экзотоксины. Род Clostridium включает до 100 видов, из которых патогенными для человека являются возбудители газовой гангрены, столбняка и ботулизма.

12.1.1. Возбудители газовой гангрены.

Возбудителями газовой гангрены являются C.perfringens, C.novyi, C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii. Чаще других (90%) заболевание вызывает C.perfringens. C.perfringens - это крупные палочки. Споры располагаются центрально. В

организме образуют капсулу, неподвижны. Грамположительные. Облигатные

анаэробы. На жидких средах растут быстро, вызывая помутнение, в столбике агара образуются дисковидные колонии. На кровяном агаре - колонии средней величины с зоной гемолиза. Обладают выраженной сахаролитической активностью. По антигенной специфичности экзотоксина выделяют 6 серологических вариантов C.perfringens: A, B, C, D, E, F. Главным фактором патогенности C.perfringens является экзотоксин. Они обладают также высокой инвазивностью и продуцируют гиалуронидазу и другие ферменты агрессии. 

C.perfringens - нормальный обитатель кишечника человека и животных,

откуда попадает в почву, где в виде спор сохраняется годами.

C.perfringens и другие клостридии - некропаразиты. Наиболее опасны тяжелые повреждения с обширной раневой поверхностью, нарушением

кровообращения, разможжением мышц. Попадая в такие раны (обычно с частичками почвы), в глубине поврежденных тканей (анаэробные условия) споры прорастают. Вегетативные формы размножаются и вырабатывают экзотоксин. Обладая высокой инвазивностью, они проникают в здоровую ткань, повреждают ее, образуя новые очаги некроза как результат действия ферментов и токсинов. Газовая гангрена имеет достаточно четкие клинические проявления. Заболевание протекает без ярко выраженного воспаления, характерным является прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование в тканях и общая интоксикация за счет действия как токсина возбудителя, так и продуктов

распада тканей. Заболевание сопровождается формированием антитоксического

иммунитета. Материалом для исследования является раневое отделяемое. При его бактериоскопии можно обнаружить крупные грамположительные стрептобациллы, окруженные капсулой. Но основным методом микробиологической диагностики является бактериологическое исследование. Этиотропная терапия проводится антитоксическими сыворотками (вначале поливалентной, а после идентификации возбудителя -

видоспецифической). Серотерапия должна сочетаться с эффективной антибиотикотерапией.

Для специфической профилактики используют анатоксины.

12.1.2. Возбудитель столбняка.

C.tetani - это крупные палочки. Образуют споры, расположенные терминально (что делает их похожими на барабанную палочку), перитрихи. Капсул не образуют. Грамположительные. C.tetani - облигатные анаэробы.

На плотных питательных средах образуют шероховатые, гладкие, прозрачные, сероватожелтые колонии средней величины, которые распространяются по среде в виде сети тонких нитей. При посеве в столбик полужидкого агара формируют колонии в виде чечевичек или пушинок с плотным коричневым центром.C.tetani не расщепляют углеводов, обладают слабыми протеолитическими

свойствами.  Все C.tetani имеют общий О-антиген, а по специфическим жгутиковым антигенам подразделяются на 10 сероваров. Главным фактором патогенности является

столбнячный экзотоксин. Он  состоит из двух фракций: тетаноспазмина и тетанолизина. Тетаноспазмин проникает в ЦНС, распространяясь по периневральным пространствам, кровеносным и лимфатическим сосудам. Он фиксируется ганглиозидами клеток спинного мозга и ствола головного мозга. Токсин блокирует освобождение ингибиторного медиатора в синапсах двигательных нервов, что приводит к развитию резко выраженной гиперфлексии и резких спазмов скелетных мышц в ответ на любое раздражение. Нарушается также синаптическая передача в мионевральных соединениях, возможно, вследствие накопления ацетилхолина. Тетанолизин (тетаногемолизин) обладает гемолитическим, кардиотоксическим

и летальным действием

Заражение происходит при проникновении возбудителя в

организм через дефекты кожи и слизистых оболочек при ранениях, ожогах, отморожениях, через операционные раны. При инфицировании пуповины возможно развитие столбняка у новорожденных. Больной столбняком не заразен для окружающих. C.tetani не являются инвазивными микроорганизмами. Возбудитель остается на месте внедрения в области поврежденных тканей, в которые проникли споры. Столбняк тяжелое заболевание, ведущим проявлением которого является

судорожный синдром, включающий болезненные сокращения и длительноенапряжение мышц.

Микробиологическая диагностика основана на обнаружении в крови больного столбнячного токсина. С этой целью используют биопробу на мышах и реакцию токсиннейтрализации. Обязательным средством этиотропной терапии столбняка является применение противостолбнячной антитоксической сыворотки или

противостолбнячного человеческого иммуноглобулина.

Для создания искусственного активного иммунитета в плановом порядке проводится вакцинация анатоксином, который входит в состав АДС, АКДС или секстанатоксина.

При обширных ранах проводят экстренную профилактику

противостолбнячным человеческим иммуноглобулином и столбнячным анатоксином.

 

 

 

 

БИЛЕТ 16

16. Мобильные генетические элементы бактерий: IS-элементы, транспозоны, интегроны. 

В состав бактериального генома входят подвижные генетические элементы:

IS-элементы (insertion sequences), транспозоны и интегроны. Они обнаружены как в составе бактериальной хромосомы, так и в составе плазмид. Их репликация –составная часть репликации хромосомы и плазмиды.

IS-элементы - короткие (2000) нуклеотидные последовательности. Отличительной особенностью IS-элементов является наличие на концах инвертированных повторов,

которые узнает транспозаза. Они не несут структурных генов; одинаковы у бактерий разных видов, родов, и даже считается, что они одинаковы у прокариот и у эукариот. ISэлементы могут перемещаться как по хромосоме, так и между хромосомами. Они содержат 2 гена:1-й кодирует синтез транспозазы; этот фермент обеспечивает процесс исключения IS элемента из хромосомы и его интеграцию в новой локус хромосомы . 2-й ген кодирует синтез репрессора, который регулирует весь процесс перемещения. Транспозоны – это сегменты ДНК, обладающие теми же свойствами, что и IS- элемент, но имеющие структурные гены. Интегроны – подвижные генетические элементы; они содержат ген, кодирующий устойчивость к антибиотикам. Интегроны являются системой захвата малых элементов ДНК, называемых генными кассетами посредством сайтспецифической рекомбинации и их экспрессии. 

46. Иммуноглобулины. Понятие, функции, строение молекулы Ig G. Классификация антител.

Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобиологическим свойствам разделяются на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Иммуноглобулин класса G. Изотип G составляет основную массу Ig сыворотки крови. На его долю приходится 70—80 % всех сывороточных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости. Среднее содержание IgG в сыворотке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Период полураспада IgG — 21 день. IgG — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (может одновременно связать 2 молекулы антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы Gl, G2, G3 и G4. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном иммунном ответе. Обладает высокой аффинностью. IgGl и IgG3 связывают комплемент, причем G3 активнее, чем Gl. IgG4, подобно IgE, обладает цитофильностью (тропностью, или сродством, к тучным клеткам и базофилам) и участвует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических реакциях IgG может проявлять себя как неполное антитело. Легко проходит через плацентарный барьер и обеспечивает гуморальный иммунитет новорожденного в первые 3—4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко путем диффузии. IgG обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществляет запуск комплемент-опосредованного цитолиза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности. 

76. Дифтерия. Микробиологическая диагностика. Биология возбудителя, факторы вирулентности. Патогенез, клиника. Специфическая профилактика и терапия. 

семейству Corynebacteriaceae, рода CorynebacteriumC.diphtheriae - палочки средней величины с булавовидными утолщениями на концах. В мазках нередко имеют характерное расположение под углом друг к другу. В цитоплазме по полюсам клетки локализуются метахроматические гранулы, или зерна волютина, которые выявляются при окраске мазков по методу Нейссера. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Требовательны к питательным средам.

Хорошо растут на свернутой сыворотке (среда Ру), образуя характерные изолированные не сливающиеся друг с другом колонии (“шагреневая кожа”). Для выделения коринебактерий используют элективные питательные среды, в частности среду Клауберга, содержащую кровь и теллурит калия. Ее применение основано на резистентности коринебактерий к высоким концентрациям теллурита калия (или натрия), ингибирующим рост сопутствующей микрофлоры. В процессе роста на теллуритовых средах C.diphtheriae восстанавливают это соединение в металлический теллур, аккумулирующийся внутри бактерий, который и обуславливает темный цвет колоний. C.diphtheriae на среде Клауберга образуют колонии трех типов: крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающей цветок маргаритки (биоварgravis); мелкие, черные, выпуклые, с ровными краями (биоварmitis); колонии похожие на колонии обоих типов (биоварintermedius). В жидких средах тип gravis дает зернистый осадок и пленку, mitis - равномерное помутнение бульона. Биохимическая активность C.diphtheriae достаточно высока. Ключевыми признаками, которые используются для дифференциации их от других представителей рода являются: ферментация глюкозы, цистеина (проба Пизу), неспособность разлагать сахарозу и мочевину. К факторам вирулентности C.diphtheriae относятся фимбрии, обеспечивающие их адгезию; ферменты агрессии и защиты (гиалуронидаза, нейраминидаза, протеаза), отвечающие за инвазивность возбудителя. Однако основным фактором вирулентности дифтерийных бактерий является образование экзотоксина, обладающего гистотоксическим, гемолитическим и дермонекротическим действием.  Экзотоксин C.diphtheriae поражает мышцу сердца, сосудистую систему, кору надпочечников, периферическую нервную систему. Дифтерия – антропонозная инфекция. Основные пути передачи - воздушно-капельный и контактнобытовой. Клинически дифтерия – это системное бактериально-токсическое заболевание. Возбудитель остается на месте входных ворот, а все проявления дифтерии связаны с действием токсина. Дифтерия характеризуется локальным фибринозным воспалением с образованием характерной плотной, спаянной с подлежащей тканью пленки, развитием отека и некроза ткани в месте внедрения возбудителя. Наблюдаются общая интоксикация с поражением сердечно-сосудистой системы, почек и надпочечников, дыхательной мускулатуры, нервной системы. Чаще наблюдается дифтерия зева, гортани (дифтерийный круп), носа, реже - половых органов, кожи, ран.Основным методом микробиологической диагностики дифтерии является бактериологическое исследование, для которого материал берется из очага поражения. Возможно обнаружение экзотоксина в крови больного с помощью методов иммуноиндикации. Для лечения дифтерии обязательным является применение противодифтерийной антитоксической сыворотки. Антибиотики назначаются по показаниям. Специфическая профилактика дифтерии проводится дифтерийным анатоксином. Он может использоваться как в виде отдельного препарата, так и в комбинации со столбнячным анатоксином (АДС-анатоксин), или в форме АКДС-вакцины (ассоциированная коклюшно-дифтерийно- столбнячная вакцина).  

 

 

 

 

БИЛЕТ 17

17. Механизмы изменчивости бактерий. Рекомбинации у бактерий, их особенности. 

Бактериям, как и всем живым существам, свойственна изменчивость.

Изменчивость у эукариот происходит по вертикали, у бактерий – и по вертикали, и по горизонтали.

Различают два вида изменчивости:

- фенотипическая

-генотипическая.

Фенотипическая изменчивость проявляется в виде модификаций – это изменение свойств клетки под влиянием внешних воздействий.

Модификации могут быть длительными и кратковременными.

Модификационные изменения касаются подавляющего большинства клеток популяции.

Генотипическая - это мутации или рекомбинации.

Мутации могут быть спонтанными и индуцированными.

Рекомбинации - это взаимодействие между двумя геномами, обладающими различными генотипами, которое приводит к образованию генома, сочетающего гены донора и реципиента. В процессе рекомбинации бактерий условно делят на

клетки-доноры, которые передают генетический материал, и клетки-реципиенты, которые его принимают. Рекомбинация у бактерий рассматриваются как аналоги

полового размножения.

Особенности рекомбинаций у бактерий:

- отсутствует мейоз. Образуется не зигота, а меразигота.

- всегда направлена от донора к реципиенту.

- количество генетического материала у рекомбинанта всегда больше одного.

Рекомбинант содержит всю генетическую информацию реципиента и часть

генетической информации донора.

У эукариот механизм рекомбинации один – мейоз; у бактерий различают

три вида рекомбинаций:

1) трансформация- это обмен генетической информации с помощью чистой

ДНК.

2) трансдукция – этот способ переноса генетической информации с помощью

фагов.

3) конъюгация – это способ передачи генетической информации, когда между

двумя бактериями образуются цитоплазмические мостики. При конъюгации

в клетку-реципиент может перейти почти весь геном.

47. Иммунный ответ. Формы иммунного ответа. Фазы иммунного ответа. 

Иммунный ответ - это совокупность процессов, происходящих в иммунной системе в ответ на введение антигена. Клетки, участвующие в иммунном ответе (Т- и В- лимфоциты и макрофаги), называются иммунокомпетентными.

Иммунный ответ может быть: первичным (при первой встрече с антигеном) и вторичным (при повторной). Выраженность первичного иммунного ответа достигает максимума к 7-8 дню, сохраняется в течение 2 недель, а затем снижается. Вторичный иммунный ответ развивается быстрее и достигает большей (в 3-4 раза) интенсивности. По типу взаимодействия клеток и образовавшихся клеток-эффекторов, т.е. по конечному итогу, принято различать три типа иммунного ответа: гуморальный иммунный ответ, клеточный иммунный ответ, и иммунологическую толерантность. При гуморальном иммунном ответе эффекторными являются потомки В-лимфоцитов - плазматические клетки, точнее продукты их жизнедеятельности - антитела. 

 При клеточном иммунном ответе эффекторными клетками являются потомки Th1 - Ткиллеры. Они убивают клетки-мишени, несущие соответствующие антигены. Иммунологическая толерантность - это специфическая иммунологическая инертность, терпимость к антигену. Он распознается, но не формируются эффекторные механизмы, способные его элиминировать. Иммунный ответ любого типа проходит в 2 фазы : первая - индуктивная - распознавание антигенов и взаимодействие иммунокомпетентных клеток, вторая - продуктивная - пролиферация клеток- эффекторов или продукция антител.   

77. Туберкулѐз и микобактериозы. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика. 

Возбудитель туберкулеза относится к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium. Помимо возбудителей туберкулеза этот род включает еще 48 видов, которые являются условно-патогенными (нетуберкулезные) микобактериями. Они могут вызывать у человека микобактериозы  - патологические процессы во внутренних органах, лимфоузлах. Наиболее часто микобактериозы вызывают M.kansasii, M.xenopi, M.ulserans, M.microti. Возбудителем туберкулеза являются M.tuberculosis и M.bovis.  Микобактерии туберкулеза - это палочки, длинные, тонкие, могут быть слегка изогнуты. В цитоплазме обнаруживаются зерна Муха. Спор, капсул не образуют. Неподвижны. Характерной особенностью микобактерий является высокое содержание в клеточной стенки липидов, что придает этим бактериям устойчивость к кислотам, щелочам и спирту. По этой же причине они плохо воспринимают анилиновые красители. Грамположительны, но по Граму окрашиваются с трудом. Для их окраски пользуются методом Циля-Нильсена. Аэробы. Требовательны к питательным средам. Оптимальной средой для их культивирования является яичная среда с добавлением глицерина (среда Левенштейна-Иенсена). Могут использоваться также синтетическим среды. Микобактерии туберкулеза растут медленно; через 28-35 дней на плотных средах

формируются морщинистые, сухие, с неровными краями, изолированные, не сливающиеся друг с другом колонии. На жидких средах растут в виде морщинистой пленки.  Для дифференциации видов микобактерий используют различия в их биохимических свойствах (ниациновый тест, редукция нитратов, расщепление мочевины, никотинамида).  Антигенная структура микобактерий довольно сложна. Их антигенами являются белки и фосфотиды клеточной стенки, корд-фактор и эндотоксин. Факторами вирулентности возбудителей туберкулеза являются токсические компоненты клеточной стенки - высшие жирные кислоты (миколовая, туберкулостеариновая, фтионовая), эндотоксин - туберкулин и корд-фактор (димиколат трегалозы).  Основной источник заражения - больной человек; эпидемиологическую опасность представляют только больные с открытой формой туберкулеза, которые выделяют возбудителя в окружающую среду. Основной путь заражения - воздушно-капельный, но возможен и контактно-бытовой. Источником заражения могут быть и больные туберкулезом домашние животные. Туберкулез - хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся образованием в различных органах, чаще в легких, специфических воспалительных изменений. По локализации различают ряд клинических форм 

 142 туберкулеза: туберкулез легких, туберкулез почек, костно-суставный туберкулез, туберкулез половых органов, туберкулезный менингит. При первичном инфицировании в раннем детском возрасте с обычной локализацией в легких формируется первичный туберкулезный комплекс, который включает воспалительный очаг в паренхиме легкого, лимфангоит и регионарный лимфаденит. Первичный комплекс в легких со временем может инкапсулироваться и кальцинироваться с образованием петрификата. Однако этот процесс не завершается освобождением организма от микобактерий. Они сохраняются в организме на протяжении многих лет, поддерживая состояние инфицированности. Вторичный туберкулез развивается в более позднем возрасте при повторном инфицировании или активации эндогенной инфекции. Иммунитет при туберкулезе имеет свои особенности. Вопервых, он нестерильный, т.е. поддерживается бактериями, персистирующими в организме и обеспечивающими состояние инфицированности. Во-вторых, он неустойчивый, т.е. те самые бактерии, которые обеспечивают инфицированность, могут явиться причиной эндогенной инфекции. В-третьих, антитела не играют существенной роли в противотуберкулезном иммунитете. Антитела являются лишь “свидетелями” иммунитета и не оказывают ингибирующего действия на возбудителя. В-четвертых, основной механизм противотуберкулезного иммунитета клеточный, реализуемый через гиперчувствительность замедленного типа. Определенное значение имеют и механизмы неспецифической защиты. Для микробиологической диагностики туберкулеза используют разные методы. Можно применять микроскопическое исследование (микроскопия мазков, окрашенных по ЦилюНильсену или люминисцентная микроскопия мазков, обработанных флюорохромами). Основным методом диагностики является бактериологический; материал для исследования определяется клинической формой болезни. При туберкулезе легких - это мокрота. Возможно применение методов иммуноиндикации, серодиагностики, а также молекулярногенетических. При массовых обследованиях населения используется аллергический метод диагностики (постановка аллергической диагностической пробы Манту). Эта же проба применяется для оценки напряженности противотуберкулезного иммунитета. Для лечения туберкулеза используют противотуберкулезные средства: препараты первого ряда - изониазид, тубазид, фтивазид, стрептомицин, ПАСК, ГИНК;

препараты второго ряда - этионамид, циклосерин, канамицин, рифампицин, виомицин.  Специфическая профилактика осуществляется живой вакциной БЦЖ. Первичная вакцинация проводится всем детям на 3-5 день после рождения. Ревакцинация - в определенных возрастных группах лицам с отрицательной пробой Манту 

 

 

 

 

БИЛЕТ 18

18. Молекулярно-генетические методы диагностики инфекционных заболеваний: ПЦР, секвенирование генома, ДНК-чипы. Геносистематика. 

Генетические методы применяются в практических целях как для обнаружения микроба в исследуемом материале без выделения чистой культуры, так и для определения таксономического положения микроба и проведения внутривидовой идентификации.

Секвенирование генома – определение последовательности пар нуклеотидов ДНК.

Рестрикционный анализ – этот метод основан на применении ферментови рестриктаз – это эндонуклеазы, которые расщепляют молекулу ДНК только  определённых местах. Если выделенную из конкретного материала ДНК обработать определенной рестриктазой, то это приведет к образованию строго определенного количества фрагментов ДНК фиксированных размеров. Риботипирование – позволяет определить вид бактерий. Последовательность

нуклеотидных оснований в оперонах, кодирующих рРНК, характеризуется наличием как консервативных участков, которые имеют сходное строение у различных бактерий, так и вариабельных последовательностей, которые родо- и

видоспецифичны и являются маркерами при генетической идентификации. 

Молекулярная гибридизация – применяется в геносистематике. Этот метод позволяет выявить степень сходства различных ДНК. ПЦР используется для обнаружения генов или соответствующих нуклеотидных

последовательностей, кодирующих либо видовую принадлежность, либо иной признак. Метод ПЦР основан на принципе комплементарности и позволяет увеличивать

(амплифицировать) количество исследуемого образца ДНК. Этот метод обладает чрезвычайно высокой чувствительностью и теоретически позволяет обнаружить в

исследуемом материале даже единичные молекулы ДНК.

Разновидности ПЦР:

- ПЦР в режиме реального времени; даёт возможность определить количество фрагментов ДНК находящегося в материале, т.е. проводить количественный анализ; - мультиплексная ПЦР – преимущество заключается в том, что в реакционную смесь можно вводить 2 – 4 и более пары праймеров. Они характерны для различных возбудителей. - обратнотранскрипционная ПЦР – позволяет осуществить копирование РНК

возбудителей.

ДНК – чипы являются новейшими технологиями гибридизационных методов молекулярногенетического анализа. Они представляют собой носители известных олигонуклеотидов (менее 20 оснований каждый), комлементарных участкам исследуемого генома (или геномов) и занимающих определенный сайт (ячейку). При наличии в исследуемой пробе фрагментов искомой ДНК они гибридизуются (соединяются по принципу комплементарности) с нуклеотидными последовательностями, сидящими на чипе.

48. Особенности противовирусного, противогрибкового и противопротозойного иммунного ответа. 

Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, ин­фицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействую­щими с Fcфрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Проти­вовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифическо­го иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организ­ма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают противовирусную резистентность, индуцируя в клет­ках синтез ферментов, подавляющих образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрес­сию антигенов главного комплекса гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятст­вуют их адгезии на эпителиоцитах.

Противогрибковый иммунитет. Антитела (IgM, IgG) при ми­козах выявляются в низких титрах. Основой противогрибкового иммунитета является клеточный иммунитет. В тканях происхо­дит фагоцитоз, развивается эпителиоидная гранулематозная ре­акция, иногда тромбоз кровеносных сосудов. Микозы, особенно оппортунистические, часто развиваются после длительной антибактериальной терапии и при иммунодефицитах. Они сопро­вождаются развитием гиперчувствительности замедленного ти­па. Возможно развитие аллергических заболеваний после респираторной сенсибилизации фрагментами условно-патогенных грибов родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Fusarium и др.

Противопротозойный иммунитет. Антитела (IgM, IgG) против простейших действуют на внеклеточные формы паразитов. Часто иммунитет является стадиоспецифическим, т. е. против различных форм, стадий развития паразита появляются соответствующие антитела. Паразит, имеющий различные стадии развития в организме (например, плазмодии малярии), как бы «ускользает», отклоняется от ранее образовавшихся антител. Фагоцитоз может быть незавершенным, например, при лейшманиозах. Выявление гиперчувствительности замедленного типа используют при диагностике токсоплазмоза, лейшманиоза и некоторых других протозойных инфекций.

78. Микоплазмозы. Характеристика возбудителей респираторных и урогенитальных микоплазмозов. Микробиологическая диагностика. 

Микоплазмы выделены в класс Mollicutes, порядок Mycoplasmatalеs, который включает ряд семейств, в том числе семейство Mycoplasmatataceae; последнее делится на 6 родов, из них в патологии человека играют роль представители родов Mycoplasma и Ureaplasma. Микоплазмы - это бактерии. Отличительной биологической особенностью представителей этого семейства является отсутствие у них ригидной клеточной стенки, вместо которой они покрыты трехслойной “объединяющей” мембраной, т.е. они имеют только одну липопротеиновую мембрану, выполняющую функции собственно цитоплазматической мембраны и клеточной стенки. Микоплазмы резистентны к антибиотикам - ингибиторам синтеза клеточной стенки. Культура микоплазм состоит из “зрелых” (400-1400 нм) клеток и “элементарных” телец (100-250 нм). Последние могут находиться как внутри, так и вне “зрелых” клеток. Микоплазмы отличаются выраженным полиморфизмом, морфология клеток не зависит от вида микоплазм, а определяется условиями культивирования. При выращивании на жидких питательных средах образуется большое количество различных форм,  при выращивании на плотных - формируются сгустки протоплазмы неопределенной формы в виде дисков или шариков. Неподвижны. Спор и капсул не имеют. Окрашиваются грамотрицательно. Аэробы и анаэробы. Микоплазмы требовательны к питательным средам; для их культивирования используют сложные питательные среды (сердечно-мозговой агар или бульон с добавлением 30% сыворотки крупного рогатого скота). Температура культивирования 370С в течении 48-96 часов. На плотной питательной среде микоплазмы образуют характерные колонии, напоминающие “яичницу-глазунью”: колонии круглые с зернистой поверхностью и втянутым темным центром; плотно спаяны со средой. Колонии различных видов микоплазм не отличаются. На жидких питательных средах растут, образуя легкое помутнение. Видовая дифференциация микоплазм проводится на основании изучения их антигенной структуры. Род Mycoplasma насчитывает более 100 видов.  Человек является естественным носителем не менее 13 видов микоплазм, которые  вегетируют на слизистых оболочках глаза, дыхательных, пищеварительных и мочеполовых путей. В патологии человека наибольшую роль играют M.pneumoniae, M.hominis и представитель рода Ureaplasma - U.urealyticum. Представители рода Ureaplasma дают мелкие колонии на твердых  сложных средах, важной особенностью для них является потребность в мочевине.   157 Патогенные для человека микоплазмы вызывают у него заболевания (микоплазмозы) дыхательных, мочеполовых путей и суставов с  разнообразными клиническими проявлениями.    Респираторный микоплазмоз. Возбудителем заболевания является M.pneumoniae - единственный вид этого рода, патогенность которого для человека доказана. Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma. В антигенном отношении вид однороден, типоспецифических антигенов не обнаружено. M.pneumoniae обладает тропизмом к эпителиальным клеткам дыхательных путей. Вирулентность их связана с наличием гемолитической активности и способностью оказывать цитотоксическое действие. Источником инфекции является больной человек, а также носители. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Возбудитель адсорбируется  на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, размножается и активно распространяется по

слизистой оболочке трахеи и бронхов, достигая альвеолоцитов. В результате повреждения клеток развивается пневмония. Постинфекционный иммунитет сохраняется в течение 5-10 лет. Он обусловлен как секреторными, так и гуморальными антителами.   Урогенитальный микоплазмоз. Возбудителями заболевания являются M.hominis и U.urealyticum. Этими видами микоплазм инфицировано не менее 50% здоровых мужчин и женщин в возрасте 30-50 лет. Основные биологические и морфологические свойства типичны для семейства Mycoplasmataceae. M.hominis в антигенном отношении гетерогенны: различают 8 сероваров. U.urealyticum также неоднородны в антигенном отношении: выделяют 8 сероваров человеческого и 8 - животного происхождения. M.hominis и U.urealyticum в организме человека чаще всего паразитируют на слизистых оболочках нижних отделов мочеполовых путей. Источник инфекции - инфицированный человек, в том числе, и очень часто, бессимптомный носитель микоплазм. Заражение происходит путем полового контакта. Клиническая картина микоплазменной инфекции не имеет патогномоничных только для нее симптомов. Установлена этиологическая роль микоплазм и уреаплазм в возникновении сальпингитов, оофоритов, кольпитов, эндоцервицитов, уретритов, простатитов. Эти микоплазмы выделены при сепсисе, абсцессах мозга; доказана их роль в развитии гломерулонефритов, циститов.    Для микробиологической диагностики применяют бактериологическое исследование, методы серодиагностики, иммуноиндикации, молекулярногенетические. Этиотропная терапия проводится антибиотиками (тетрациклины, макролиды) и фторхинолонами. Для специфической профилактики пневмонии, вызванной микоплазмами,  разработана вакцина.  

 

 

 

 

БИЛЕТ 19

19. Понятие о химиотерапии, основные классы химиотерапевтических веществ. Антибиотики, их классификация.

Химиотерапия – это лечение лекарственными препаратами,

оказывающими губительное действие на патогенные микроорганизмы, -составная часть фармакотерапии, -этиотропная терапия. Все химиотерапевтические препараты подразделяются на:

- производные мышьяка, сурьмы и висмута,

- сульфаниламиды,

- диаминопиримидины,

- нитрофурановые препараты,

- хинолоны и фторхинолоны,

- азолы,

- антибиотики.

Антибиотики – это химические вещества биологической природы,обладающие способностью подавлять рост или вызывать гибель микроорганизмов.

Классификация:

I. По происхождению. Продуцентами антибиотиков могут быть:

- плесневые грибы (пенициллин)

-актиномицеты (из них получено большинство антибиотиков)

-типичные бактерии (грамицидин)

-продуценты антибиотиков животного происхождения (экмолин)

-антибиотики растительного происхождения (фитонциды)

II. По химическому строению:

2

III. По направленности действия:

- противопротозойные;

- противогрибковые;

- антибактериальные;

- противовирусные.

IV. По механизму действия.

Все антибиотики действуют на те или иные стороны метаболизма микроорганизмов; они никогда на нарушают уже готовые структуры бактерий.

1. Антибиотики – ингибиторы синтеза клеточной стенки, в частности ингибиторы синтеза пептидогликана муреина.

а) β – лактамные антибиотики

- пенициллины

- цефалоспорины

- монобактамы

- карбапенемы (имипенем, меропенем, эртапенем, дорипенем).

б) гликопептиды – действуют на другие этапы синтеза пептидогликана,

чем β – лактамы:

- ванкомицин

- липогликопептид - телаванцин.

2. Антибиотики, подавляющие синтез белка.

- аминогликозиды, макролиды, линкозамиды, тетрациклины,

хлорамфеникол, линезолид, тигециклин.

3. Антибиотики, нарушающие энергетические процессы на ЦПЭ.

- полимиксины, полиены.

4. Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот

V. По характеру действия:

Антибиотики оказывают либо бактериостатическое действие (способность

подавлять рост и размножение бактерий), либо бактерицидное действие

(способность вызвать гибель бактерий).

VI. По спектру действия:

-с узким спектром действия;

-с широким спектром действия.

49. Клеточный иммунный ответ. Особенности цитотоксического и воспалительного типов иммунного ответа. 

Клеточный иммунный ответ направлен против внутриклеточно паразитирующих микроорганизмов, основная защитная роль в нем принадлежит активированным макрофагам и цитотоксическим лимфоцитам (CD8+ CTL). Макрофаги, инфицированные микроорганизмами, получают от Thl в качестве сигналов активации цитокины: гаммаинтерферон и туморнекротизирующий фактор (ТНФ), которые действуют через свои рецепторы, вызывая усиленную продукцию макрофагами супероксидных и нитроксидных радикалов, убивающих внутриклеточные паразиты. Цитотоксические CD8+ CTL способны убивать зараженные вирусами клетки при непосредственном контакте с ними. В месте контакта из CTL в мембрану клетки-мишени проникают порообразующие белки — перфорины, формирующие в мембране микроканалы, через которые в клетку-мишень проникают ферменты — фрагментины, вызывающие разрушение ядра клетки и ее гибель 

79. Респираторные и урогенитальные хламидиозы. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. 

Хламидии относятся к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia. Хламидии - прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Это “энергетические паразиты” клеток. Для них характерен уникальный цикл развития, включающий две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования. Это элементарные и инициальные (ретикулярные) тельца. Хламидии - кокковидные бактерии (0,3-1,5 мкм), неподвижны, капсул не образуют. Грамотрицательны.  Цикл развития хламидий протекает в цитоплазматических включениях. Проникшие в клетку элементарные тельца (инфекционная форма) превращаются в ретикулярные тельца (вегетативная форма). Они размножаются путем бинарного деления и превращаются в элементарные тельца нового поколения. Такой цикл продолжается 40-72 часа и обычно завершается разрывом клетки и выходом элементарных телец хламидий в межклеточное пространство. Помимо такого репродуктивного цикла в неблагоприятных условиях реализуются и другие механизмы взаимодействия хламидий  с клеткой хозяина. Это деструкция хламидий в фагосомах, Lподобная трансформация и персистенция. Трансформированные и персистентные формы хламидий способны реверсировать в исходные (ретикулярные) формы с последующим преобразованием в элементарные тельца, т.е. в инфекционные частицы. Для культивирования хламидий используют культуру тканей или развивающиеся куриные эмбрионы. Хламидии имеют групповой, видоспецифические и вариантспецифические антигены. Род Chlamydia делится на 4 вида.

C.trachomatis сероваров А, В, ВА и С являются возбудителями трахомы, конъюнктивитов с включениями; C.trachomatis сероваров D, E, F, G, H, I, J, К - урогенитальных хламидиозов, а сероваров L1, L2, L3 - венерической лимфогранулемы. Источником хламидийной инфекции является человек. Путь заражения - половой. Кроме того, возможно инфицирование новорожденных при прохождении через родовые пути больной матери и трансплацентарное инфицирование плода. При трахоме - контактно-бытовой путь заражения. C.trachomatis сероваров D...K обладают тропизмом к столбчатому эпителию мочеполового тракта. Клинические проявления хламидийной инфекции весьма разнообразны. Это уретриты, эпидимиты, простатиты, цервициты, эндометриты. В 30-50% случаев заболевание протекает бессимптомно. Хламидийная инфекция обуславливает развитие бесплодия, патологии беременности и плода. При инфицировании плода хламидии могут вызывать внутриутробное поражение головного мозга, органов зрения и слуха, пневмонии, гастроэнтериты и т.д. C.trachomatis выделяют при болезни Рейтера. Это заболевание, характеризуется триадой признаков - поражение мочеполовых органов (уретрит или простатит), заболевание глаз (конъюнктивит) и суставов (артрит). Иммунитет после выздоровления не формируется.  

C.pneumoniae. C.pneumoniae обладает тропизмом к эпителию респираторных путей. Источником является больной, путь передачи - воздушно-капельный. Вызывают респираторный хламидиоз, проявляющийся в виде пневмонии, катара верхних дыхательных путей.   

БИЛЕТ 20

20. Генетические и биохимические механизмы антибиотикорезистентности. Основные принципы рациональной антибиотикотерапии. 

Методы ограничения антибиотикорезистентности

- за счет модификации молекулы антибиотиков – создание препаратов, устойчивых к действию β – лактамаз (оксациллин);

- защищенные β – лактамы – комбинированные препараты, содержащие β – лактамный антибиотик и ингибитор β – лактамаз (сульбактам, тазобактам, клавулановая кислота);

- рациональное использование антибиотиков;

- поиск антибиотиков, которые ингибировали бы продукты бактерий, определяющие их вирулентность или ингибирующих гены, кодирующие определенные факторы вирулентности.

Принципы рациональной антибиотикотерапии.

- выделение возбудителя заболевания.

- определение чувствительности возбудителя к антибиотикам

- знание фармакокинетики и фаркмакодинамики препарата. 

50. Гуморальный иммуный ответ. Этапы. Клетки, участвующие в его реализации. 

Гуморальный иммунный ответ защищает преимущественно против внекле-точно паразитирующих микроорганизмов, которые доступны действию специфических антител. Продуцентами антител (иммуноглобулинов) являются потомки активированных Влимфоцитов — плазматические клетки. В-лимфоцит получает сигнал активации при соединении его антиген-распознающего рецептора с антигеном. Для активной пролиферации и дифференцировки в плазматические клетки потомки В-лимфоцита получают дополнительные сигналы активации — продуцируемые Th2 цитокины: интерлейкины-4, -5, -6, -10, -13. Те же цитокины усиливают продукцию и секрецию специфических для данного антигена антител зрелыми плазматическими клетками.

80. Риккетсиозы. Характеристика возбудителей. Эпидемический сыпной тиф. Бартонеллы. 

Риккетсии - это бактерии, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Риккетсии выделены в отдельный порядок Rickettsiales. Клетки риккетсий полиморфные (палочковидные, кокковидные, нитевидные), грамотрицательные. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Риккетсии относятся к медленно растущим организмам. Время генерации не менее 8-9 часов. Размножаются, подобно бактериям, простым поперечным делением или дроблением нитевидных форм. По типу дыхания - аэробы. У риккетсий имеются различные ферменты и им присущи многие обменные процессы. Однако в процессе эволюции они утратили некоторые энзимные системы, необходимые для синтеза отдельных жизненно важных биополимеров, и поэтому

перешли к паразитическому образу жизни. Патогенные для человека риккетсии не способны размножаться на бесклеточных средах (исключение R.quintana). Для их культивирования применяют те же методы, что и для культивирования вирусов: заражение культуры тканей, культивирование в развивающихся куриных эмбрионах, организме экспериментальных животных или эктопаразитов. Риккетсии имеют два антигена - растворимый (группоспецифический) и корпускулярный (видоспецифический). Риккетсии образуют отдельный порядок Rickettsiales. Патогенными для человека являются представители одного из 3 семейств - Rickettsiaceae, которое делится на трибы: Rickettsieae, Erlichieae и Wolbachieae. Основную роль в патологии человека играют риккетсии трибы Rickettsieae, состоящей из 3 родов: Rickettsieae, Rochalimaea и Cоxiella, а также представители трибы Ehrlichieae. Деление риккетсий на рода основано на различии в антигенном строении и локализации риккетсий в пораженной клетке. Возбудители относящиеся к роду Rickettisia располагаются в цитоплазме, реже в ядре клеток хозяина, роду Coxiella - в фагосомах и фаголизосомах, а роду Rochalimaea - в межклеточных пространствах. Патогенные риккетсии образуют токсические вещества (природа которых окончательно не установлена). Они нестойки, легко разрушаются, обладают гемолитической активностью и вызывают  парез кровеносных сосудов. Заболевания, вызываемые риккесиями, носят общее название риккетсиозов. Два из них - эпидемический сыпной тиф (возбудитель R. prowazekii) и волынская лихорадка (возбудитель R. quintana) являются антропонозными инфекциями. Для большинства других риккетсий основным резервуаром являются грызуны и членистоногие. Риккетсиозы – трансмиссивные инфекции. Возбудитель передается человеку при укусе кровососущих членистоногих (вши, блохи, клещи). Лишь Ку-лихорадка 

 152 (возбудитель C.burneti) передается алиментарным или воздушно-капельным путем, а естественным хозяином ее возбудителя является домашний скот. Большинство риккетсиозов относится к природно-очаговым инфекциям. Об этом свидетельствуют и их названия - марсельская, волынская лихорадка, североазиатский риккетсиоз и др. Лишь сыпной тиф, один из наиболее тяжелых риккетсиозов, распространен повсеместно. Риккетсии поражают клетки ретикулоэндотелиальной системы и эндотелия сосудов. В основе патогенеза риккетсиозов лежит интоксикация и развитие характерных изменений в эндотелии артериол и капилляров в виде эндоваскулита. Как следствие возникают тромбозы, стазы и кровоизлияния в различных органах и тканях, в том числе ЦНС. Для клинике всех риккетсиозов характерными симптомами является выраженная интоксикация и геморрагии. Смерть наступает в результате развития острой сердечной недостаточности и поражения ЦНС. Постинфекционный иммунитет - длительный, стойкий. Основным методом микробиологической диагностики риккетсиозов является серологическое исследование (РА, РПГА, РСК с соответствующими риккетсиозными диагностикумами). Выделение риккетсий возможно только в специальных лабораториях строгого режима. Для этиотропной терапии используют антибиотики группы тетрациклина и хлорамфеникол (левомицетин). Менее эффективны антибиотики - макролиды. Специфическая профилактика разработана в отношении двух риккетсиозов: сыпного тифа и Ку-лихорадки. Она проводится по эпидпоказаниям живой или химической сыпнотифозной вакциной  и живой вакциной из риккетсий Бернета.

 

 

 

 

БИЛЕТ 21

21. Β-лактамные антибиотики. Классы, механизмы действия. Защищенные β-лактамы. 

1. Β-лактамные антибиотики. Классы, механизмы действия. Защищенные β-лактамы.

. Антибиотики – ингибиторы синтеза клеточной стенки, в частности

ингибиторы синтеза пептидогликана муреина.

а) β – лактамные антибиотики

- пенициллины

- цефалоспорины

- монобактамы

- карбапенемы (имипенем, меропенем, эртапенем, дорипенем)

Лекарственные формы, в которых соединены антибиотики и ингибиторы бета-лактамаз, получили название комбинированных, или защищенных бета-лактамов. В клиническую практику внедрены три ингибитора: клавулановая кислота, сульбактам и тазобактам. К недостаткам β-лактамных антибиотиков можно отнести: неустойчивость к кислотам, частые перекрестные аллергические реакции.

51. Механизмы супрессии иммунного ответа. Иммунологическая толерантность.

после уничтожения и выведения патогена из организма иммунный ответ естественным образом останавливается - развивается супрессия иммунного ответа, а иммунный ответ на собственные ткани организма предотвращает иммунологическая толерантность. Наконец, чрезвычайно важно торможение иммунной системы и при таких антропогенных вмешательствах, как трансплантация органов и тканей. Ключевые роли в торможении иммунной системы принадлежат двум механизмам: ингибирующим межклеточным взаимодействиям и апоптозу.

81. Заболевания, вызываемые патогенными спирохетами: сифилис, лептоспироз, болезнь Лайма. 

Спирохеты — порядок бактерий с длинными (3—500 мкм) и тонкими (0,1—1,5 мкм) спирально закрученными клетками. Грамотрицательны, хемоорганогетеротрофы. Подвижны, размножаются поперечным делением. Эндоспор не образуют. Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные и факультативно-анаэробные. Спирохеты встречаются в почве, воде, других организмах. Сифилис - одна из классических венерических болезней. Возбудитель - Treponema pallidum (бледная трепонема). Она имеет форму правильной спирали размером до 15 мкм, с 8-12 крутыми глубокими равномерными завитками, концы заострены. Из многих антигенов возбудителя наиболее изучены три: липополисахаридный кардиолипин, белковый и нуклеопротеиновый. Treponema pallidum очень требовательны к питательным средам и на обычных средах не растут. Для их культивирования используют сложные среды, содержащие почечную и мозговую ткань. Посевы культивируют в строго анаэробных условиях при температуре 350С. При нагревании до 600С возбудитель быстро погибает. Под действием пенициллина переходит в L-формы. Для сифилиса характерно

волнообразное течение. Выделяют первичный, вторичный и третичный периоды болезни. Первичный период начинается с появления на месте внедрения возбудителя (слизистая половых органов, анальное отверстие, полость рта) первичной сифиломы (твердого шанкра). Его продолжительность 45-50 дней. Он делится на: серонегативный (2-3 недели) и сменяющий его серопозитивный (в крови появляются антитела). Вторичный период развивается при отсутствии лечения, как результат генерализации инфекции. Он может продолжаться 3-4 года. Третичный период. Для него характерно образование грубых поражений кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов, костей. Методы микробиологической диагностики. Основными методами микробиологической диагностики сифилиса являются: • бактериоскопический; • серологический. Бактериоскопическое исследование. Оно является одним из основных методов диагностики при первичном сифилисе. Исследуют материал из первичной сифиломы, пунктат лимфатических узлов. Из него готовят мазки, окрашивают их по Романовскому- Гимза и микроскопируют. Используют и темнопольную микроскопию неокрашенных мазков. Серологическое исследование. Оно становится возможным с 3-4 недели заболевания и является основным методом диагностики сифилиса. Антитела выявляют в осадочных тестах (на основе реакции преципитации), РСК и реакций с мечеными антиглобулиновыми сыворотками. В серологической диагностике сифилиса используются две группы стандартных антигенных препаратов, нетрепонемные и трепонемные. Первые (кардиолипин бычьего сердца) имеют лишь сходство с антигенами возбудителя сифилиса, вторые являются либо стандартными штаммами Treponema pallidum, либо их ультразвуковым дезинтегратом. С кардиолипиновыми антигенами ставят осадочную микрореакцию преципитации (МР), р.Кана (флокуляционный тест) и РСК, с трепонемными - РСК и реакцию иммобилизации трепонем. Оценка результатов реакции качественная, по системе + + + +. В настоящее время в серодиагностике сифилиса широко используются иммунолюминисцентные и иммуноферментные методики, для реализации которых предложен ряд коммерческих тест систем. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 22

22. Антибиотики – ингибиторы синтеза белка, классы.

2. Антибиотики, подавляющие синтез белка.

- аминогликозиды, макролиды, линкозамиды, тетрациклины,

хлорамфеникол, линезолид, тигециклин. 

52. Цитокины. Их классификация, значение в развитии иммунного ответа. 

.Цитокины. Их классификация и значение в развитии иммунного ответа.

Цитокины — это небольшие регуляторные пептиды, участвующие в иммунорегуляции, хеморегуляции и биорегуляции в целом, которые секретируются неэндокринными клетками (в основном, иммунными) и оказывают местное воздействие на соседние клетки

мишени. Цитокины вместе с факторами роста относятся к гистогормонам (тканевым гормонам).

Цитокины вместе с продуцирующими их клетками  бразуют «микроэндокринную систему», которая обеспечивает взаимодействие клеток иммунной, кроветворной, нервной и эндокринной систем. Образно можно сказать, что с помощью цитокинов клетки иммунной системы общаются друг с другом и с остальными клетками организма, передавая от цитокин-продуцирующих клеток команды на изменение состояния клеток-мишеней. И с этой точки зрения цитокины можно назвать для иммунносй системы «цитотрансмиттерами», «цитомедиаторами» или «цитомодуляторами» по аналогии с нейротрансмиттерами, нейромедиаторами и нейромодуляторами нервной системы.

Виды цитокинов

1.Интерлейкины (ИЛ) и  фактор некроза опухолей (ФНО)

2.Интерфероны.

3.Малыецитокины.

4. Колониестимулирующие факторы  (КСФ).

82. Оппортунистические микозы. Кандидоз. 

. Кандидоз — одна из разновидностей грибковой инфекции, вызывается микроскопическими дрожжеподобными грибами рода Candida. Всех представителей данного рода относят к условно-патогенным. Лабораторная диагностика вагинальных кандидозов. Культуральное исследование должно включать не только выделение и видовую идентификацию возбудителя вагинального кандидоза, но и определение чувствительности выделеных штаммов к противогрибковым препаратам. Посев целесообразно производить по следующей схеме: — пользуясь постоянно стандартной методикой посева, вращая тампон, засеять материал на чашку с хромогенной средой «CANDICHROM II», при просмотре результатов посева необходимо подсчитать число КОЕ грибов различных видов (количественный анализ). Использование хромогенной селективной среды «CANDICHROM II» для первичного посева позволяет проводить прямую идентификацию основного возбудителя C. albicans и выделять другие виды дрожжевых грибов (рост бактерий ингибируется смесью антибиотиков). Другие виды грибов рода Candida, а также болезнетворные дрожжевые грибы других родов возможно достоверно идентифицировать до вида с помощью тест-системы «Elichrom FUNGI». Для определения чувствительности к распространенным противогрибковым препаратам(флуконазол, итраконазол, амфотерицин В, вориконазол, флуцитозин (5флюороцитозин)) целесообразно использовать тест-систему «FUNGIFAST AFG». С учетом вероятности развития вторичной устойчивости к азоловым препаратам у грибов рода Candida, важно проводить тестирование чувствительности у выделенных штаммов и перед повторным назначением лечения. 

БИЛЕТ 23

23. Микоплазмы. Строение, биологические особенности.

Микоплазмы выделены в класс Mollicutes, порядок Mycoplasmatalеs, который включает ряд семейств, в том числе семейство Mycoplasmatataceae; последнее делится на 6 родов, из них в патологии человека играют роль представители родов Mycoplasma и Ureaplasma. Микоплазмы - это бактерии. Отличительной биологической особенностью представителей этого семейства является отсутствие у них ригидной клеточной стенки, вместо которой они покрыты трехслойной “объединяющей” мембраной, т.е. они имеют только одну липопротеиновую мембрану, выполняющую функции собственно цитоплазматической мембраны и клеточной стенки. Микоплазмы резистентны к антибиотикам - ингибиторам синтеза клеточной стенки. Культура микоплазм состоит из “зрелых” (400-1400 нм) клеток и “элементарных” телец (100-250 нм). Последние могут находиться как внутри, так и вне “зрелых” клеток. Микоплазмы отличаются выраженным полиморфизмом, морфология клеток не зависит от вида микоплазм, а определяется условиями культивирования. При выращивании на жидких питательных средах образуется большое количество различных форм,  при выращивании на плотных - формируются сгустки протоплазмы неопределенной формы в виде дисков или шариков. Неподвижны. Спор и капсул не имеют. Окрашиваются грамотрицательно. Аэробы и анаэробы. Микоплазмы требовательны к питательным средам; для их культивирования используют сложные питательные среды (сердечномозговой агар или бульон с добавлением 30% сыворотки крупного рогатого скота). Температура культивирования 370С в течении 48-96 часов. На плотной питательной среде микоплазмы образуют характерные колонии, напоминающие “яичницу-глазунью”: колонии круглые с зернистой поверхностью и втянутым темным центром; плотно спаяны со средой. Колонии различных видов микоплазм не отличаются. На жидких питательных средах растут, образуя легкое помутнение. Видовая дифференциация микоплазм проводится на основании изучения их антигенной структуры. Род Mycoplasma насчитывает более 100 видов.  Человек является естественным носителем не менее 13 видов микоплазм, которые  вегетируют на слизистых оболочках глаза, дыхательных, пищеварительных и мочеполовых путей. В патологии человека наибольшую роль играют M.pneumoniae, M.hominis и представитель рода Ureaplasma - U.urealyticum. Представители рода Ureaplasma дают мелкие колонии на твердых  сложных средах, важной особенностью для них является потребность в мочевине. 

 157 Патогенные для человека микоплазмы вызывают у него заболевания (микоплазмозы) дыхательных, мочеполовых путей и суставов с  разнообразными клиническими проявлениями.   

Респираторный микоплазмоз. Возбудителем заболевания является M.pneumoniae - единственный вид этого рода, патогенность которого для человека доказана. Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma. В антигенном отношении вид однороден, типоспецифических антигенов не обнаружено. M.pneumoniae обладает тропизмом к эпителиальным клеткам дыхательных путей. Вирулентность их связана с наличием гемолитической активности и способностью оказывать цитотоксическое действие. Источником инфекции является больной человек, а также носители. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Возбудитель адсорбируется  на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, размножается и активно распространяется по слизистой оболочке трахеи и бронхов, достигая альвеолоцитов. В

результате повреждения клеток развивается пневмония. Постинфекционный иммунитет сохраняется в течение 5-10 лет. Он обусловлен как секреторными, так и гуморальными антителами.  

Урогенитальный микоплазмоз. Возбудителями заболевания являются M.hominis и U.urealyticum. Этими видами микоплазм инфицировано не менее 50% здоровых мужчин и женщин в возрасте 30-50 лет. Основные биологические и морфологические свойства типичны для семейства Mycoplasmataceae. M.hominis в антигенном отношении гетерогенны: различают 8 сероваров. U.urealyticum также неоднородны в антигенном отношении: выделяют 8 сероваров человеческого и 8 - животного происхождения. M.hominis и U.urealyticum в организме человека чаще всего паразитируют на слизистых оболочках нижних отделов мочеполовых путей. Источник инфекции - инфицированный человек, в том числе, и очень часто, бессимптомный носитель микоплазм. Заражение происходит путем полового контакта. Клиническая картина микоплазменной инфекции не имеет патогномоничных только для нее симптомов. Установлена этиологическая роль микоплазм и уреаплазм в возникновении сальпингитов, оофоритов, кольпитов, эндоцервицитов, уретритов, простатитов. Эти микоплазмы выделены при сепсисе, абсцессах мозга; доказана их роль в развитии гломерулонефритов, циститов. 

 158 Микоплазменная и уреаплазменная инфекции могут быть причиной бесплодия, различной патологии беременности (выкидыши, преждевременные роды, мертворождение плода) и новорожденных. Для микробиологической диагностики применяют бактериологическое исследование, методы серодиагностики, иммуноиндикации, молекулярногенетические. Этиотропная терапия проводится антибиотиками (тетрациклины, макролиды) и фторхинолонами. Для специфической профилактики пневмонии, вызванной микоплазмами,  разработана вакцина

53. Понятие иммунопрофилактика. Иммунобиологические препараты, используемые для иммунопрофилактики. 

Иммунопрофилактика - это использование иммунологических закономерностей для создания искусственного приобретенного иммунитета (активного или пассивного). Для иммунопрофилактики можно использовать антигенные препараты (вакцины, анатоксины), при введении которых формируется искусственный активный иммунитет, или антительные препараты (иммунные сыворотки, иммуноглобулины, плазма), с помощью которых создается искусственный пассивный иммунитет. Вакцинами называются препараты, которые используются для создания искусственного активного приобретенного иммунитета.  Вакцины готовят из специально отобранных штаммов, обладающих полноценными иммуногенными свойствами, т.е. обеспечивающих развитие выраженного иммунного ответа. Такие штаммы называются вакцинными. Большинство из них получено путем селекции спонтанных или индуцированных мутантов с максимально выраженными иммуногенными свойствами из обычных популяций бактерий, вирусов или риккетсий.  Вакцины должны обладать высокой иммуногенностью (обеспечивать надежную противоинфекционную защиту), ареактивностью (не давать выраженных побочных реакций), безвредностью для макроорганизма и минимальным сенсибилизирующим действием. Далеко не все вакцинные препараты полностью отвечают этим требованиям. По назначению вакцины делятся на профилактические и лечебные. По характеру

микроорганизмов, из которых они созданы, вакцины бывают бактериальные, вирусные и риккетсиозные. По способу приготовления различают вакцины:  живые (содержат живые аттенуированные авирулентные штаммы возбудителей);  убитые (содержат убитые культуры возбудителей);  химические (содержат химические компоненты возбудителей, обладающие иммуногенностью);  искусственные. От химических они отличаются тем, что помимо антигенного компонента (обычно выделенного и очищенного или искусственно синтезированного антигена возбудителя) содержат вещества (полиионы) стимулирующие иммунный ответ.  генноинженерные (содержат векторные штаммы непатогенных бактерий/вирусов, в которые методами генной инженерии введены гены, ответственные за синтез протективных антигенов тех или иных возбудителей);  антиидиотипические (используя для иммунизации животных определенные идиотипы антител человека, получают анти-антитела, чей активный центр по строению сходен с антигенной детерминантой соответствующих возбудителей). Живые вакцины, содержащие авирулентные штаммы микроорганизмов - возбудителей, по существу воспроизводят в организме человека легко протекающую инфекцию (но не инфекционную болезнь), в ходе которой 

 63 формируются те же механизмы защиты, что и при развитии постинфекционного иммунитета. Они создают достаточно длительный и напряженный иммунитет. Живые вакцины применяют для профилактики туберкулеза (BCG), особо опасных инфекций (чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза) и гриппа, кори, бешенства (антирабическая), оспы, полиомиелита (СейбинаСмородинцева-Чумакова), паротита, желтой лихорадки, коревой краснухи. Между вакцинациями живых вакцин рекомендован интервал не менее, чем в 1 месяц. Согласно теоретическим положениям в противном случае возможны тяжелые побочные реакции, а иммунный ответ может быть пониженным. Убитые вакцины готовят из микроорганизмов, инактивированных прогреванием (гретые), УФ-лучами, химическими веществами (формалином - формоловые, фенолом- карболовые, спиртом и др.) в условиях, исключающих денатурацию антигенов. Иммуногенность убитых вакцин ниже, чем у живых, и иммунитет, вызываемый ими, сравнительно кратковременный и менее напряженный. Убитые вакцины применяют для профилактики коклюша, лептоспироза, брюшного тифа, паратифа А и В, холеры, клещевого энцефалита, полиомиелита (Солка), гепатита А (Havrix 1440). Убитые вакцины (дизентерийная, гонококковая, бруцеллезная) используются и для иммунотерапии в качестве лечебных вакцин. Химические вакцины содержат только отдельные компоненты бактериальных клеток или вирионов, непосредственно обладающих иммуногенностью. Они менее реактогенны и могут использоваться даже у детей дошкольного возраста. Разработаны брюшнотифозная, сыпнотифозная, холерная, менингококковая, пневмококковая, гриппозная химические вакцины. Примерами генноинженерных вакцин могут служить вакцины против гепатита В - Энджерикс В (фирма СмитКляйнБичем, США) и Рекомбивакс HB (Merck Sharp). Для повышения иммуногенности к вакцинам добавляют различного рода адъюванты (алюмо-калиевые квасцы, гидроксид или фосфат алюминия, масляную эмульсию), создающие депо антигенов или стимулирующие фагоцитоз и таким образом повышающие чужеродность антигена для реципиента. В Институте иммунологии МЗ РФ были разработаны вакцины нового поколения. Они представляют собой препараты, состоящие из микробных антигенов и синтетических полиионов (полиакриловая кислота, поливинилпирролидон и др.) - мощных стимуляторов иммуногенеза. Первая такая вакцина

- “Гриппол” - внедрена в практику. Для специфической профилактики инфекций, возбудители которых продуцируют экзотоксин, применяют анатоксины. Анатоксин - это 

 64 экзотоксин, лишенный токсических свойств, но сохранивший антигенные. Поэтому при введении анатоксинов формируется антитоксический иммунитет, т.к. они индуцируют синтез антитоксических антител - антитоксинов. Широко применяются дифтерийный (АД), столбнячный (АС), стафилококковый анатоксины, холероген-анатоксин. Существуют моно- и поли- вакцины - приготовленные соответственно из одного или нескольких возбудителей. Вакцины, содержащие антигены бактерий и анатоксины, называются ассоциированными. Это вакцина АКДС (адсорбированная коклюшнодифтерийностолбнячная вакцина), в которой коклюшный компонент представлен убитой коклюшной вакциной, а дифтерийный и столбнячный - соответствующими анатоксинами, вакцина TABTe, содержащая О-антигены брюшнотифозных, паратифозных А и В бактерий, и столбнячный анатоксин, брюшнотифозная химическая вакцина с секстаанатоксином (смесь анатоксинов клостридий ботулизма типов А, В, Е, клостридий столбняка, клостридий перфрингенс типа А и эдематиенс - два последних микроорганизма - наиболее частые возбудители газовой гангрены), и др.. В то же время АДС (дифтерийно-столбнячный анатоксин), часто используемый вместо АКДС при вакцинации детей, является просто комбинированным препаратом, а не ассоциированной вакциной, т.к. содержит только анатоксины. Вакцины используются и для проведения плановой (обязательной) иммунизации по эпидемическим показаниям при возникновении опасности заражения среди отдельных ограниченных групп населения : - в определенных районах (вакцина против клещевого энцефалита, туляремии, холерная вакцина, столбнячный анатоксин); - при профессиональном контакте с возбудителем, например, военные (вакцина TABTe, брюшнотифозная вакцина с секстаанатоксином), медперсонал (дифтерийный анатоксин, вакцина против гепатитов А и В). Обязательная плановая вакцинация детского населения России регламентируется приказами Минздрава России. Разработан прививочный календарь, т.е. определены конкретные сроки (возрастные группы) обязательных профилактических прививок в детском возрасте. К препаратам, используемым в России для обязательной плановой вакцинации детского населения, относятся: туберкулезная вакцина БЦЖ (BCG), вакцина АКДС, живая полиомиелитная вакцина, коревая вакцина, паротитная вакцина, а с 1996 г. - вакцина Энджерикс В (гепатит В). Для создания более выраженного иммунного ответа, т.е. более напряженного иммунитета, для некоторых вакцин, входящих в прививочный календарь, предусматривается ревакцинация через определенные интервалы 30 - 45 дней. 

 65 Более того, в связи с тем, что искусственный иммунитет после вакцинации сохраняется сравнительно недолго, прививки против одного и того же заболевания проводят неоднократно в течение жизни человека. С возрастом (перед школой) вакцина АКДС заменяется сначала АДС-м анатоксином, затем АД-м анатоксином (11-12 лет); в 16-17 лет и взрослые (1 раз в 10 лет) должны снова прививаться АДС-м анатоксином, или АДанатоксином (адсорбированный дифтерийный). Нативный или очищенный адсорбированный стафилококковый анатоксин может быть использован для добровольной плановой иммунопрофилактики беременных в 3-м триместре, рекомендуемой для предупреждения развития стафилококковых инфекций у родильниц и новорожденных. Для экстренной профилактики некоторых инфекционных болезней (столбняк, грипп, корь)

могут использоваться соответствующие иммунные сыворотки/гамма глобулины. После их введения создается пассивный искусственный иммунитет. Его напряженность не высока, а длительность не превышает 1,5-2 недель. Для целей иммунопрофилактики можно также использовать человеческий нормальный иммуноглобулин. Его получают из донорской, плацентарной или абортивной крови. Он содержит антитела против возбудителей многих инфекционных заболеваний, образовавшихся как результат бытовой иммунизации, перенесенных заболеваний или вакцинаций. Он используется, например, для профилактики кори, коклюша, скарлатины, менингококковых инфекций, полиомиелита. Кроме указанных препаратов, в практике специфической профилактики инфекционных болезней весьма ограниченно используются антительные препараты - иммунные сыворотки, получаемые от иммунизированных животных или переболевших людей, или специально иммунизированных доноров. Использование препаратов, полученных от иммунизированных людей, более эффективно. Совершенствование процесса получения лечебных сывороток привело к созданию более концентрированных высокоочищенных от балластных белков препаратов - иммуноглобулинов (гамма-глобулинов). В медицинской практике используются противочумный, противосибиреязвенный, противококлюшный, противостафилококковый, противостолбнячный, антирабический (против бешенства), противогриппозный, противокоревой и др. иммуноглобулины (гамма-глобулины). Антимикробные и антитоксические сыворотки, человеческий нормальный иммуноглобулин могут быть использованы при экстренной иммунопрофилактике для введения контактным лицам, т.е. бывшим в контакте с больными, например, дифтерией, и которым необходимо быстро создать пассивный иммунитет. Продолжительность защитного действия сывороток находится в пределах 8 - 20 дней.

83. Особо-опасные инфекции: чума, сибирская язва, бруциллез, туляремия. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. 

Возбудитель туляремии отнесен к роду Francisellatularensis подразделяют на три географические расы (подвиды). F.tularensis - мелкиекоккобактерии; неподвижны, не образуют спор, продуцируют капсулообразное вещество. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Возбудитель туляремии, особенно в первых генерациях, не растет на искусственных питательных средах, что является одним из существенных признаков при его идентификации. Для поддержания лабораторных культур используют специальные (с добавлением желтка или цистина) среды, на которых через 2-5 суток формируются мелкие колонии с ровными краями беловатого цвета. Ферментативная активность туляремийного микроба не выражена. Возбудитель туляремии имеет Vi- и Оантигены. F.tularensis является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность связана со способностью развиваться в фагоцитах и подавлять их киллерную активность, образовывать капсулу, эндотоксин, нейраминидазу. Антигены клеточной стенки обладают свойствами аллергенов, что ведет к сенсибилизации инфицированного организма и усугубляет действие других факторов вирулентности. Естественные хозяева возбудителя - грызуны, водные крысы, домовые мыши. Заражение людей происходит при прямом контакте с больными животными, их трупами, через объекты внешней среды и пищевые продукты, инфицированные выделениями больных грызунов. Возможен и трансмиссивный путь передачи через укусы кровососущих членистоногих. От больных людей заболевание не передается. Возбудитель может проникать в организм через слизистые оболочки

верхних дыхательных путей, глаз, желудочно-кишечного тракта и даже через неповрежденную кожу. Заболевание протекает тяжело, продолжается в среднем 4-6 недель и заканчивается, как правило, выздоровлением.  Для микробиологической диагностики используют методы серодиагностики, иммуноиндикации, постановку аллергической диагностической пробы с тулярином. В специализированных лабораториях проводят бактериологическое исследование (материал для исследования определяется клинической формой болезни). Культуру выделяют, заражая лабораторных животных. Для лечения туляремии используют антибиотики: хлортетрациклин, левомицетин, стрептомицин.  Специфическая профилактика осуществляется живой туляремийной вакциной

Возбудитель чумы относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia, виду Y.pestis. Возбудитель чумы - полиморфные, мелкие, овоидные палочки. Они неподвижны, аспорогенны, в организме образуют капсулу. Грамотрицательные, окрашиваются биполярно. Факультативные анаэробы, психрофиллы, температурный оптимум 280С. Хорошо растут на простых питательных средах. На плотных питательных средах уже через 12 часов формируются шероховатые (R-формы) колонии. Авирулентные штаммы образуют гладкие (S-формы) колонии. На жидких средах Y.pestis дает поверхностную пленку со спускающимися нитями. Биохимическая активность невелика. Носителями возбудителя являются дикие грызуны, а переносчиками - блохи. Природные очаги чумы занимают 6-7 % территории суши земного шара и выявлены на всех континентах. Заражение человека чаще всего происходит при укусе инфицированными блохами, контакте с больными, погибшими от чумы грызунами, а также при забое и разделке больных чумой верблюдов. Чума может передаваться и от человека человеку как антропонозное заболевание. Чума характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением лимфатической системы, септицемией. В зависимости от пути проникновения возбудителя в организм человека чума протекает в виде различных клинических форм: кожной, бубонной, первично-септической и легочной. После перенесенного заболевания вырабатывается стойкий и длительный иммунитет, обусловленный, преимущественно, фагоцитарной активностью клеток макрофагальной системы. Этиотропная терапия проводится антибиотиками, предпочтение отдается аминогликозидам. С целью специфической профилактики применяют живую вакцину. После вакцинации иммунитет сохраняется около года. Материал для исследования определяется клинической формой заболевания (пунктат бубона, мокрота, кровь). Как указывалось выше, микробиологическая диагностика чумы проводится только в специализированных лабораториях и предусматривает первичную бактериоскопию, выделение возбудителя или обнаружение его антигенов. Используются и методы серологической диагностики. 

Возбудитель сибирской язвы относится к семейству Bacillaceaeanthracis. B.anthracis - это крупные палочки с прямыми концами, неподвижны. В мазках располагаются парами, часто - цепочками. В организме образуют капсулу. В неблагоприятных условиях внешней среды при доступе кислорода образуют споры. Споры располагаются центрально, имеют овальную форму и по диаметру не превышают ширину клеток. При попадании в благоприятную среду в течение нескольких часов споры прорастают и дают начало вегетативной форме. Грамположительные. Факультативные анаэробы. Нетребовательны к питательным средам. На мясо-пептонномагаре через 24 часа формируются характерные колонии. Они серебристо-серые, зернистые, диаметром 3-5 мм, с бахромчатыми краями и

отходящими от них пучками нитей. Основным фактором вирулентностиB.anthracis является капсула. Мутанты, дефектные по образованию капсулы, авирулентны и используются в качестве вакцинных штаммов. Другой важный фактор вирулентности - токсинобразование. Сибирская язва - зоонозная инфекция. Люди заражаются при уходе за больными животными, разделе туш вынужденно забитых больных животных, употреблении в пищу их мяса, выделке шкур погибших животных.  Материал для исследования определяется клинической формой болезни; это содержимое сибиреязвенного карбункула, мокрота, кровь, фекалии. Для обнаружения возбудителя используют микроскопию мазков из патологического материала, методы иммуноиндикации. Бактериологическое исследование проводится только в лабораториях строгого режима. Для лечения сибирской язвы помимо антибиотиков (пенициллинового и тетрациклинового ряда) используют специфическую противосибиреязвенную сыворотку или специфический γ-глобулин. Специфическая профилактика проводится живой сибиреязвенной вакциной. На основе “протективного” антигена разработана также химическая сибиреязвенная вакцина. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 24

24. Хламидии. Строение, биологические особенности; классификация. Взаимодействие с клеткой-мишенью. 

Хламидии относятся к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia. Хламидии - прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Это “энергетические паразиты” клеток. Для них характерен уникальный цикл развития, включающий две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования. Это элементарные и инициальные (ретикулярные) тельца. Хламидии - кокковидные бактерии (0,3-1,5 мкм), неподвижны, капсул не образуют. Грамотрицательны.  Цикл развития хламидий протекает в цитоплазматических включениях. Проникшие в клетку элементарные тельца (инфекционная форма) превращаются в ретикулярные тельца (вегетативная форма). Они размножаются путем бинарного деления и превращаются в элементарные тельца нового поколения. Такой цикл продолжается 40-72 часа и обычно завершается разрывом клетки и выходом элементарных телец хламидий в межклеточное пространство. Помимо такого репродуктивного цикла в неблагоприятных условиях реализуются и другие механизмы взаимодействия хламидий  с клеткой хозяина. Это деструкция хламидий в фагосомах, Lподобная трансформация и персистенция. Трансформированные и персистентные формы хламидий способны реверсировать в исходные (ретикулярные) формы с последующим преобразованием в элементарные тельца, т.е. в инфекционные частицы. Для культивирования хламидий используют культуру тканей или развивающиеся куриные эмбрионы. Хламидии имеют групповой, видоспецифические и вариантспецифические антигены. Род Chlamydia делится на 4 вида.

C.trachomatis и C.pneumoniae являются возбудителями антропонозных хламидиозов, C.psittaci - зооантропонозных, а C.picorum вызывают заболевания только у животных.  

C.trachomatis. C.trachomatis сероваров А, В, ВА и С являются возбудителями трахомы, конъюнктивитов с включениями; C.trachomatis сероваров D, E, F, G, H, I, J, К - урогенитальных хламидиозов, а сероваров L1, L2, L3 - венерической лимфогранулемы. Источником хламидийной инфекции является человек. Путь заражения - половой. Кроме того, возможно инфицирование новорожденных при прохождении через родовые пути больной матери и трансплацентарное инфицирование плода. При трахоме - контактнобытовой путь заражения. C.trachomatis сероваров D...K обладают тропизмом к столбчатому эпителию мочеполового тракта. Клинические проявления хламидийной инфекции весьма разнообразны. Это уретриты, эпидимиты, простатиты, цервициты, эндометриты. В 30-50% случаев заболевание протекает бессимптомно. Хламидийная инфекция обуславливает развитие бесплодия, патологии беременности и плода. При инфицировании плода хламидии могут вызывать внутриутробное поражение головного мозга, органов зрения и слуха, пневмонии, гастроэнтериты и т.д. C.trachomatis выделяют при болезни Рейтера. Это заболевание, характеризуется триадой признаков - поражение мочеполовых органов (уретрит или простатит), заболевание глаз (конъюнктивит) и суставов (артрит). Иммунитет после выздоровления не формируется.  

C.pneumoniae. C.pneumoniae обладает тропизмом к эпителию респираторных путей. Источником является больной, путь передачи - воздушно-капельный. Вызывают респираторный хламидиоз, проявляющийся в виде пневмонии, катара верхних дыхательных путей.  

C.psittaci. C.psittaci являются паразитами клеток тканей позвоночных; они обнаружены у птиц, домашних и диких млекопитающих. Вызывают у птиц и животных пситтакоз, орнитоз. Заражение человека происходит от птиц и домашних животных респираторным, контактным или алиментарным путями. Заболевание человека может протекать как в скрытой, так и в манифестной формах. Для клиники характерно многообразие клинических проявлений: пневмонии и бронхопневмонии, миокардиопатии, заболевание почек, гепатоэнцефалиты, патология беременности, генерализованный хламидиоз зоонозной природы. Постинфекционный иммунитет нестойкий. 

 155 Для диагностики хламидийной инфекции широко используются методы серодиагностики, иммуноиндикации (РИФ), молекулярно-генетические методы (ПЦР), но “золотым стандартом” остается выделение хламидий при заражении культуры тканей. Средством этиотропной терапии хламидийной инфекции являются антибиотики. Препараты выбора - тетрациклины и макролиды. Специфическая профилактика не разработана. 

54. Реакции иммунитета с меченными компонентами. ИФА, латекс-агглютинация, иммунохроматографический анализ

6)Твердофазный иммуно-ферментный анализ (ИФА). В этой реакции ее компонент метят не радиоактивной или флюоресцирующей меткой, а ферментом (пероксидаза хрена), который при положительном результате реакции включается в комплекс антиген- антитело. При добавлении к такому комплексу соответствующего субстрата происходит реакция ферментсубстрат, что легко регистрируется по изменению окраски

Реакция латекс-агглютинации является одним из видов реакции агглютинации, в которой в качестве носителя антигена или антитела используются синтетические полимерные частицы - латексы. 

Эта реакция применяется с целью: 1) обнаружения присутствия антител в сыворотке крови обследуемых лиц; 2) идентификации возбудителя заболевания. 

Для приготовления антигенного латексного диагностикума растворимые мелкодисперсные антигены бактериальной клетки белковой или полисахаридной природы адсорбируют на поверхности окрашенных частиц инертного монодисперсного латекса. Такие нагруженные бактериальным антигеном латексные частицы склеиваются под действием иммунной сыворотки, содержащей антитела против данного антигена, что приводит к образованию характерного осадка - тонкой пленки с неровными краями ("зонтик").

Иммунохроматографический анализ — это метод определения наличия определенных концентраций веществ в биологических материалах (моча, цельная кровь, сыворотка или плазма крови, слюна, кал и т. д.).  

Данный вид анализа осуществляется при помощи индикаторных полосок, палочек, панелей или тест-кассет, которые обеспечивают быстроту проведения тестирования. ИХА — сравнительно молодой метод анализа, он часто обозначается в литературе также как метод сухой иммунохимии, стрип-тест, QuikStrip cassette, QuikStrip dipstick, экспресс-тест или экспресс анализ. Эти названия связаны с быстротой проведения этого метода анализа

84. Легионеллез. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. 

Легионеллы относятся к семейству Legionellaceae, роду Legionella, который включает более 30 видов, половина из которых вызывает пневмонии. Наиболее частым возбудителем является L.pneumophila. Легионеллы - грамотрицательные палочки средней величины с заостренными концами, полиморфны. Спор, капсул не образуют. Подвижны.  Легионеллы - факультативные внутриклеточные паразиты.  Размножаются в тканевых культурах, развивающихся куриных эмбрионах, в организме экспериментальных животных, на специальных сложных по составу искусственных питательных средах. На этих средах видимый рост появляется на 3-5 сутки. Колонии крупные, выпуклые, блестящие, могут иметь пигмент коричневого цвета.  Легионеллы имеют соматический и жгутиковый антигены, обладающие групповой и типовой специфичностью. По антигенному строению L.pneumophila делятся на 14 сероваров. Важнейшим фактором патогенности  легионелл является продукция эндотоксина и внутрифагоцитарный паразитизм. Легионеллез (болезнь легионеров) - сапронозная инфекция. Легионеллы обитают в воде, открытых водоемах. Путь заражения воздушно-капельный. Характерным для распространения легионелл является наличие мелкодисперсного источника распыления воды (кондиционеры, душевые установки и т.д.). Попав в организм, легионеллы размножаются преимущественно в альвеолярных макрофагах, полиморфно-ядерных нейтрофилах, моноцитах, т.е. являются

внутрифагоцитарными паразитами. Болезнь легионеров - острая, тяжело протекающая пневмония, сопровождаемая поражением других органов. Повторные заболевания неизвестны. В сыворотке больных к концу первой недели заболевания появляются антитела, титр которых нарастает и достигает максимума на 4-5 недели заболевания. Материалом для исследования служит мокрота и сыворотка крови. Основными методами микробиологической диагностики являются иммуноиндикация (РИФ, ИФА), серодиагностика (ИФА) и генодиагностика (ПЦР). Этиотропная терапия проводится антибиотиками (эритромицин и его комбинации с рифампицином). Специфическая профилактика не разработана

 

 

 

 

БИЛЕТ 25

25. Риккетсии. Строение, биологические особенности; классификация. Взаимодействие с клеткой-мишенью. 

Риккетсии - это бактерии, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Риккетсии выделены в отдельный порядок Rickettsiales. Клетки риккетсий полиморфные (палочковидные, кокковидные, нитевидные), грамотрицательные. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Риккетсии относятся к медленно растущим организмам. Время генерации не менее 8-9 часов. Размножаются, подобно бактериям, простым поперечным делением или дроблением нитевидных форм. По типу дыхания - аэробы. У риккетсий имеются различные ферменты и им присущи многие обменные процессы. Однако в процессе эволюции они утратили некоторые энзимные системы, необходимые для синтеза отдельных жизненно важных биополимеров, и поэтому перешли к паразитическому образу жизни. Патогенные для человека риккетсии не способны размножаться на бесклеточных средах (исключение R.quintana). Для их культивирования применяют те же методы, что и для культивирования вирусов: заражение культуры тканей, культивирование в развивающихся куриных эмбрионах, организме экспериментальных животных или эктопаразитов. Риккетсии имеют два антигена - растворимый (группоспецифический) и корпускулярный (видоспецифический). Риккетсии образуют отдельный порядок Rickettsiales. Патогенными для человека являются представители одного из 3 семейств - Rickettsiaceae, которое делится на трибы: Rickettsieae, Erlichieae и Wolbachieae. Основную роль в патологии человека играют риккетсии трибы Rickettsieae, состоящей из 3 родов: Rickettsieae, Rochalimaea и Cоxiella, а также представители трибы Ehrlichieae. Деление риккетсий на рода основано на различии в антигенном строении и локализации риккетсий в пораженной клетке. Возбудители относящиеся к роду Rickettisia располагаются в цитоплазме, реже в ядре клеток хозяина, роду Coxiella - в фагосомах и фаголизосомах, а роду Rochalimaea - в межклеточных пространствах. Патогенные риккетсии образуют токсические вещества (природа которых окончательно не установлена). Они нестойки, легко разрушаются, обладают гемолитической активностью и вызывают  парез кровеносных сосудов. Заболевания, вызываемые риккесиями, носят общее название риккетсиозов. Два из них - эпидемический сыпной тиф (возбудитель R. prowazekii) и волынская лихорадка (возбудитель R. quintana) являются антропонозными инфекциями. Для большинства других риккетсий основным резервуаром являются грызуны и членистоногие. Риккетсиозы – трансмиссивные инфекции. Возбудитель передается человеку при укусе кровососущих членистоногих (вши, блохи, клещи). Лишь Ку-лихорадка 

 152 (возбудитель C.burneti) передается алиментарным или воздушно-капельным путем, а естественным хозяином ее возбудителя является домашний скот. Большинство риккетсиозов относится к природно-очаговым инфекциям. Об этом свидетельствуют и их названия - марсельская, волынская лихорадка, североазиатский риккетсиоз и др. Лишь сыпной тиф, один из наиболее тяжелых риккетсиозов, распространен повсеместно. Риккетсии поражают клетки ретикулоэндотелиальной системы и эндотелия сосудов. В основе патогенеза риккетсиозов лежит интоксикация и развитие характерных изменений в эндотелии артериол и капилляров в виде эндоваскулита. Как следствие возникают тромбозы, стазы и кровоизлияния в различных органах и тканях, в том числе ЦНС. Для клинике всех риккетсиозов характерными симптомами является выраженная интоксикация и геморрагии. Смерть наступает в результате развития острой сердечной недостаточности и поражения ЦНС. Постинфекционный иммунитет - длительный, стойкий. Основным методом микробиологической диагностики риккетсиозов является серологическое исследование (РА, РПГА, РСК с соответствующими риккетсиозными диагностикумами). Выделение риккетсий возможно только в специальных лабораториях строгого режима. Для этиотропной терапии используют антибиотики группы тетрациклина и хлорамфеникол (левомицетин). Менее эффективны антибиотики - макролиды. Специфическая профилактика разработана в отношении двух риккетсиозов: сыпного тифа и Ку-лихорадки. Она проводится по эпидпоказаниям живой или химической сыпнотифозной вакциной  и живой вакциной из риккетсий Бернета.

55. Понятие иммунотерапия. Иммунобиологические препараты, применяемые для иммунотерапии.

Иммунотерапия - это использование иммунологических закономерностей для лечения больных. С этой целью используются антительные (иммунные сыворотки, гаммаглобулины, плазма) и значительно реже - антигенные (лечебные вакцины, аутовакцины или анатоксины) препараты. Для лечения заболеваний, возбудители которых продуцируют экзотоксин, острых тяжелых генерализованных форм, некоторых других бактериальных инфекций, используются препараты, содержащие готовые антитела, т.е. экстренно создающие пассивный искусственный иммунитет. Для этих целей используются антитоксические и антибактериальные сыворотки, иммуноглобулины и плазма. Антитоксические сыворотки содержат антитела против экзотоксинов. Их получают путем гипериммунизации животных (лошадей) анатоксином. Активность таких сывороток измеряется в АЕ (антитоксических единицах) или МЕ (международных единицах). Это минимальное количество сыворотки, способное нейтрализовать определенное количество (обычно 100) DLM токсина для животных определенного вида и определенной массы. Антитоксические сыворотки - противостолбнячная, противоботулиническая, противогангренозная, противодифтерийная. Применение антитоксических сывороток является обязательным при лечении соответствующих инфекций. Антимикробные сыворотки содержат антитела против клеточных антигенов возбудителя. Их получают иммунизацией животных клетками соответствующих возбудителей, и дозируют в мл. Антимикробные сыворотки могут применяться при лечении сибирской язвы, чумы, стрептококковых, стафилококковой, синегнойной инфекций. Их назначение определяется тяжестью течения заболевания и не является обязательным. Иммунотерапия антигенными препаратами имеет целью стимулировать собственные механизмы специфической защиты.

Она применяется для лечения больных с хроническими, длительно, вяло текущими формами инфекций. Обычно используют убитые лечебные вакцины (гоновакцина, бруцеллезная лечебная, стафилококковая вакцины, вакцина СолкоУровак (для лечения хронических инфекций мочевых путей - содержит 6 штаммов кишечной палочки, протеев, клебсиелл и фекальных стрептококков). Особую отдельную группу лечебных вакцин представляют аутовакцины. Это вакцины, приготовленные из убитых прогреванием при 7080оС в течение 1 часа штаммов возбудителей, выделенных от данного 

 67 больного. Аутовакцины имеют определенные преимущества, т.к. продуцируют иммунный ответ на антигены конкретного возбудителя. При проведении иммунотерапии необходимо помнить, что : - противовирусные антительные препараты не используются, т.к. антитела не действуют на внутриклеточные формы вирусов; - лечение путем введения антитоксических сывороток должно быть начато, как можно раньше, не дожидаясь результатов микробиологического диагноза, т.к. серотерапия ими эффективна только до адсорбции (фиксации) токсина клетками организма; - антитоксические иммунные сыворотки часто содержат лошадиный белок и введение таких сывороток пациентам допустимо лишь в случае отсутствия в течение 20-30 мин выраженной кожной реакции на лошадиную сыворотку (в/к, в разведении 1:100, в объеме 0,1 мл) - в некоторых случаях возможно одновременное введение и антигенных, и антительных препаратов. Например, при первичной хирургической обработке ран столбнячный анатоксин вводится вместе с противостолбнячным иммуноглобулином, а при множественных укусах животными людей в область головы и шеи, параллельно с антирабической вакциной вводится и специфический антирабический иммуноглобулин. -использование иммуноглобулинов, полученных от иммунизированных людей, при иммунотерапии гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой этиологии и столбняка более эффективно, чем использование соответствующих иммунных антитоксических сывороток.

85. Вирусный онкогенез. Герпетическая инфекция. Прионные болезни.

Одним из типов взаимодействия вируса и клетки является вирус-индуцированная трансформация, при которой клетки, инфицированные вирусом, приобретают новые, не присущие им свойства. Одним из проявлений такого взаимодействия является злокачественная трансформация. Клетки, инфицированные вирусом, приобретают способность к неконтролируемому делению, развивается опухоль. Такие вирусы называются онкогенными. Они вызывают как злокачественные, так и доброкачественные (реже) опухоли.

Онкогенные вирусы:

1) ДНКовые вирусы:

– полиомавирусы;

– герпесвирусы;

– аденовирусы;

– гепаднавирусы;

– папиломавирусы.

2) РНКовые вирусы:

– ретровирусы (род онкорновирусы).

Несмотря на то, что онкогенные вирусы принадлежат к различным семействам, механизм опухолевого перерождения клетки един. ДНК- транскрипт или ДНК онковируса встраивается в геном клетки и сообщает ей

новые свойства. В состав генома онкогенных вирусов входит онкоген. Этот ген имеет клеточное происхождение и отвечает за деление клетки. Он сообщает клетке свойство неконтролируемого деления.

Герпесвирусы

Семейство Herpesviridae

Подсемейство Alphaherpesvirinae

 Herpes simplex тип1 – ГВЧ-1

 Herpes simplex тип 2 – ГВЧ-2

 Varicella-zoster virus – ГВЧ-3

Подсемейство Betaherpesvirinae

 Род Cytomegalovirus – ГВЧ-5

 Род Roseolovirus

 Herpes lymphotropic virus ГВЧ-6

5

 Herpes lymphotropic virus ГВЧ-7

Подсемейство Gamaherpesvirinae

 Род Lymphocryptovirus

 Вирус Эпштейна-Барр – ГВЧ-4

 Род Rhadinovirus – ГВЧ-8

Семейство состоит из трех подсемейств, отличающихся по структуре генома, тканевому тропизму, цитопатологии и локализации латентной инфекции. Все представители семейства – ДНК-содержащие вирусы; ДНК двунитевая, линейная, состоит из двух фрагментов: L-фрагмент (до 80%) и Ѕ-фрагмент. Линейная ДНК как бы намотана на центральное белковое тело. Размеры

вириона ~150 нм. Тип симметрии – кубический. Имеется суперкапсидная оболочка.

Представители подсемейства Alphaherpesvirinae хорошо размножаются в курином эмбрионе, в культуре клеток. Обладают гемагглютинирующей способностью. Для них характерен короткий цикл репродукции и высокая цитопатическая активность. ГВЧ-1 и ГВЧ-2 отличаются по антигенному строению. Вызывают простой герпес, характеризующийся везикулярными высыпаниями на коже,слизистых оболочках, поражением глаз, ЦНС и внутренних органов, а также пожизненным носительством и рецидивами болезни. ГВЧ-1 чаще поражает слизистые оболочки ротовой полости и глотки, глаза, вызывает энцефалиты. Оба типа вирусов могут вызывать оральный и генитальный герпес. Генитальный герпес передается половым путем и его чаще вызывает ГВЧ-2. Герпес новорожденных как правило последствие полового герпеса матери. Клинические проявления различны. Латентная инфекция чувствительных нейронов – характерная особенность нейротропных ГВЧ-1 и ГВЧ-2.

Лечение

Применяют противовирусные препараты (ацикловир, фамфикловир и др.), препараты интерферона и индукторы эндогенного интерферона. Специфическая профилактика герпеса осуществляется в период ремиссии инактивированной культурой герпетической вакцины из штаммов ГВЧ-1 и ГВЧ-2.

Varicella-zoster virus вызывает ветряную оспу и опоясывающий герпес. Герпес-вирусы оказывают иммунодепрессивное действие. Они вызываютвыраженную пролиферацию Тлимфоцитов с супрессивной функцией.

Подсемейство Betaherpesvirinae

6 Представители этого подсемейства характеризуются более длительным циклом репродукции и медленным развитием ЦПД. ЦПД проявляется в форме резкого увеличения размеров цитоплазмы (25-40 мкм), ядра клеток, появляются 1-2 внутриядерных включений (цитомегалические клетки). Цитомегаловирус (ГВЧ-5) – возбудитель медленных инфекций. Имеет очень широкое распространение. У лиц старше 35 лет антитела к ЦМВ обнаруживаются в 75-80% популяции. При нарушении функциональной активности иммунной системы эта латентная инфекция активируется. Клиническая картина ЦМВинфекции очень разнообразна, т.к. ЦМВ может поражать любые органы в различных сочетаниях. Заболевание может протекать как в бессимптомных, так и в тяжелых формах с летальным исходом. ЦМВ обладает высокой способностью проникать через плаценту и вызывать внутриутробные поражения плода. Представители подсемейства Gamaherpesvirinae размножаются в лимфобластоидных клетках, оказывают лимфопролиферативное действие. Вирус Эпштейна-Барр (ГВЧ-4) персистирует в Влимфоцитах. ВЭБ вызывает инфекционный мононуклеоз, а также лимфопролиферативные болезни и может способствовать развитию опухолей (лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома). 

БИЛЕТ 26

26. Спирохеты. Строение. Патогенные спирохеты. 

Спирохеты — порядок бактерий с длинными (3—500 мкм) и тонкими (0,1—1,5 мкм) спирально закрученными клетками. Грамотрицательны, хемоорганогетеротрофы. Подвижны, размножаются поперечным делением. Эндоспор не образуют. Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные и факультативно-анаэробные. Спирохеты встречаются в почве, воде, других организмах. Сифилис - одна из классических венерических болезней. Возбудитель - Treponema pallidum (бледная трепонема). Она имеет форму правильной спирали размером до 15 мкм, с 8-12 крутыми глубокими равномерными завитками, концы заострены. Из многих антигенов возбудителя наиболее изучены три: липополисахаридный кардиолипин, белковый и нуклеопротеиновый. Treponema pallidum очень требовательны к питательным средам и на обычных средах не растут. Для их культивирования используют сложные среды, содержащие почечную и мозговую ткань. Посевы культивируют в строго анаэробных условиях при температуре 350С. При нагревании до 600С возбудитель быстро погибает. Под действием пенициллина переходит в L-формы. Для сифилиса характерно волнообразное течение. Выделяют первичный, вторичный и третичный периоды болезни. Первичный период начинается с появления на месте внедрения возбудителя (слизистая половых органов, анальное отверстие, полость рта) первичной сифиломы (твердого шанкра). Его продолжительность 45-50 дней. Он делится на: серонегативный (2-3 недели) и сменяющий его серопозитивный (в крови появляются антитела). Вторичный период развивается при отсутствии лечения, как результат генерализации инфекции. Он может продолжаться 3-4 года. Третичный период. Для него характерно образование грубых поражений кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов, костей. Методы микробиологической диагностики. Основными методами микробиологической диагностики сифилиса являются: • бактериоскопический; • серологический. Бактериоскопическое исследование. Оно является одним из основных методов диагностики при первичном сифилисе. Исследуют материал из первичной сифиломы, пунктат лимфатических узлов. Из него готовят мазки, окрашивают их по Романовскому- Гимза и микроскопируют. Используют и темнопольную микроскопию неокрашенных мазков. Серологическое исследование. Оно становится возможным с 3-4 недели заболевания и является основным методом диагностики сифилиса. Антитела выявляют в осадочных тестах (на основе реакции преципитации), РСК и реакций с мечеными антиглобулиновыми сыворотками. В серологической диагностике сифилиса используются две группы стандартных антигенных препаратов, нетрепонемные и трепонемные. Первые (кардиолипин бычьего сердца) имеют лишь сходство с антигенами возбудителя сифилиса, вторые являются либо стандартными штаммами Treponema pallidum, либо их ультразвуковым дезинтегратом. С кардиолипиновыми антигенами ставят осадочную микрореакцию преципитации (МР), р.Кана (флокуляционный тест) и РСК, с трепонемными - РСК и реакцию иммобилизации трепонем. Оценка результатов реакции качественная, по системе + + + +. В настоящее время в серодиагностике сифилиса широко используются иммунолюминисцентные и иммуноферментные методики, для реализации которых предложен ряд коммерческих тест систем.

56. Реакции иммунитета. Механизмы взаимодействия антигенов и антител. Простые и сложные реакции иммунитета. 

Реакции иммунитета - это реакция между антигеном и антителом. Они характеризуются высокой чувствительностью (современные методики позволяют обнаруживать единичные

молекулы антигена или антитела) и специфичностью, т.е. в реакцию вступают только соответствующие друг другу антиген и антитело. Реакцию иммунитета можно описать в виде простейшего равенства АНТИГЕН + АНТИТЕЛО = РЕЗУЛЬТАТ. Исходя из принципа специфичности, результат реакции будет положительным, если антиген и антитело, участвующие в ней, соответствуют друг другу. Если же они не соответствуют, то результат будет отрицательным. Но каким бы он ни был (положительный или отрицательный), он всегда известен, т.к. регистрируется визуально или с помощью тех или иных приборных методов. Поэтому появляется возможность по известному результату и одному из компонентов реакции (антиген или антитело) определять второй, неизвестный компонент (соответственно, антитело или антиген). Таким образом все реакции иммунитета делятся на 2 большие группы. Первая - это реакции, в которых по результату и известному антигену определяют природу антител. Эти известные антигены представляют собой взвеси микроорганизмов (бактерий, грибов, вирусов) или их антигены, адсорбированные на тех или иных (эритроциты, частицы латекса) носителях. Такие препараты называются диагностикумы (соответственно, бактериальные, эритроцитарные, латексные). Вторая группа - это реакции, в которых по результату и известному антителу определяют природу антигена. Известный компонент реакций - антитела содержатся в стандартных диагностических (агглютинирующих, 

 59 преципитирующих и т.п.) иммунных сыворотках, которые получают на специализированных производствах путем иммунизации животных соответствующими антигенами. Антитела могут быть сорбированы на тех или иных (эритроциты, частицы латекса, клетки стафилококков) носителях. Такие диагностические препараты называют антительные эритроцитарные (латексные, КоА-) диагностикумы. Эти два типа реакций можно представить в виде следующих равенств - АГ + хАТ=результат или хАГ + АТ=результат. С помощью реакций первого типа (определение антител) реализуется метод серодиагностики (серум-сыворотки). Реакции второго типа (определение антигенов) составляют сущность метода иммуноиндикации. Реакции иммунитета делят на простые (прямые, двухкомпонентные, осадочные) и сложные (непрямые, многокомпонентные). К первым относят реакции агглютинации и преципитации, ко вторым - РСК, РИФ, РИА и др. Любая реакция иммунитета начинается с взаимодействия антигена с антителом. Это так называемая иммунологическая фаза реакции. Она специфична, но не видима. Она происходит в первые минуты реакции и сопровождается выделением тепла. В ходе этой фазы образуется комплекс антиген-антитело. Его дальнейшая судьба определяется различными факторами. Это и природа антигена (растворимый, корпускулярный) и характер реакции (прямые, осадочные или многокомпонентные, непрямые) и ряд других условий. При прямых осадочных реакциях комплексы антиген-антитело, образовавшиеся в первой фазе, укрупняются и выпадают в осадок. Это вторая, физико-химическая фаза таких реакций. Она неспецифична, но зато видима. Для ее реализации необходим электролит. Оптимальным электролитом является физиологический раствор. рН должна быть близкой к нейтральному значению. При увеличении или понижении рН, повышении концентрации электролита и температуры происходит диссоциация образовавшегося комплекса антиген - антитело с выделением антител. Для выявления комплексов антиген-антитело в многокомпонентные, сложные реакции иммунитета вводят индикаторные системы, или их известный компонент (обычно антитела) метят различными метками (радиоизотопы, флюорохромы, ферменты).  Эти метки позволяют обнаружить образовавшийся в первой

фазе реакции комплекс антиген-антитело. Для иммунодиагностики используются разные реакции иммунитета

86. Респираторные вирусные инфекции. Характеристика возбудителей. Грипп. Принципы химиотерапии. 

ОРВИ – это большая группа этиологически полиморфных заболеваний,

возбудители которых принадлежат к разным семействам вирусов. В одну группу

их объединяет основной путь передачи – воздушно-капельный.

Группа респираторных вирусов включает вирусы, обладающие выраженным

тропизмом к мукополисахаридам клеток слизистых оболочек респираторного

тракта. Разные респираторные вирусы обладают тропизмом к различным

эпителиальным клеткам, которые отличаются на протяжении респираторного

тракта → отсюда большое разнообразие клинических проявлений ОРВИ:

-риниты;

-фарингиты;

-трахеиты;

-бронхиты;

-ларинготрахеиты;

-первично-вирусная пневмония.

К группе респираторных вирусов также относятся вирусы, передающиеся

воздушно-капельным путем и вызывающие системные заболевания (корь,

эндемический паротит, краснуха).

Возбудители ОРВИ:

 РНКовые вирусы

I. сем.Orthomyxoviridae

- род InfluenzavirusА;

- род Influenzavirus В;

- род Influenzavirus С.

2

II. сем. Paramyxoviridae

1) подсемейство Paramixovirinae:

- род Respirovirus: вирус парагриппа 1 и 3 типа.

- род Morbillivirus: вирус кори.

- род Rubalavirus: вирус эпидемического паротита (свинка), вирус

парагриппа тип 2 и 4а и 4b.

- род Avulavirus (у птиц).

- род Henipavirus (вирусы Хендра, Hunax – эпидемические вспышки

тяжелых энцефалитов у людей в странах Юго-Восточной Азии и

Австралии).

2) подсемейство Pneumovirinae:

- род Pneumovirus: РСВ (респираторно-синцитиальный вирус).

- род Metapneumovirus: метапневмовирус один из ведущих

возбудителей инфекций дыхательных путей детей первого года

жизни.

III. сем. Picornaviridae

- род Rhinovirus (более 100 сероваров).

IV. сем. Reoviridae

V. сем. Coronoviridae

- род Coronavirus (SARS- синдром)

VI. сем. Togaviridae:

- род Rubivirus (вирус коревой краснухи).

 ДНКовые вирусы

I. сем. Adenoviridae

- род Mastadenovirus (аденовирус С человека).

II. сем. Parvoviridae

- род Bocavirus

III. сем. Herpesviridae

подсемейство Alphaherpesvirinae (ВПГ-1 и 2, вирус varicella-zoster)

II. Ортомиксовирусы (Orthomyxoviridae)

Вирус гриппа А: вызывает как эпидемические, так и пандемические случаи;

поражает людей, животных, птиц.

Вирус гриппа В: поражает людей, редко – животных; вызывает эпидемии;

Вирус гриппа С: редко поражает людей (единичные случаи).

Грипп – это острое инфекционное вирусное заболевание, характеризуется

поражением респираторного тракта, лихорадкой, общей интоксикацией,

нарушением деятельности сердечно-сосудистой и нервной систем.

3

Возбудители гриппа - РНКовые вирусы.   

БИЛЕТ 27

27. Грибы. Строение плесневых и дрожжевых грибов.

Грибы (Fungi, Mycetes) — низшие растительные организмы, не имеющие хлорофилла. Играют важную роль в круговороте веществ в природе, а также в промышленности при изготовлении хлеба, вина, пива. Среди грибов имеются возбудители заболеваний человека и животных. Грибы характеризуются более сложным строением, чем бактерии, и более совершенными способами размножения. Грибы покрыты оболочкой, имеют дифференцированное ядро, различные включения и вакуоли в цитоплазме.

Дрожжеподобные грибы имеют округлуш форму, размер 8—20 мкм, размножаются почкованием. В отличие от истинных дрожжей им свойственны диморфизм (иногда образуют мицелий) и отсутствие полового размножения. При нерациональном использовании антибиотиков Candida вызывают поражение всего организма — висцеральный кандидамикоз.

Плесневые грибы растут в виде переплетающихся трубок — гиф. Структурной вегетирующей единицей плесневого гриба является именно гифа [от греч. hypha, паутина] — разветвлённая микроскопическая трубка диаметром 2-10 мкм, содержащая цитоплазму и органеллы. Совокупность гиф обозначают термином мицелий [от греч. mykes, гриб, + helos, нарост]. Образование мицелия— отличительный признак истинных грибов (Eumycota). Гифы высших грибов содержат перегородки (септы), разделяющие их на отдельные клетки. Септы имеют отверстия, позволяющие цитоплазме и некоторым органеллам перетекать из одной клетки в другую. Гифы низших грибов перегородок не имеют, и такие гифы называют ценоцитными, или асептирован-ными. Таким образом, в целом плесневой гриб представляет собой ценоцит [от греч. koinos, общий, + kytos, клетка] — обширную территорию цитоплазмы с множеством ядер, располагающуюся в скоплении

трубок-гиф. Врастающая в субстрат часть тела гриба, абсорбирующая питательные вещества, — вегетативный мицелий, а растущая на поверхности субстрата часть — воздушный мицелий (рис. 2-9).

57. Серодиагностика. Реакции иммунитета, применяемые для серодиагностики.

Серодиагностика. Это метод диагностики, целью которого является обнаружение в сыворотке обследуемого антител и нарастания их титра (количества). Для его реализации используют различные реакции иммунитета как простые (агглютинация и ее разновидности), так и сложные (РСК, ИФА и др.). 

 73 Нарастание  титра антител, т.е. их инфекционная природа, устанавливается при исследовании парных сывороток. Так называют сыворотки, взятые от одного больного в разные сроки болезни с интервалом 5-7 дней. При исследовании сыворотки любого человека в ней можно обнаружить антитела различного происхождения - инфекционные, постинфекционные, нормальные, поствакцинальные. Концентрации трех последних различны, но на протяжении достаточно длительных промежутков времени титр их находится на одном и том же уровне или постепенно снижается. При инфекционных заболеваниях в связи с размножением возбудителей нарастает антигенное раздражение. В ответ на это в сыворотке возрастает количество инфекционных, связанных с заболеванием, антител. Таким образом, титр инфекционных антител нарастает в динамике заболевания, при этом абсолютно не важно, в каком количестве обнаруживаются специфические антитела при первом исследовании. Серологический метод диагностики применяют с конца первой, начала второй недели заболевания. Для осуществления серологических реакций, т.е. взаимодействия антител с антигеном, при серодиагностике для обнаружения искомого антитела к сыворотке прибавляют известный антиген - или микроорганизмы, вызвавшие их образование, или их компоненты, обладающие иммуногенностью. В качестве известного антигена для серодиагностики используются разнообразные антигенные диагностикумы. Они могут быть обычными диагностикумами, представляющими собой взвесь убитых микроорганизмов или их отдельных антигенов, или эритроцитарными диагностикумами - взвесью эритроцитов, на которых адсорбированы микроорганизмы или их антигены. В диагностическом варианте можно использовать почти все указанные для иммуноиндикации реакции иммунитета, но меченными радиоизотопами, флюорохромами должны быть антигены, а не антитела. Отличие диагностического варианта ИФА будет также заключаться в использовании не антимикробной иммунной меченной ферментом сыворотки, а меченной ферментом антиглобулиновой сыворотки, воспринимающей человеческие антитела в исследуемой сыворотке как антигены. Кроме того, для оценки напряженности антитоксического иммунитета при дифтерии и скарлатине раньше использовали реакция токсиннейтрализации in vivo (в организме здорового человека). Отсутствие гиперемии (местного действия токсина) через 24 часа после введения (в/к  1/40 DLM) токсина Шика (дифтерийный) или Дика (скарлатинозный) говорит о нейтрализации их антитоксинами, т.е. антителами против бактерийных и некоторых других токсинов, и в конечном счете о наличии антитоксического иммунитета. В настоящее время эти реакции не применяются, а для оценки напряженности антитоксического иммунитета и отбора контингента для 

 74 ревакцинации при дифтерии используется РПГА с дифтерийным антигенным анатоксическим диагностикумом.  

87. Острые кишечные вирусные инфекции. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. 

ОКИ – большая группа этиологически полиморфных заболеваний, возбудители которой принадлежат к различным группам микроорганизмов (простейшие, грибы, бактерии, вирусы). Все заболевания объединены в одну группу на основании эпидемиологического признака – пути распространения и входных ворот. Сем. Enterobacteriaceae - это семейство включает многочисленных представителей. Биологические свойства. Все энтеробактерии - палочки средней величины с закругленными концами, расположенные беспорядочно, аспорогенны, капсулообразование непостоянно. Одни энтеробактерии подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, другие неподвижны. По типу получения энергии являются факультативными анаэробами. Грамотрицательны. Культуральные свойства. Все энтеробактерии не требовательны к питательным средам. На МПА образуют однотипные колонии средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, бесцветные. На МПБ – равномерное помутнение. Для выделения энтеробактерий использую дифференциальнодиагностические среды. Биохимические свойства общие для всего семейства:- расщепляют глюкозу до кислоты или до кислоты и газа; - редуцируют нитраты в нитриты; - каталаза +, оксидаза -, OF-тест +/+ (окисление и ферментация).

Антигенное строение. Все энтеробактерии имеют О-антиген и К-антиген, Подвижные представители  имеют Н-антиген.  Факторы патогенности энтеробактерий делят на 4 группы: 1. Факторы, определяющие взаимодействие бактерий с эпителием  соответствующих экологических ниш и колонизацию зоны первичного инфицирования.  В настоящее время полагают, что сигналы, генерируемые при  адгезивных взаимодействиях, могут напрямую вызывать диарею.  2. Факторы, обеспечивающие устойчивость бактерий к факторам защиты  макроорганизма и способность размножаться in vivo 3. Факторы, индуцирующие синтез цитокинов и медиаторов воспаления, ассоциирующихся с иммунопатологией - бактериальные модулины. 4. Токсины и токсические продукты, вызывающие патологические  изменения в органах и тканях макроорганизма. Различают четыре типа токсинов: - энтеротоксины;- токсины, нарушающие цитоскелет клетки; - токсины, вызывающие гибель клетки – токсин Шига и шигоподобные токсины, а также энтерогемолизины; - токсины, влияющие на нервную систему кишечника посредством  освобождения нейромедиаторов-трансмиттеров, влияющих на гладкую мускулатуру кишечника. 

 

 

 

 

БИЛЕТ 28

28. Вирусы, их особенности, строение вириона. Принципы классификации вирусов. Вирусологическое исследование. 

Вирусы - это уникальные микроорганизмы, составляющие третье царство живой природы - царство Vira. Представители этого царства характеризуются следующими признаками. В отличие от всех других организмов они содержат лишь один тип нуклеиновой кислоты (1),

не имеют собственных белок-синтезирующих и энергетических систем (2), не имеют клеточной организации (3), обладают уникальным способом репродукции (4). Его уникальность состоит в том, что синтез основных структурных компонентов вирусов (белков и нуклеиновых кислот) происходит в разное время и в разных местах пораженной клетки. Этот способ репродукции называется дисъюнктивным (разобщенным). Наконец паразитизм вирусов - паразитизм особого рода, паразитизм на генетическом уровне (5). Вирусы существуют в двух формах: внеклеточной (вирион) и внутриклеточной. Размеры вирионов измеряются в нанометрах, т.е. они в тысячи раз меньше клеток. Малые размеры обуславливают прохождение вирусов через бактериальные фильтры - фильтруемость. В связи с отсутствием собственных белок-синтезирующих и энергетических систем вирусы не растут на искусственных питательных средах. Да и само понятие рост, как увеличение биомассы, к ним не применимо. Существование вирусов тесно связано с клеткой хозяина. Однако это совершенно иной внутриклеточный паразитизм нежели паразитизм гонококков, риккетсий, хламидий, малярийного плазмодия. Вирусы репрессируют (подавляют функцию) клеточного генома, а ее метаболические системы используют для синтеза собственных структурных компонентов. Более того, их генетический аппарат полностью или частично может встраиваться в клеточный геном и в дальнейшем функционировать и воспроизводиться как его часть. Это и есть проявления паразитизма на генетическом уровне. Близки к вирусам вироиды, инфекционные молекулы кольцевой РНК, и прионы - инфекционные белки, продукты и индукторы неизвестных генов. Они способны поражать нервные клетки, вызывая губчатые энцефалопатии. Вироиды весьма близки плазмидам - внехромосомным генетическим элементам бактерий.   Ъ

8.1. Строение вирионов.  

 77 Внеклеточная форма существования вирусов называется вирионом. Вирионы имеют различную форму (круглая, нитевидная, палочковидная, многогранника) и величину. Самые мелкие близки к размерам крупных белковых молекул, самые крупные - мельчайшим бактериям. Вирионы имеют единую схему организации. В центре вириона располагается нуклеиновая кислота вируса. По своему составу вирусные нуклеиновые кислоты не отличаются от нуклеиновых кислот прокариотов и эукариотов, а вот их строение может быть различным. Это могут быть одно- или двунитевые, линейные или кольцевые, цельные или фрагментированные молекулы. Тип нуклеиновой кислоты - важнейший таксономический признак вирионов. Вирусная нуклеиновая кислота покрыта белковой оболочкой, которую называют капсидной. Капсидная оболочка состоит из отдельных субъединиц - капсомеров. Их количество может быть различным. Белки капсидной оболочки обычно простые и способны к самосборке. Пространственная организация белков капсидной оболочки, их взаиморасположение определяет тип симметрии нуклеокапсида - спиральный, кубический или смешанный. Тип симметрии нуклеокапсида - важный таксономический критерий. Простейшие вирусы представляют собой нуклеокапсид. Вирионы многих вирусов поверх капсидной покрыты суперкапсидной оболочкой. Это сложноорганизованная структура, включающая белковый, углеводный и липидный компоненты. Наличие  липидов делает вирусы, имеющие суперкапсидную оболочку, чувствительными к эфиру. Белки суперкапсидной оболочки - это сложные белки. В состав суперкапсидной оболочки могут входить элементы клетки хозяина. Наличие суперкапсидной оболочки - одно из важнейших таксономических признаков вирусов.   

Представители царства Vira по типу нуклеиновой кислоты делится на 2 подцарства - рибовирусы и дезоксирибовирусы. В подцарствах выделяют семейства, рода и виды. Принадлежность вирусов к тому или иному семейству (всего их 19) определяется строением и структурой нуклеиновой кислоты, типом симметрии нуклеокапсида, наличием  суперкапсидной  оболочки. 

 79 Принадлежность к тому или иному роду и виду связано с другими биологическими свойствами вирусов: размер вирионов, способность размножаться в культурах ткани и курином эмбрионе, характер изменений, происходящих в клетках под воздействием вирусов, антигенные свойства, пути передачи, круг восприимчивых хозяев. Вирусы - возбудители болезней человека относятся к 6 семействам ДНК-овых и 13 семействам РНКовых вирусов. Краткая характеристика этих семейств приведена в таблицах  2, 3.

Вирусологическое исследование - это “золотой стандарт” вирусологии, проводится в специализированной вирусологической лаборатории в условиях возникновения эпидемической вспышки той или иной вирусной инфекции. Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли методы серодиагностики и иммуноиндикации. Они реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета  - РИА (радиоизотопный иммунный анализ), ИФА (иммуноферментный анализ), РИФ (реакция иммунофлюоресценции), РСК (реакция связывания комплемента), РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), РТГА (реакция торможения гемагглютинации) и др.. При использовании методов серодиагностики обязательно исследование парных сывороток. Четырехкратное нарастание титра антител во второй сыворотке является показателем свежеперенесенной инфекции. При исследовании одной сыворотки, взятой в острой стадии болезни, диагностическое значение имеет обнаружение антител класса IgМ, свидетельствующее о свежеперенесенной инфекции. Большим достижением современной вирусологии является внедрение в практику молекулярно-генетических методов диагностики вирусных инфекций (ДНК-зондирование, ПЦР).   

58. Иммуноиндикация. Реакции иммунитета, применяемые для иммуноиндикации. 

 

 88. Вирусные гепатиты. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика.

Вирусные гепатиты – это системные заболевания, характеризующиеся

преимущественным поражением печени, возбудители которых принадлежат к

различным семействам вирусов.

Гепатотропные вирусы представлены:

HAV – семейство Picornaviridae, род Hepatovirus.

HBV – семейство Hepadnaviridae, род Orthohepadnavirus.

HCV – семейство Flaviviridae, род Hepacivirus.

HGV – группа неклассифицированных HGV-подобных вирусов.

HDV – самостоятельный род Deltavirus.

HEV – род Hepevirus.

Эпидемиологически все гепатиты делятся на 2 группы:

- энтеральные (гепатит А и Е);

- парентеральные.

Наиболее распространенными являются гепатиты А и В.

Вирус гепатита А является типичным представителем семейства Picornaviridae.

Типовой вид – HAV – имеет один серотип. Установлено 6 генотипов HAV.

Вирус выращивают в культуре клеток.

Гепатит А – типичная энтеральная инфекция. Источник – больной человек,

реже – носитель. Наиболее опасен конец инкубационного периода и первая

неделя заболевания. Путь передачи – фекально-оральный, алиментарный, реже

– прямой контакт.

Микробиологическая диагностика основана главным образом на определении в

крови IgM, IgG (ИФА). Можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях.

Лечение симптоматическое. Для специфической активной профилактики

разработана инактивированная культуральная вакцина и рекомбинантная

генно-инженерная вакцина   

 

 

 

БИЛЕТ 29

29. Типы взаимодействия вируса с клеткой. Продуктивная вирусная инфекция. 

наличии рецепторов: - неспецифическая – за счет  электростатических сил; затем переходит в специфическую фазу, при которой прикрепительные белки вируса «узнают» комплементарные им рецепторы и прочно с  ними связываются. 2.Проникновение вирионов в клетку происходит путем рецепторного эндоцитоза   или путем слияния мембран суперкапсида вируса и клетки, или их  сочетание.  3.Депротеинизация вирусов - это освобождения его НК. Вирусы, проникшие  в клетку путем рецепторного эндоцитоза и находящиеся в рецептосоме, покидают ее  путем слияния мембран , если это сложные вирусы, и, возможно, при участии капсидных  поверхностных белков, если это простые вирусы, при этом происходит частичная  депротеинизация вирусов под действием ферментов, находящихся в мембране  рецептосомы и лизосомальных ферментов. Частично

дезинтегрированные вирусы  поступают в цитоплазму, где продолжается их «раздевание» с помощью протеаз  внутриклеточных мембран. В результате депротеинизации происходит дезинтеграция  вириона - на белок и нуклеиновую кислоту. Такое «раздевание» вируса производит  клетка с помощью своих лизосомальных ферментов. Освобожденная геномная НК  приобретает способность индуцировать репродукцию вирусов. Все события  последующих часов, связаны с нуклеиновой кислотой. Средний этап. Экспрессия вирусного генома начинается  после высвобождения вирусной НК. Реализация генетической программы вируса  начинается с процесса транскрипции с последующей трансляцией и репликацией  вирусного генома, в результате чего образуются компоненты вируса. Существуют два  способа формирования вирусных белков в зависимости от длины и-РНК. Короткие,  моноцистронные и-РНК кодируют отдельный, вирусный белок. Длинные,  полицистронные и-РНК, которые могут содержать всю информацию вирусного генома или ее часть, поступают на полирибосомы, на которых один гигантский полипротеин - предшественник. Этот полипептид нарезается вирусными и клеточными протеазами на  отдельные зрелые вирусные белки как неструктурные так и структурные.  1.У вирусов с двунитевой ДНК эти процессы происходят по универсальной для всего  живого схеме: геномная ДНК – транскрипция – и-РНК – трансляция – белок. Если  трансляция происходит в ядре, то она осуществляется клеточной ДНК-зависимой РНК- полимеразой (транскриптазой), если происходит в цитоплазме, то ее выполняет вирусная  транскриптаза, входящая в состав вириона. 2.У плюс РНК-вирусов геномная РНК одновременно является информационной РНК,  поэтому стадия транскрипции отсутствует и схема укорочена. Геномная плюс РНК – 2 трансляция – белок. Плюс РНК, выполняющая функцию и-РНК, поступает на  полирибосомы и полностью транслируется с образованием гигантского полипептида - предшественника, который нарезается протеазами на отдельные белки – неструктурные и  структурные. 3. Уминус РНК вирусов синтез белка происходит по схеме: геномная минус РНК -  транскрипция – и-РНК – трансляция – белок. Транскрипция осуществляется  собственнымитранскриптазами вирусов, возможно образование как коротких, так и  длинных и-РНК с последующей трансляцией зрелых белков .  4. Ретровирусы (возбудители ВИЧ инфекции, онкогенные вирусы) имеют диплоидный  геном, состоящий из двух идентичных молекул плюс РНК и фермент РНК зависимую  ДНК полимеразу (обратную транскриптазу или ревиртазу). Схема синтеза белка у  ретровирусов: геномная РНК – комплементарная ДНК (провирус) – транскрипция –  и-РНК – трансляция – белок. Заключительный период. Формирование вириона из отдельных компонентов вируса у большинства вирусов  осуществляется в цитоплазме. Простые вирусы образуются путем самосборки при взаимодействии НК вируса и  капсидных белков. У сложных вирусов формируется сначала нуклеокапсид, который  взаимодействуют с модифицированными мембранами клетки, одевается   суперкапсидной оболочкой, у некоторых вирусов под суперкапсидом формируется слой  матриксного белка (М-белок).  Выход вириона из клетки происходит или при разрушении, лизисе клетки, или путем  почкования.

59. Иммуноидентификация бактерий и вирусов. 

 89. ВИЧ – инфекция.

Вирус ВИЧ-инфекции (вирус иммунодефицита человека) относят к семейству  Rеtrоviridae, роду лентивирусов. Вирионы ВИЧ-вируса имеют сферическую форму. В сердцевине вириона содержится 2 копии однонитевой РНК, соединенные на одном из концов водородными связями. Геномные белки вируса - это обратная транскриптаза и внутренние белки р7 и р9. У вируса 9 генов, 3 из них кодируют структурные компоненты вириона:  gag - внутренние белки, pol - обратную транскриптазу, env - типоспецифические белки суперкапсидной оболочки. Важное значение имеют регуляторные гены. У этого вируса самая сложная система регуляции синтеза вирусных  компонентов. Они играют роль в переходе от латентной ВИЧ-инфекции к ее манифестации. Капсидная оболочка состоит из простых белков р18 и р24. Тип симметрии нуклеокапсида кубический. Суперкапсидная оболочка вируса образована двойным липидным слоем с расположенными на нем белковыми шипами из 2-х субъединиц (gp41 и gp120) и  как конверт покрывает нуклеокапсид. Белки суперкапсидной оболочки - это сложные гликопротеиды, выполняющие адресную и якорную функцию. Белки gp120 и gp41 являются и главными антигенными маркерами ВИЧ. Для вируса характерна антигенная изменчивость, что сдерживает создание вакцины против ВИЧ-инфекции. Антигенными свойствами обладают белки капсидной и суперкапсидной оболочек вируса. Антигенная изменчивость вируса может наблюдаться даже в организме в ходе инфекции или носительства. В настоящее время различают два антигенных варианта ВИЧ1 и ВИЧ2. Первый распространен в Америке и Европе, а второй - в Западной и Центральной Африке. Рецепторные белки ВИЧ gp120 и gp41 имеют тропизм к клеткам, несущим рецепторы CD4. Это прежде всего Тхелперы, а также клетки нейроглии, макрофаги моноциты. Гибель Т-хелперов приводит к развитию иммунодефицита. Особый тип репродукции ВИЧ, включающий  образование ДНК-транскрипта на матрице его РНК при участии обратной транскриптазы, и интеграция его в геном пораженной клетки, сложность регуляции функционирования вирусного генома ведет к длительному персистированию вируса в организме, обуславливая длительный инкубационный и латентный период болезни, ее обострения и прогресирующее тяжелое течение. В организме вирус находится в крови, проникает в слюну, сперму. 

 

 187 Эпидемиология и патогенез ВИЧ-инфекции. В настоящее время различают следующие пути передачи инфекции: половой, парентеральный, трансплацентарный. Поэтому группы риска по заболеваемости ВИЧ-инфекцией в первую очередь составляют: люди с заболеваниями крови, наркоманы, а также в силу профессиональной специфики врачилаборанты, хирурги, стоматологи. Прежнее представление о ВИЧинфекции как о болезни прежде всего гомосексуалистов не соответствует действительности. Проникая в организм с кровью (трансплацентарно, при периливании крови, при инъециях), со слюной через рану на коже, со спермой, влагалищной слизью при половом пути передачи вирус в первую очередь атакует лимфоциты CD4. Адресные белки суперкапсидной оболочки вируса gp41 распознают эти рецепторы, а якорные gp120 осуществляют с ними адсорбцию. Инфицирование макрофагов происходит как самим вирусом, так и комплексами вирусантитело при фагоцитозе, а белок gp41 позволяет адсорбироваться вирусу и на лишенных CD4-рецепторов клетках: нейронах, тромбоцитах и др. После адсорбции, проникновения вируса в клетку и  депротеинизации освобождается его РНК, и за счет геномного фермента вируса обратной транскриптазы образуется ДНК-транскрипт. Он интегрирует в клеточный

геном. ДНК-провирус долгое время может существовать в неактивной форме. Клеточный ядерный фактор, активирующий транскрипцию клеточной ДНК, может активировать и транскрипцию ДНК-провируса. Это приводит к переходу от латентной формы инфекции к ее манифестации, хотя с момента инфицирования может пройти 10 и более лет.  Активная репродукция вирусов, сопровождающаяся синтезом их нуклеиновых кислот, белков, сборкой и выходом вирионов, ведет к гибели поврежденных клеток и приводит к развитию характерных клинических симптомов. Прежде всего это развитие синдрома приобретенного иммунодефицита, т.к. гибель Т-хелперов приводит к подавлению клеточных и гуморальных иммунных ответов, а поражение макрофагов ведет к подавлению синтеза интерлейкина-1, снижению хемотаксиса и угнетению механизмов фагоцитоза. Инфицированные  макрофаги становятся основным резервуаром вируса в организме, т.к. гибель этих клеток не происходит. Они разносят вирус в различные органы и ткани, инфицируют новые Т-лимфоциты, взаимодействуя с ними в лимфоузлах.  ВИЧ-инфекция характеризуется многообразной патофизиологической и клинической картиной. Страдают не только органы иммунной системы, но и нервная, пищеварительная, дыхательная, сердечно-сосудистая системы. На фоне выраженного иммунодефицита присоединяются различные бактериальные и грибковые инфекции, вызванные условнопатогенными микроорганизмами (грибами рода Candida, Aspergillus, бактериями родов Actinomyces, Nocardia, Mycobacterium и др.). Клиническим симптомом поздних стадий ВИЧ-инфекции 

 188 является поражение ЦНС, развитие саркомы Капоши (гемангиома). Все симптомы развиваются постепенно и выраженность их индивидуальна. Методы микробиологической диагностики ВИЧ - инфекции. Основным методом диагностики ВИЧ-инфекции является выявление антигенных маркеров ВИЧ - белков gp41, gp120, p18, p24, p7, p9. С этой целью используют различные тест-системы ИФА для иммуноиндикации. Высокой специфичностью обладают методы генетического анализа с использованием вирусных нуклеиновых зондов и ПЦР. Возможно выделение вирусов в культуре тканей из лимфоцитов с последующей идентификацией вируса по ЦПД и в реакции вирусонейтрализации, но из-за сложности вирусологическое исследование широко не применяется и используется лишь в отдельных специализированных лабораториях. Методы оценки иммунного статуса выявляют резкое угнетение клеток Т4 и уменьшение показателя Т4/Т8 и также используются в лабораторной диагностике данного заболевания. Для широкого обследования населения и отбора возможно инфицированных лиц используют серологический метод диагностики - ИФА по обнаружению антител, но этот метод не является методом ранней диагностики ВИЧ-инфекции. Проблемы лечения и специфической профилактики ВИЧ-инфекции. Для лечения ВИЧ-инфекции в настоящее время используют противовирусный препарат азидотимидин (ретровир), а также иммуностимуляторы и симптоматическую терапию, так как больные умирают от вторичных гнойных инфекций, вызываемых условно-патогенными бактериями и грибами, и от развития опухолей на фоне выраженного иммунодефицита. Появляются сообщения и о новых активных препаратах, но на современном этапе медики констатируют, что их использование останавливает развитие выраженных клинических симптомов заболевания, но не освобождает клетки от провируса. Весьма перспективно создание средств, ингибирующих обратную транскриптазу. В настоящеее время ведутся исследования по созданию генноинженерных, убитых и химических вакцин.

 

 

 

 

БИЛЕТ  30

30. Фаги. Строение, Вирулентные и умеренные фаги. Типы взаимодействия фага с клеткой. Практическое применение фагов. 

По характеру взаимодействия с клеткой бактерии бактериофа¬ги делятся на вирулентные и умеренные. Вирулентные фаги всег¬да лизируют клетку бактерии. Умеренные фаги могут вызвать лизис клетки бактерии, но могут перейти и в неинфекционную форму. В этом случае молекула ДНК фага прикрепляется к ДНК бактерии и передается с нею дочерним клеткам. Фаг, существую¬щий в такой форме, называется профагом. Сравнительно недавно стало известно, что включение вирусной ДНК в бактериальную происходит путем кроссинговера между хромосомами бактерии и вируса. Хромосома вируса принимает кольцевую форму и при¬крепляется к определенному локусу хромосомы бактерии. Затем хромосомы бактерии и вируса разрываются, концы их соединя¬ются крест-накрест и профаг оказывается включенным в хромо¬сому клетки хозяина. В этом случае профаг является как бы частью ДНК бактерии и вместе с ней реплицируется. Клетки бактерии, имеющие в своей хромосоме профаг, называются лизогенными, а явление совместного существования ДНК бактерии и профага называется лизогенией. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЯВЛЕНИЙ БАКТЕРИОФАГИИ: 1. Фагопрофилактика инфекционных болезней с помощью поливалентных и видовых фагов. 2. Фаготерапия инфекционных болезней с помощью поливалентных и видовых фагов. 3. Фагодиагностика: а) определение вида бактерий на основе чувствительности к видовым фагам; б) фаготипирование – внутривидовая дифференцировка бактерий на основе чувствительности к типовым фагам, имеет значение для выявления источника заболевания. 4. Фагоиндикация – обнаружение фага в исследуемом материале является косвенным подтверждением наличия в нем одноименных бактерий (может служить методом диагностики некоторых инфекционных заболеваний). 5. Генная инженерия – создание клеток с новыми свойствами с помощью геномов фагов. 1-4 – это направления использования вирулентных фагов; в генной инженерии в качестве векторов генетического материала для создания клеток с новыми свойствами используют умеренные фаги. Их называют транслуцирующими.

60. Интерфероны: виды, механизм действия.

Интерференция вирусов: 

При заражении двумя разными вирусами одной ткани один подавляет другой. Это явление лежит в основе невосприимчивости к вирусным инфекциям. Это  

Интерферон – индуцибельный белок клеток позвоночных, появляется под влиянием интерфероногенов. Один из них – вирусная инфекция. Основная функция интерферона: подавление размножения вирусов. Виды (в зависимости от продуцирующей клетки): 

α – лейкоцитарный; 

β – фибробластический; 

γ – генно-инженерный. 

Интерферон – важнейший фактор, обладающий многогранной биологической активностью: стимулирует фагоцитоз, киллерную функцию Т-лимфоцитов, подавляет синтез комплемента, снижает гемопоэз, снижает развитие реакций гиперчувствительности замедленного и немедленного типов. 

Интерферон обладает активностью в отношении внутриклеточных вирусов. Он нарушает трансляцию иРНК на рибосомах, что ведет к прекращению синтеза вирусных белков. 

Интерферон появляется в клетке уже через 2 часа после заражения вирусом.. Защищает практически от всех видов вирусных агентов. 

Особенности интерферона: 

- подавляет репродукцию любых видов вирусов (т.е. не обладает специфичностью); 

- Обладает видовой специфичностью (защищает только свой вид). 

Универсальность интерферона делает его незаменимым в терапии вирусных инфекций. 

Интерферон обеспечивает защиту на уровне нуклеиновой кислоты, т.е. поддерживает нуклеиновый гомеостаз, а антитела и Т-лимфоциты – белковый гомеостаз. 

Индукторы синтеза эндогенного интерферона: 

- естественные 

(бактерии, вирусы, ЛПС); 

- синтетические 

(крупномолекулярные соединения: полифосфаты, поликарбонаты и т.п.) 

Применение интерферона: 

-средство антивирусной терапии.

90. Геморрагические лихорадки: ГЛПС, Эбола, Марбурга. 

http://www.studfiles.ru/preview/2787589/- таблица есть