СПИСОК
ЛИТЕРАТУРЫ................................................................................................49
СПИСОК
СОКРАЩЕНИЙ
ИГ
иммуноглобулины
пн
пар нуклеотидов
тпн
тысяч
пар нуклеотидов
е.а.
единица активности
ИПТГ
изопропилтиогалактозид
ТЕМЕД
N,N,N,'N'-тетраметил-этилен-диамин
трис
трис(гидроксиметил)аминометан
дНTФ
дезоксиаденозинтрифосфат
ддНТФ
дидезоксинеклеотидтрифосфат
дНТФ
дезоксинуклеотидтрифосфат
рATФ
рибоаденозинтрифосфат
ДТТ
дитиотрейтол
Na2ЭДТА
этилендиаминтетраацетат
натрия
SDS
додецилсульфат
натрия
X-Gal
5-бромо-4-хлоро-3-индолил-бета-D-галактозид
ВВЕДЕНИЕ
В
основе функционирования
гуморального
иммунитета
у млекопитающих
лежит сложный
комплекс
молекулярно-генетических
и физиологических
механизмов,
обеспечивающих
реорганизацию,
мутагенез
и клональную
экспрессию
генов иммуноглобулинов.
Возникновение
этой подсистемы
иммунитета
связывают с
появлением
хрящевых рыб.
На
ранних этапах
эволюции гены
ИГ были организованы
в виде повторяющихся
кластеров V-J-C
генных сегментов.
При подобной
организации
разнообразие
продуцируемых
антител основывалось,
прежде всего,
на количестве
имевшихся
в геноме кластеров,
каждый из которых
кодировал один
вариант полипептидных
субъединиц
ИГ. В ходе дальнейшей
эволюции произошел
переход от
кластерной
к сегментарной
организации,
обеспечивающей
дополнительный
источник
разнообразия
за счет комбинативной
рекомбинации
генных сегментов.
Предполагается,
что этот переход
также имел
важное значение
для регуляции
экспрессии
генов и осуществления
механизмов
клонального
отбора антителопродуцирующих
клеток в ходе
иммунного
ответа.
Настоящая
работа представляет
собой часть
проекта, направленного
на изучение
эволюции механизмов
изотипического
исключения
генов легких
цепей ИГ у низших
позвоночных.
Целями работы
являлись изучение
структуры и
организации
генов легких
цепей ИГ стерляди
(Acipenser ruthenus), представителя
филогенетически
древней группы
костно-хрящевых
рыб.
ОБЗОР
ЛИТЕРАТУРЫ
СТРОЕНИЕ
ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
Иммуноглобулины
выполняют в
организме
позвоночных
функцию гуморальных
антител и
антиген-связывающих
рецепторов
В-лимфоцитов.
Особенностью
этого класса
белков является
огромное
разнообразие,
позволяющее
им вступать
во взаимодействие
с фактически
любыми биологическими
макромолекулами.
Типичная
молекула ИГ
состоит из
двух идентичных
тяжелых (H) и двух
идентичных
легких (L) полипептидных
цепей. H- и L-цепи
построены из
нескольких
доменов, каждый
из которых
состоит примерно
из 110 аминокислотных
остатков. У
млекопитающих
существует
пять классов
H-цепей: g,
m, a,
d,
и e.
Каждая H-цепь
построена из
одного N-концевого
и нескольких
(трех или четырех)
C-концевых доменов.
N-концевые домены
различаются
в разных молекулах
и называются
вариабельными
(V) доменами.
C-концевые домены
имеют одинаковую
структуру у
молекул одного
класса и называются
константными
(С) доменами
(рис. 1) (Пол, 1987).
Среди
L-цепей млекопитающих
различают
два типа: лямбда
и каппа. Каждая
L-цепь состоит
из одного
вариабельного
и одного константного
доменов. В
индивидуальной
молекуле ИГ
присутствует
только один
тип L-цепи (Roitt et al.,
1993).
Гигантское
разнообразие
ИГ обеспечивается
прежде всего
тем, что V и C области
кодируются
разными генами
(генными сегментами),
физически
разнесенными
в зародышевой
ДНК.
В
формировании
вариабельных
доменов H-цепей
участвуют
три генных
сегмента:
вариабельный
(V), D-сегмент (от
англ. diversity- разнообразие)
и J-сегмент (от
англ. joining- соединяющий).
С-области
Н-цепей разных
классов кодируются
отдельными
генами (Roitt et al., 1993).
Рис.
1. Схема строения
молекулы
иммуноглобулина.
Типичная
молекула
иммуноглобулина
содержит две
идентичные
легкие (L) и две
идентичные
тяжелые (H) цепи,
связанные
между собой
ковалентно
дисульфидными
связями. Каждая
L-цепь состоит
из одного
вариабельного
(VL)
и одного константного
(СL)
домена. Н-цепь
состоит из
одного VH
и нескольких
CН
доменов.
В формировании
зрелого гена
L-цепи участвуют
три генных
сегмента:
V-сегмент и
J-сегмент кодируют
V-домен, C-сегмент
кодирует константный
домен. На поздних
стадиях развития
В-лимфоцита
генные сегменты,
кодирующие
вариабельные
домены, объединяются
в различных
сочетаниях,
образуя матрицу
для экспрессии
L- и H-цепей (Seidman et al.,
1979; Durdik et al., 1984).
ГЕНОМНАЯ
ОРГАНИЗАЦИЯ
И ЭКСПРЕССИЯ
ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ
ИГ У МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Различные
виды млекопитающих
имеют сходную
схему организации
и экспрессии
генов ИГ. Одним
из наиболее
изученных
в этом отношении
видов является
человек. Лямбда
и каппа цепи
ИГ у человека
кодируются
генами, расположеными
в разных локусах
и на разных
хромосомах.
Каппа локус
состоит из
большого количества
Vk
генных сегментов,
собраных в
группы, пяти
Jk
и одного Сk
сегмента..
Такой тип
организации
называется
сегментарным
(рис. 2). Лямбда
локус состоит
из группы Vl
сегментов,
точное количество
которых неизвестно,
и семи пар Jl-Cl
сегментов.
Три из них (JCl4
- JCl6)
являются псевдогенами
(Hieter et al., 1981; Roitt et al., 1993).
В
процессе развития
В-лимфоцита
в кроветворных
органах один
из V сегментов
соединяется
с одним из J
сегментов
посредством
сайтспецифической
рекомбинации
(Schatz et al., 1992). В этот
процесс вовлекаются
специальные
олигомерные
последовательности:
гепта- и нонамеры,
фланкирующие
с 3' стороны V
сегмент и с
5' стороны J сегмент
(рис. 3) (Aguilera et al., 1987; Hesse et al.,
1989). Отличительной
особенностью
лямбда и каппа
локусов является
конфигурация
промежутков
между гепта-
и нонамерами,
называемых
спейсерами.
С V и J генными
сегментами
лямбда типа
ассоциированы
23 пн и 12 пн спейсеры
соответственно,
а с V и J сегментами
каппа типа -
12 пн и 23 пн спейсеры
(Durdik et al., 1984; Stavnezer et al., 1985).
л
Рис.
2. Схема строения
лямбда и каппа
локусов генов
L-цепей ИГ человека.
Лямбда
локус содержит
много Vl
сегментов
и семь пар
близкорасположенных
Jl-Cl.
Три из них
яляюся псевдогенами
(Y).
Каппа локус
содержит много
Vk
пять Jk
и один Ck
генный сегмент
(Hieter et al., 1981; Roitt et al., 1993).
Обозначения:
- сигнальные
олигомеры.
Рис.
3. Схема расположения
олигонуклеотидных
последовательностей,
задействованных
в сайтспецифической
рекомбинации
в каппа локусе
млекопитающих.
Эти последовательности
фланкируют
с 3‘ стороны
VL
сегмент и с
5’ стороны JL
сегмент. Во
время рекомбинации
гептамер и
нонамер одного
из VL
сегмента
объединяются
с гептамером
и нонамером
одного из JL
сегмента. Это
делает возможным
соединение
VL
и JL
сегментов
без нарушения
рамки трансляции
(Aguilera et al., 1987; Hesse et al., 1989).
Обозначения:
- сигнальные
олигомеры.
Последовательность,
в которой
рекомбинируют
локусы L-цепей,
строго упорядочена
во времени.
Показано, что
первыми перестраиваются
локусы каппа
типа, причем
если в одной
хромосоме
перестройка
оказалась
нефункциональной,
тоесть не привела
к появлению
полноценного
гена, то рекомбинация
происходит
в каппа локусе
на гомологичной
хромосоме. В
случае повторной
абортивной
перестройки
аналогично
происходят
перестройки
в лямбда локусах.
Если в клетке
непродуктивно
перестроились
все четыре
локуса, то она
превращатся
в 0-клетку и
подвергается
апоптозу. Если
же перестройка
одного из локусов
привела к образованию
функционального
гена, то рекомбинация
остальных
локусов блокируется.
Детали механизма
блокирования
неизвестны,
однако установлено,
что необходимым
условием для
него является
транскрипция
продуктивно
перестроенного
гена. В результате
в каждом индивидуальном
лимфоците
синтезируется
только один
тип L-цепей, каппа
или лямбда, и
экспрессия
гена происходит
только на одной
из двух гомологичных
хромосом. Эти
феномены,
называемые
изотипическим
и аллельным
исключениями
лежат в основе
ключевого
принципа
функционирования
иммунной
системы - принципа
клональной
селекции (Пол,
1987; Strob, 1987).
В
организме
млекопитающих
генерируется
свыше десяти
миллионов
вариантов
антител, хотя
в геноме содержится
значительно
меньшее количество
генных сегментов,
которые могут
участвовать
в формировании
вариабельных
доменов. В случае
L-цепей, основным
источником
разнообразия
является комбинативное
сочетание
V и J сегментов.
Дополнительным
источником
является смещение
рекомбинационной
рамки в месте
их соединения.
Кроме того, V
генные сегменты
могут обмениваться
участками
ДНК с псевдогенами
посредством
генной конверсии.
Очень существенный
вклад в разнообразие
специфичностей
антител вносит
соматическое
мутирование
вариабельных
генных сегментов
в сайтах, участвующих
в формировании
антигенсвязывающего
центра. Соматическое
разнообразие
генерируется
при вторичном
иммунном
ответе путем
включения
гипермутационного
механизма
в клетках памяти
в зародышевых
центрах лимфатических
узлов (Tonegawa 1983; Roitt et al.,
1993).
ГЕНОМНАЯ
ОРГАНИЗАЦИЯ
И ЭКСПРЕССИЯ
ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ
ИГ У НИЗШИХ
ПОЗВОНОЧНЫХ
Хрящевые
рыбы.
Гуморальный
иммунный ответ
в виде специфических
антител обнаруживается
только у позвоночных.
Наиболее
примитивными
видами, у которых
обнаружена
способность
синтезировать
ИГ, являются
хрящевые рыбы.
Представители
трех основных
таксонов (акулы,
скаты и химеры)
продуцируют
антитела в
ответ на введение
широкого спектра
антигенов.
Однако, в отличие
от млекопитающих,
гетерогенность
сывороточных
антител у
хрящевых рыб
выражена очень
слабо. Кроме
того, у них не
обнаружено
созревание
иммунного
ответа - при
вторичном
введении антигена
спектр антител
не меняется
(Flajnik, 1996). Результаты
исследований
последних лет
продемонстрировали,
что организация
генов ИГ у
хрящевых рыб
также имеет
ярко выраженные
особенности.
У
хрящевых рыб
обнаружены
гены трех типов
L-цепей, локализующиеся
в разных локусах.
В каждом локусе
геные сегменты
организованы
в кластеры,
имеющие по
одному V, J и C генному
сегменту (рис.
4). Таких кластеров
содержится
несколько
десятков или
даже сотен в
одном локусе
на расстоянии
12-15 тпн друг от
друга (Rast et al., 1994).
Гены
первого типа
найдены у
разнозубой
акулы (Heterodontus
francisci)
(Shamblott and Litman, 1989) и малого
ската (Raja
erinacea)
(Anderson et al., 1995). У акулы
кластеры имеют
размер 3-6 тпн.
V и J, J и C генные
сегменты
разделены
примерно 0,5 и 4
тпн соответственно.
У ската V и J
сегменты слиты
в зародышевой
ДНК.
Гены
второго типа
обнаружены
у пятнистой
химеры (Hydrolagus
colliei)
(Maisey, 1984), песчаной
акулы (Carcharhinus
plumbeus)
(Hohman et al., 1992; Hohman et al., 1993), разнозубой
акулы и малого
ската (У всех
изученных
видов в кластерах
этого типа
V и J генные сегменты
соединены
уже в зародышевом
геноме. V и C гeнные
сегменты
разделены 2-3
тпн.
Рис.
4. Схема строения
локусов генов
L-цепей ИГ у акулы.
Организация
генов у акулы
имеет кластерный
тип. Каждый
кластер имеет
размер 3 - 6 тпн
и содержит по
одному VL,
JL
и CL
генному сегменту.
Обнаружено
три типа генов
L-цепей ИГ. Локусы
генов первого
и третьего
типов имеют
схожую организацию.
В этом случае
VL
и JL,
JL
и CL
сегменты
разделены
примерно 0,5 и 4
тпн соответственно
(А) (Rast et al., 1994).
В
локусе генов
второго типа
VL
и JL
сегменты
соединены
уже в зародышевом
геноме (Б).
Третий
тип генов L-цепей
найден у акулы-няньки
(Gynglimostoma
cirratum)
(Greenberg et al., 1993) и разнозубой
акулы (Rast et al., 1994). В
кластерах
этого типа
V и J, J и C генные
сегменты
разделены, как
и в кластерах
первого типа,
примерно 0,5 и 4
тпн соответственно.
V и J генные сегменты
фланкируются
сайтами
специфической
рекомбинации
со спейсерами
12 и 23 пн, что соответствует
конфигурации
спейсеров в
локусах каппа
типа млекопитающих.
По первичной
структуре гены
третьего типа
тоже наиболее
близки к генам
каппа типа
высших позвоночных
(гомология по
аминокислотной
последовательности
составляет
около 60%).
Гены
этих трех типов
имеют между
собой низкую
степень гомологии:40-50%
по нуклеотидной
последовательности
С сегментов
и 50-60% по последовательности
V сегментов
(Hohman et al., 1993).
Полученные
данные показывают,
что у хрящевых
рыб имеется
очень большое
количество
генных сегментов.
Однако специфика
организации
генов исключает
комбинативное
сочетание
сегментов.
Все разнообразие
антител у
хрящевых рыб
формируется
только за счет
экспрессии
большого количества
кластеров.
Данные
о нуклеотидных
последовательностях
из разных локусов
выявили низкую
гетерогенность
генов (85-95%), что
указывает
на отсутствие
соматического
мутагенеза
(Rast et al., 1994).
Костистые
рыбы.
Анализ
сывороточных
антител пещерного
сомика (Ictalurus
punctatus)
показал наличие
трех типов
L-цепей с различными
молекулярными
массами: 26, 24 и
22 кДа. Два вида
антител мыши,
3F12 и 1G7, захватывают
более 90% от общего
количества
иммуноглобулинов
в реакции
иммунопреципитации.
При этом 3F12 антитела
связываются
с молекулами,
содержащими
L-цепи массой
24 и 22 кДа, а 1G3 антитела
с другой субпопуляцией,
содержащей
L-цепи массой
26 кДа. На основе
этих данных
L-цепи разделяют
на два класса,
называемые
F и G (Lobb et al.,1984).
Геномная
организация
локуса L-цепей
G типа имеет
кластерный
тип (рис. 5). В каждом
кластере содержится
по одному J и
C сегменту и
два V сегмена.
Вариабельные
генные сегменты
расположены
всегда в противоположной
транскрипционной
полярности
к J и C сегментам
. В ряде геномных
клонов один
V сегмент располагался
с 3' стороны от
C генного сегмента.
Размер кластера
равен примерно
3 тпн, расстояние
между кластерами
около 6 тпн (Ghaffari
and Lobb, 1993; Bengten, 1994).
Хотя
гены L-цепей
сомика имеют
низкую гомологию
с генами других
позвоночных
(40-50% по нуклеотидной
последовательности),
их можно отнести
к каппа типу
высших позвоночных,
так как сходство
по первичной
структуре с
лямбда типом
ниже. Кроме
того, конфигурация
спейсеров имеет
характер каппа
типа: 12 пн спейсер
ассоциирован
с V, 23 пн спейсер
с J сегментом
(Ghaffari and Lobb, 1993).
У
радужной форели
(Oncorhynchus
mykiss),
представителя
другого семейства
костистых
рыб, также
обнаружены
два типа L цепей
(Daggfeldt et al., 1993). Один из
них (L1) высокогомологичен
G типу сомика
по структуре
V и C областей
и соответствующий
локус имеет
сходную организацию.
По-видимому,
у этих видов
объединение
V и J сегментов
происходит
только за счет
инверсий с
восстановлением
единой полярности
транскрипции.
Разнообразие
вариабельных
доменов образуется
в результате
комбинативного
сочетания
V и J сегментов
в пределах одного
кластера. Не
исключается,
что в перестройки
могут вовлекаться
и соседние
кластеры.
Интересной
особенностью
костистых
рыб является
очень высокая
пропорция мРНК,
представляющей
так называемые
стерильные
транскрипты
(Ghaffari and Lobb, 1993). Эти транскрипты
включают в
себя только
С-сегменты
и фланкирующие
их 5’и 3’-нетранслируемые
участки. Количество
стерильных
транскриптов
у сомика и
форели в 5 раз
превышает
количество
полных VJC-транскриптов.
Рис.
5. Геномная
организация
локуса генов
L-цепей ИГ у
пещерного
сомика.
Генные
сегменты
организованы
в кластеры.
Каждый кластер
содержит два
VL
и по одному
JL
и CL
сегменту и
имеет размер
около 5 тпн.
Расстояние
между JL
и CL
около 1000 пн, VL
сегменты удалены
от 5' конца JL
сегмента на
3 тпн. VL
сегменты всегда
расположены
в противоположной
транскрипционной
полярности
по отношению
JL
и CL
сегментам
(Ghaffari and Lobb, 1993).
Амфибии.
У
шпорцевой лягушки
(Xenopus
laevis)
выявлено три
семейства
генов L-цепей
ИГ, кодирующих
три различных
изотипа: L1 (ро),
L2 (сигма) и L3 (рис.
6).
Все
три локуса
имеют сегментарный
характер организации.
L1 локус содержит
множественные
VL1
сегменты,
разделенные
в геноме 2.1 - 3.6 тпн,
пять JL1
сегментов,
три из которых
идентичны,
и один CL1
генный сегмент
(Stewart et al., 1993). JL1
и VL1
сегменты
фланкируются
каноническими
гепта- и нонамерными
сигнальными
последовательностями,
разделенными
12 пн у VL1
и 23 пн у JL1
сегментов
(Sakano et al., 1980).
Локус
генов второго
типа разделяется
на два семейства,
s1
и s2,
которые в геноме
располагаются
отдельно. Геном
лягушки содержит
множественные
Vs1
и несколько
Vs2
геных сегментов,
одну пару Js1-Cs1
и пару Js2-Cs2
(Schwager et al., 1991). Расположение
генов этого
типа друг
относительно
друга точно
не определено.
Недавно
был обнаружен
третий тип
генов L-цепей
у лягушки. В
геноме лягушки
содержится
шесть семейств
V сегментов
этого типа.
Общее количество
VL3
элементов
составляет
по меньшей
мере 30 копий.
Каждый VL3
элемент может
рекомбинировать
с одной из двух
пар JCL3
генных сегментов
(Haire et al., 1996).
Гены
трех типов
значительно
различаются:
гомология на
аминокислотном
уровне составляет
приблизительно
30% (Zezza et al., 1991). В то же
время, ряд признаков
позволяет
соотнести
гены L1 и L3 типа
с каппа и лямбда
типами млекопитающих.
Семейство
генов первого
типа можно
отнести к каппа
типу по нескольким
причинам (Zezza et
al., 1992): а) высокая
гомология
первичной
структуры
(более 50%); б) существенное
сходство геномной
организации
локуса (много
VL1
и один CL1
генный сегмент);
в) кофигурация
спейсеров между
гепта- и нонамерыми
соответствует
каппа типу;
г) JL1
и CL1
генные сегменты
разделены
примерно 3.5 тпн,
что приблизительно
равно расстоянию
между JLk
и CLk
элементами
человека (Sakano et
al., 1979; Hieter et al., 1982) и значительно
больше чем
расстояние
между JLl
и CLl
млекопитающих
(Blomberg et al., 1982; Udey, 1987).
Рис.
6. Геномная
организация
локуса первого
и третьего
типов генов
L-цепей ИГ у
шпорцевой
лягушки.
Локус
семейства
L1 содержит
множественные
VL1
сегменты, пять
JL1
сегментов
один CL1
генный сегмент.
Расстояние
между VL1
равно 2.1 - 3.6 тпн.
Локус семейства
L3 имеет около
30 VL3
сегментов,
располагающихся
группами, JL3
и CL3
сегменты
располагаются
парами: JCL31
и JCL32
(Stewart et al., 1993; Haire et al., 1996).
Третий
тип генов L-цепей
лягушки более
близок к лямбда
типу млекопитающих:
а) более высокая
гомология с
генами лямбда
типа млекопитающих
(около 50% с l-
и 30-40% с k-типом
по аминокислотной
последовательности);
б) JL3
и CL3
генные сементы
экспрессируются
всегда парами
JL31-CL31
и JL32-CL32,
что напоминает
ситуацию в
лямбда локусе
человека и
мыши (Haire et al., 1996).
Гены второго
типа L-цепей
лягушки незначительное
и приблизительно
одинаковое
сходство с
генами каппа
и лямбда типов
млекопитающих
(30-40% и 25-40% по нуклеотидной
последовательности,
соответствено)
(Schwager et al., 1991).
Генетическое
разнообразие
у лягушки
достаточно
велико и сравнимо
с разнообразием
генов у млекопитающих.
Однако репертуар
антительных
специфичностей
в сыворотке
крови значительно
уступает
репертуару
высших позвоночных
(Hsu et al., 1991). Этот парадокс
можно объяснить
наличием
механизма
соматической
селекции клонов
В-лимфоцитов,
который элиминирует
клетки, несущие
антитела,
специфичные
к собственным
антигенам
организма,
а также те
клетки, которые
продуцируют
несколько типов
антител (Wilson et al.,
1992).
Основной
вклад в формирование
разнообразия
L-цепей антител
у лягушки дают
первое и третье
семейства
генов, имеющие
высокий комбинативный
потенциал и
большое разнообразие
зародышевых
V генных (Haire et al.,
1996). Второе семейство
имеет несколько
слабо отличающихся
друг от друга
VL2
элементов и
не играет
существенной
роли в формировании
разнообразия
(Stewart et al., 1993). Таким
образом, разнообразие
генов L-цепей
у лягушки а
создается
посредством:
а) комбинативного
соединения
V и J генных
сегментов;
б) смещения
рекомбинационной
рамки при соединении
V и J сегментов.
Нельзя исключить,
что определенный
вклад в разнообразие
может вносить
соматический
мутагенез.
Во всяком случае,
наличие этого
механизма
показано для
генов H-цепей
лягушки (Zezza et al.,
1992).
ЭВОЛЮЦИЯ
ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ
ИГ
Согласно
наиболее
популярной в
настоящий
момент гипотезе
гены ИГ и Т-клеточных
рецепторов
произошли от
одного предкового
гена, кодировавшего
один домен
путем различных
вариантов
последовательных
дупликаций
(рис. 7).
В
эволюции генов
ИГ можно выделить
три основных
события.
1.
Разделение
предкового
V-подобного
гена на V и J
сегменты и
возникновение
механизма
генерации
разнообразия
путем соматической
рекомбинации.
Предпологается,
что это событие
связано с
внедрением
транспозона
в предковый
ген и осуществилось
до разделения
ИГ и Т-клеточных
рецепторов у
предков хрящевых
рыб (Gilbert, 1990). Наличие
в геноме акул
и скатов слитых
VJ генов в локусах
L-цепей классов
I и II, является,
по-видимому,
вторичным
событием и,
возможно,
обусловлено
фиксацией
генов, кодирующих
антитела строго
определенной
специфичности
(Anderson et al., 1995).
2.
Возникновение
механизмов
соматического
мутагенеза
генов ИГ. У
млекопитающих
соматический
мутагенез
обеспечивает
как минимум
половину
разнообразия
антител, являясь
основой аффинного
созревания
антител при
вторичном
иммунном
ответе (Пол,
1987). Достаточно
выражен соматический
мутагенез
также у птиц
(Thompson and Neiman, 1987; Reynaund et al., 1987).
Ряд
данных позволяет
предполагать,
что соматический
мутагенез
может осуществляться
у хрящевых рыб
и у амфибий,
но эти результаты
нуждаются в
более тщательном
изучении. В
частности,
у хрящевых рыб
получение
достоверных
свидетельств
затруднено
наличием
множественых
кластеров
генов, что не
позволяет
надежно соотносить
данные по геномной
структуре и
структуре кДНК
(Litman et al., 1993).
3.
Переход от
кластерной
к сегментарной
организации
генных сегментов.
Сегментарная
организация
может иметь
несколько
преимуществ.
Во-первых,
увеличивается
разнообразие
продуцируемых
антител за
счет дополнительных
возможностей
комбинирования
разных V и J сегментов.
Во-вторых,
уменьшается
размер локуса
за счет